细胞表面β1,4-半乳糖基转移酶1功能研究进展

β1,4-半乳糖基转移酶1(β1,4-galactosyltransferase1,β4GalT1)是人们研究最广泛、最深入的糖基转移酶之一。β4GalT1的基因编码了长形和短形两种蛋白,长形的=βGalT1比短形的β4GalT1在胞浆区多了13个氨基酸的尾巴,正是由于这种差异造成了β4GalT1定位以及功能上的不同,短形的βGalT1和部分长形的β4GalT1分布在高尔基体上,发挥糖基转移酶的基本功能,还有一部分长形的β4GalT1分布在细胞表面,发挥粘附分子样作用,在精卵结合、神经突触生长、神经元迁移、肿瘤细胞迁移等过程中有非常重要的意义。文章主要从β4GalT1的基本结构、β4GalT1与多种配体之间的相互作用介导了细胞不同的生物学功能、β4GalT1与细胞骨架蛋白的关系等几个方面综述细胞膜表面F4GalT1的研究进展。

β4GalT1-CD200R1复合物在小胶质细胞炎性活化中的作用

目的:探讨β1,4-半乳糖基转移酶-1(β4GalT1)和CD200R1相互作用对小胶质细胞炎性活化的调节作用及其分子机制。方法:免疫共沉淀技术结合Western Blot法研究β4GalT1和CD200R1在体内外的相互作用;细胞免疫荧光技术观察两者定位。构建小胶质细胞-神经元共培养体系,阻断CD200-CD200R1结合,RT-PCR技术和ELISA试剂盒检测BV2细胞炎性因子i NOS、CD86、IL-1β、TNF-α的表达变化,LDH试剂盒检测神经元损伤情况。结果:β4GalT1和CD200R1有相互作用且存在共定位。CD200-CD200R1阻断剂增强LPS诱导的小胶质细胞炎性活化和神经元损伤,CD200R144号位突变体增强炎症因子释放和神经元损伤。CD200R144号位调节CD200-CD200R1结合,该突变体影响CD200-CD200R1的正常结合。结论:β4GalT1通过调节CD200R1第44号位的N-糖基化修饰,进而调节小胶质细胞的炎性活化及其介导的神经元损伤。

肿瘤坏死因子-α在骨关节炎成纤维样滑膜细胞中上调β1，4-半乳糖基转移酶-I的表达

目的探讨肿瘤坏死因子（TNF）-α与β1，4-半乳糖基转移酶-I（β1，4-GalT-I）在骨关节炎滑膜炎症过程中的相互关系。方法提取各8例骨关节炎患者（试验组）和膝关节游离体患者（对照组）的滑膜组织，运用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测滑膜组织中B1，禾GalT-I和TNF-α表达水平，运用免疫荧光双标法检测β1，4-GalT-I和TNF-α在滑膜组织中的共定位情况；培养成纤维样滑膜细胞（FLSs），运用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测脂多糖刺激后TNF-α表达变化及运用实时荧光定量聚合酶链反应（real-timePCR）检测脂多糖和TNF-α刺激后，β1，4-GaIT-I的表达变化；运用t检验和单因素方差分析进行统计学分析。结果①与对照组[β1，4-GalT．I（0．48±0．09），TNF-α（0．46±0．07）相比，骨关节炎滑膜组织中β1，4-GaIT-I（0．94±0．16）和TNF-α（1．19±0．19）表达均明显增加（t=3．47，t=4．06，均P〈0．01），且存在共定位；②脂多糖能够诱导FLSs β1，4-GalT-I[11．2±0．9与2．9±0．5（量效），22．3±2．3与4．4±0．9（时效），F=83．03，F=157．58，均P〈0．05]表达增加；③脂多糖在FLSs中促进TNF-α[（1256±96）pg／ml与（101±7）pg／ml，F=124，F=93．6，均P〈0．01]表达增加；③TNF-α在FLSs中也诱导β1，4-GalT-I[23．2±1．9与8．4±1．3（量效），23．9±1．8与11．5±1．3（时效），F=431．96，均P〈0．05]的表达增加。结论在骨关节炎的滑膜炎症过程中，FLSs可能运用TNF-α调控β1，4-GalT-I的表达。