超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱法测定银杏叶保健食品中4’-O-甲基吡哆醇

基于超声辅助萃取结合超高效液相色谱-串联质谱法建立检测银杏叶保健食品中4’-O-甲基吡哆醇(4’-O-methylpyridoxine,MPN)的高灵敏分析方法。对样品采用纯水超声辅助萃取,探究提取时间对目标物提取效率的影响。目标物经ACQUITY-UPLC BEH-C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱分离,以甲醇和水为流动相梯度洗脱,流速0.25 mL/min,柱温30℃。电喷雾离子源正离子多反应监测模式采集,外标法定量。纯水超声辅助萃取10 min,提取效果最佳。MPN在1~500ng/mL质量浓度范围内线性关系良好,相关系数r为0.9996,方法检出限为0.2μg/kg,定量限为0.7μg/kg,加标回收率为97.49%~100.42%,方法重复性相对标准偏差为0.27%。在实际样品检测中,检出样品MPN含量为0.78~80.34 mg/kg。建立的超声辅助萃取结合超高效液相色谱-串联质谱法操作简单、灵敏度与准确性高,选择性好,适用于银杏叶保健食品中MPN的高灵敏定量检测。

中药白果毒性物质4’-O-甲基吡哆醇的高效液相色谱-紫外检测器检测技术

目的建立高效液相色谱-紫外检测器(HPLC-UV)法测定中药白果中的毒性物质4’-O-甲基吡哆醇(MPN)。方法色谱柱:Inertil^(®)ODS-SP(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-10 mmol/L甲酸铵水溶液(7∶93);柱温:30℃;检测波长:220 nm;流速:1.0 ml/min;进样量:10μl。结果定量限、检测限、线性关系、重复性、进样精密度、稳定性均良好。结论本法可用于中药白果中的毒性物质MPN的测定。

白僵菌对酚类转化及僵蚕中4-O-甲基葡萄糖苷化产物的研究进展

僵蚕是由家蚕经球孢白僵菌感染僵化而死的干燥虫体,其感染过程实际上是白僵菌发酵的过程。本文总结了白僵菌对酚类4-O-甲基葡萄糖苷化作用的规律和僵蚕化学成分研究进展,提出僵蚕形成过程的转化反应和可能的产物,旨在为其物质基础研究和质量标准建立提供思路。

“N-in-One Cocktail”探针法评价4-羟甲基苯基-O-β-D-吡喃阿洛糖苷对CYP450酶的抑制作用

目的：建立基于UFLC-ESI-MS/MS技术的“N-in-One Cocktail”探针法,预测4-羟甲基苯基-O-β-D-吡喃阿洛糖苷可能出现的食物-药物、药物-药物相互作用,评价其在体外对人肝微粒体CYP450酶活性的影响.方法：4-羟甲基苯基-O-β-D-吡喃阿洛糖苷与CYP450酶特异性探针底物：非那西丁（CYP1A2）、右美沙芬（CYP2D6）、氯唑沙宗（CYP2E1）、甲苯磺丁脲（CYP2C9）、奥美拉唑（CYP2C19、CYP3A）、咪达唑仑（CYP3 A4）、睾酮（CYP3A4）、咪达唑仑（CYP2C）在人肝微粒体进行孵化反应.同时检测对应的9种代谢产物（乙酰氨基酚、右啡烷、6-羟基氯唑沙宗、4-羟基甲苯磺丁脲、5-羟基奥美拉唑、1＇-羟基咪达唑仑、6β-羟基睾酮、4-羟基咪达唑仑、奥美拉砜）的浓度,通过与对照组比较,确定4-羟甲基苯基-O-β-D-吡喃阿洛糖苷对以上CYP450酶活性的影响.结果：4-羟甲基苯基-O-β-D-吡喃阿洛糖苷在0～200μmol/L时对所研究的CYP450酶亚型基本不存在抑制作用.结论：4-羟甲基苯基-O-β-D-吡喃阿洛糖苷可能不会引起有临床意义的CYP450酶抑制现象的发生.

2′,4″-O-二(三甲基硅)红霉素A肟的合成研究

目的深入研究 2′ ,4″ O 二 (三甲基硅 )红霉素A肟 (EMAO)的合成反应。方法通过对反应过程的监测和产品分析 ,考察溶剂、硅烷化试剂、催化剂对反应的影响 ,研究Z、E异构体的反应活性。结果反应可在室温下进行 ,CH3 CN作溶剂最好 ,用量是EMAO的 5～ 6倍 (体积与质量比 ) ;硅烷化试剂HMDS为EMAO的 3倍摩尔质量较好 ;催化剂Py·HCl和NH4Cl分别为EMAO的 0 3～ 0 5倍和 1 2～ 1 5倍摩尔质量较好。产品收率达 95 % ,纯度达 90 %。结论EMAO的 2′、4″位的两个羟基硅烷化反应是分步进行的 ,反应活性E EMAO大于Z EMAO。

4-(4-苯基哌嗪-1-基)-3-O-甲基-D-肌醇的制备及镇咳活性

右旋肌醇甲醚经缩酮制化得3-O-甲基-1,2:5,6-二-O-异亚丙基-D-肌醇,经甲磺酰化、水解、与4-苯基哌嗪缩合制得左羟丙哌嗪类似物4-(4-苯基哌嗪-1-基)-3-O-甲基-D-肌醇,总收率38%。镇咳药效实验表明,目标物对致咳小鼠的镇咳作用明显,但不及左羟丙哌嗪。

3-O-甲基-4,6-O-苯亚甲基-N-(2-吡啶基)-α-D-葡萄糖的合成研究

研究了以α-D-葡萄糖为原料,经异丙叉基保护、甲基化、苯亚甲基化等步骤合成了3-O-甲基-4,6-O-苯亚甲基-N-(2-吡啶基)-α-D-葡萄糖,产物经质谱、核磁共振谱及红外光谱对其进行了结构表征分析。N-杂环取代的糖类化合物是一种重要的医药和有机合成中间体,该类化合物将在合成糖基、核苷类似物、杂环化合物、糖多肽等具有潜在药理活性的化合物中具有广阔的应用前景.

一步法合成3-羟基-6-O-甲基红霉素

利用克拉霉素生产过程中的前体2′,4″-O-二(三甲基硅基)-6-O-甲基红霉素A 9-O-(1-乙氧基环己基)肟为原料,一步反应实现脱除2′-三甲基硅基、4″-三甲基硅基、9-O-(1-乙氧基环己基)、9-肟基四个保护基及脱克拉定糖5个反应,得到3-羟基-6-O-甲基红霉素,总得率88%。

2-羟基-6-甲氧基苯乙酮-4-O-β-D-葡萄糖甙的全合成研究

本文通过以间苯三酚为原料,合成了2-羟基-6-甲氧基苯乙酮-4-O-β-D-葡(?)糖甙,为验证该化合物的结构提供了依据,同时合成了11个中间体及一个副产物(3-甲基-4,6-二甲氧基-2-羟基苯乙酮),并对该副产物的反应机理进行了推测。

3-羟基-6-O-甲基红霉素的合成

对3-羟基-6-O-甲基红霉素(Ⅳ)的合成进行了研究,可采用3条路线制得。路线1以克拉霉素(Ⅲ)为原料,在稀盐酸中水解脱去克拉定糖制得Ⅳ。该路线中,缩酮化副反应不可避免,w〔半缩酮副产物(Ⅴ)〕=9.3%。该文以克拉霉素的前体2,′4″-O-二(三甲基硅烷基)-6-O-甲基红霉素A 9-O-(1-异丙氧基环己基)肟(Ⅰ)为原料,两步(路线2)或一步(路线3)反应制得Ⅳ。路线2,Ⅳ的总收率为72.8%,w(Ⅳ)=94.8%,w(Ⅴ)<1%;路线3,Ⅳ的收率为81.7%,w(Ⅳ)=93.4%,w(Ⅴ)<1%。这两条路线均可有效地抑制副产物Ⅴ的生成,制得高纯度目标产物Ⅳ,而且都以克拉霉素的前体为原料,可与克拉霉素联产,大大简化了合成工艺,具有产业化前景。

泰利霉素关键中间体3-OH-6-O-甲基红霉素的合成研究

对泰利霉素关键中间体3-羟基-6-O-甲基红霉素(4)的合成进行了研究,以克拉霉素前体2′,4″-O-二(三甲基硅基)-6-O-甲基红霉素A9-O-(1-乙氧基异丙叉基)肟(1)为原料,通过对一步法工艺优化得到产品4,通过使用缓冲体系和两边同时滴加盐酸和NaNO_2的方式来控制脱肟过程的pH,该方法显著提高了产品纯度,缩短了反应时间,可有效抑制半缩酮副产物的生成,制得高纯度目标产物4,可与克拉霉素联产,大大简化了合成工艺,具有工业化前景。

4’O-甲基补脂查尔酮B的体外抗胃癌活性

目的:研究4’O-甲基补脂查尔酮B的体外抗胃癌活性。方法:4’O-甲基补脂查尔酮B孵育胃癌细胞系AGS后,采用MTT和集落克隆形成实验检测细胞生长,划痕实验检测细胞迁移,流式细胞实验检测细胞周期和凋亡,Western blot实验检测双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A(DYRK1A)蛋白表达。结果:4’O-甲基补脂查尔酮B对胃癌细胞AGS的IC_(50)为(7.7±1.3)μmol/L,并能浓度依赖性地抑制集落克隆形成以及抑制迁移,诱导周期阻滞及凋亡,并抑制DYRK1A的表达(P<0.05)。结论:4’-O-甲基补骨脂查尔酮B能够通过抑制DYRK1A产生显著的体外抗胃癌活性。

2,3,4,6-O-四苄基-D-葡萄糖的合成

2,3,4,6-O-四苄基-D-葡萄糖是合成伏格列波糖的关键中间体。本文以甲基-α-D-葡萄糖甲苷为起始原料,经苄基保护和脱甲基两步反应得到目标化合物,其结构经MS和1H NMR确证。该方法原料价格低廉易得,操作简单,反应总收率74.6%。

DMAP催化合成三-O-乙酰化红霉素的研究

利用 4-N ,N -二甲氨基吡啶 (DMAP)催化剂催化合成了三 -O -乙酰化红霉素衍生物 ,与传统方法相比 ,该法具有简单、快速、收率高等优点 .一些影响因素及反应机理被讨论 ,目标物收率为 90 %以上 .

3,5-双-O-苯甲酰基-2-脱氧-2,2-二氟-1-氧代-D-呋喃核糖的合成与表征

以N,N-二甲基-4-氨基吡啶为催化剂,用3R,3S-2-脱氧-2,2-二氟-1-氧代-D-呋喃核糖和苯甲酰氯反应,合成了药物Gemcitabine的关键中间体3,5-双-O-苯甲酰基-2-脱氧-2,2-二氟-1-氧代-D-呋喃核糖,用元素分析、IR与1H NMR对其结构进行了表征。用异丙醇作溶剂进行重结晶,分离出非对映异构体产物。讨论了不同催化剂、反应温度和反应物比对反应的影响。

单甲基化表没食子儿茶素没食子酸酯的化学合成

表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)经甲基化后在抗过敏、降血脂等方面具有更高的生物活性。但茶叶中甲基化EGCG含量较低,为进一步研究其生物活性,本文对其半合成路线进行了优化。先以EGCG为原料制得五苄基化的表没食子儿茶素(EGC),然后将没食子酸丙酯经4-甲氧基苯甲醛二甲缩醛保护,甲基化,脱保护,苄基化,水解得到3,4-二苄氧基-5-甲氧基苯甲酸,再与苄基化EGC酯化和脱苄基得到表没食子儿茶素3-O-甲基没食子酸酯(3″-Me-EGCG);同样将没食子酸丙酯经全乙酰化、选择性甲基化、脱除乙酰基、苄基化、水解得到3,5-二苄氧基-4-甲氧基苯甲酸,再与苄基化EGC酯化和脱苄基得到表没食子儿茶素4-O-甲基没食子酸酯(4″-Me-EGCG);总产率分别为53%和57%。

E-、Z-2-(1-咪唑基)-O-(α-甲基对卤苄基)-2′,4′-二氯苯乙酮肟硝酸盐的合成与结构表征

首先以 2 ,4 -二氯氯代苯乙酮、咪唑、羟胺和对卤苯乙酮为原料 ,分别合成 E-、Z- 2 - ( 1-咪唑基 ) - 2′,4′-二氯苯乙酮肟 ( E、 Z)和对卤 -α-氯乙苯 ( A 和 B) , E和 Z分别与 A 和 B反应 ,生成E-、Z- 2 - ( 1-咪唑基 ) - O- ( α-甲基对卤苄基 ) - 2′,4′-二氯苯乙酮肟硝酸盐四个新化合物 ,产率为 52 .0 %～60 .0 % ,并经元素分析、IR和 1H NMR进行了表征。

7-O-取代-8-甲基香豆素和4H-色烯-4-酮化合物与NBS/CCl_4试剂的溴化反应

7-O-取代-8-甲基香豆素和4-H-色烯-4-酮化合物是合成Seco-DCK和Seco-DCP类似物的重要中间体.报道了在NBS/CCl4条件下,这两类化合物8-位甲基溴代反应的情况.通过实验发现,这两类化合物8-位甲基溴代反应较一般芳环苄位的溴代更为复杂,存在多个反应位点.影响8-位甲基溴代选择性和收率的主要因素有三:邻位基团空间位阻大小、自由基引发催化剂的使用与否以及邻位基团的电性因素.通过控制反应条件,可以中等收率得到8-位甲基溴代化合物.

6-去甲氧基-4′-O-甲基茵陈色原酮在Caco-2细胞模型中的转运方式

目的:研究一枝蒿黄酮类成分6-去甲氧基-4′-O-甲基茵陈色原酮(DM)在Caco-2细胞模型中的转运特性。方法:采用Caco-2细胞单层模型研究DM的双向转运,考察药物质量浓度、方向和温度对DM细胞转运的影响。应用HPLC法,采用Agilent Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%醋酸水溶液为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长280 nm,柱温25℃,检测DM在介质中的含量,计算其表观渗透系数(P_(app))。结果:DM的细胞转运P_(app)随着浓度的增大而减小,呈现浓度依赖性;低温条件下时,DM的双向的Papp值均显著性降低。结论:DM在Caco-2细胞单层模型中的转运过程主要以主动转运载体介导的方式,没有方向依赖性,也不涉及外排蛋白转运载体。

僵蚕化学成分研究

目的:研究僵蚕的化学成分。方法:利用反相硅胶柱层析和反相制备液相色谱等手段进行分离纯化,并通过1H-NMR、13C-NMR等波谱技术进行结构鉴定。结果:从僵蚕乙酸乙酯萃取物中分离得到9个化合物,分别鉴定为:槲皮素-7-O-β-D-4-O-甲基吡喃葡萄糖苷(1)、山柰酚-7-O-β-D-4-O-甲基吡喃葡萄糖苷(2)、槲皮素(3)、山柰酚(4)、环(缬-脯)二肽(5)、腺苷(6)、尿嘧啶(7)、环(丙-脯)二肽(8)、白僵菌素(9)。结论:其中,化合物1~4、6、8均为首次从僵蚕中分离得到,化合物1、2为4-O-甲基葡萄糖苷化产物,并且为特征化合物。