羊毛角蛋白中巯基含量的测定及其应用

羊毛角蛋白中含有大量半胱氨酸残基,这些半胱氨酸残基中巯基之间的相互作用对维持蛋白质的二级和三级结构有着重要的意义。为了测定羊毛角蛋白中的巯基含量,本工作在不同变性剂以及pH值体系中详细比较了4,4’-二吡啶基二硫(DPS)法与经典的埃尔曼试剂法测定巯基时的响应性。结果发现:在pH值为7.0、8 mol/L尿素、1%十二烷基硫酸钠(SDS)、3 mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)的缓冲液体系中,DPS法相较于埃尔曼试剂法具有更高的巯基响应性。因此,在上述缓冲液体系中,采用DPS法验证了过氧化氢溶液对羊毛角蛋白中巯基的氧化作用以及高温对羊毛纤维蛋白中二硫键的破坏作用。实验结论表明,DPS法准确可靠,适用于羊毛角蛋白中巯基含量的测定。