3’,4’-二羟基黄酮醇通过抑制caspase1的活化减轻血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥厚

目的探讨3’,4’-二羟基黄酮醇(DiOHF)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌肥厚的作用及其机制。方法选取7~8周龄雄性C57小鼠40只随机分为对照组(DMSO+生理盐水,n=10)、DiOHF组(6 mg·kg^(-1)·d^(-1),溶于10%DMSO+90%花生油,n=10)、AngⅡ组(1.5 mg·kg^(-1)·d^(-1),溶于0.9%生理盐水,n=10)以及AngⅡ+DiOHF组(AngⅡ1.5 mg·kg^(-1)·d^(-1)+DiOHF 6 mg·kg^(-1)·d^(-1),n=10),各组注射不同试剂溶液4周后停止,使用心脏超声评价各组小鼠心功能。麻醉后颈椎脱臼处死小鼠,称量体质量和心肺质量,取心尖组织进行PCR检测各组小鼠心肌纤维化基因结缔组织生长因子(CTGF)、纤维连接蛋白(Fn1)和炎症基因caspase1和IL-1βmRNA的表达。采用免疫印迹检测各组小鼠心尖组织cleaved caspase1和mature IL-1β蛋白的表达情况。其余组织固定包埋后取短轴最大径平面切片进行HE、Masson染色,评价心肌肥厚及纤维化。选取大鼠心肌细胞系(H9C2)分为DMSO、DiOHF(10μmol/L,溶于DMSO中)、AngⅡ(1μmol/L,溶于培养基中)、DiOHF+AngⅡ(10μmol/L DiOHF预处理2 h后加入1μmol/L AngⅡ共处理24 h)4组。24 h后对细胞骨架进行鬼笔环肽染色,在荧光显微镜下检测细胞形态,测量心肌细胞表面积。同时收获不同组细胞进行裂解后进行PCR检测caspase1和IL-1βmRNA的表达。采用免疫印迹检测各组细胞活化的cleaved caspase1、mature IL-1β和心肌肥厚相关蛋白脑钠肽(BNP)蛋白的表达情况。结果小鼠实验中,DiOHF的注射可减轻AngⅡ诱导的小鼠射血分数(EF)下降,降低心体质量比和心肺质量比(HW/BW、HW/LW)、心肌横截面积(CSA)和心肌胶原的沉积(均P<0.05)。RT-RCR显示与AngⅡ组相比,AngⅡ+DiOHF组Fn1、CTGF和炎症相关性基因caspase1、IL-1βmRNA的表达降低(均P<0.05)。免疫印迹显示AngⅡ+DiOHF组cleaved caspase1和mature IL-1β蛋白较AngⅡ组表达水平明显降低(0.77±0.09比1.18±0.14,0.90±0.13比1.56±0.30,均P<0.05)。H9C2细胞实验中,与AngⅡ组比较,AngⅡ+DiOHF组减少了细胞表面积,降低了caspase1和IL-1βmRNA的表达,减少了BNP和cleaved caspase1、mature IL-1β蛋白的表达(1.15±0.02比1.45±0.03,0.50±0.03比1.38±0.07,1.14±0.07比2.13±0.13,均P<0.05)。结论DiOHF通过抑制caspase1和IL-1β蛋白的激活,改善AngⅡ诱导的小鼠心脏肥厚和纤维化,保护小鼠心功能。

(±)-3,5-二羟基-7,4′-二甲氧基二氢黄酮醇和(±)-3,5,7-三羟基-4′-甲氧基二氢黄酮醇的全合成

Dihydroxy-7,4′-dimethoxy-dihydroflavonol and （±）-3,5,7-trihydroxy-4′-methoxy-dihydroflavonol were found in many medicinal plants, here we describe a concise synthesis route by selective protection, aldol-condensation, 30% H2O2 epoxidation, cyclization and deprotection from 2,4,6-trihydroxyacetophone and anisaldehyde.

枳椇子降尿酸功效成分

研究枳椇子降尿酸活性成分,为枳椇子的开发应用提供基础。采用乙醇提取,大孔树脂、MCI、ODS等多种层析方法分离,经高尿酸动物模型对有效部位筛选活性成分,核磁共振鉴定化学结构。结果表明:枳椇子醇提物经大孔树脂分离得到30%乙醇洗脱物作用效果最明显,该部分经进一步分离得到3个化合物,分别是3,5,3’,4’,5’-五羟基二氢黄酮醇(Ⅰ)、杨梅素(Ⅱ)、二氢杨梅素(III)。三者均能够抑制黄嘌呤氧化酶,半抑制浓度(Half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为12.80、15.36、19.56μg/m L,其中化合物Ⅰ为首次从枳椇子中分离得到并证实具有降尿酸作用。因此:二氢异黄酮是枳椇子降尿酸功效成分。