4型菌毛、毒素及蛋白酶在动物源气单胞菌的检测

将来源于鱼、猪、犬等９种动物的１８株气单胞菌分离株通过ＡＤ（氨苄青霉素－糊精）培养基纯化。另以大肠杆菌束状菌毛相关（ｂｆｐ－ｒｅｌａｔｅｄ）基因的ＰＣＲ引物对ＥＢ１（ＧＡＴＴＧＡＡＴＣＴＧＣＡＡＴＧＧＴＧＣ）—ＥＢ２（ＧＧＡＴＴＡＣＴＧＴＣＣＴＣＡＣＡＴＡＴ）扩增，用ｄｉｇｏｘｉｎｇｅｎｉｎ－１１－ｄＵＴＰ标记，构建核酸探针，作斑点杂交试验，用以检测上述气单胞菌菌株的４型菌毛，同时以溶血试验检测其毒素，用脱脂奶溶蛋白圈试验检测其蛋白酶。结果显示，在１８个菌株中，４型菌毛、毒素和蛋白酶均为阳性者为１０株（５５．６％）；３项指标均无肯定的阳性结果者４株，两者合计共１４株，占检测总数约８０％（１４／１８），提示这３种毒力因子存在较高的相关性。所有鱼源株（５株）三项指标皆为阳性；４株猪分离株三项指标均为阳性者占一半；

嗜水气单胞菌J-1株粘附素及其受体分析

以EPC细胞和HEp 2细胞为细胞模型 ,用嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila ,Ah)J 1株进行粘附试验 ,同时以Ah4型菌毛的抗血清作粘附抑制试验 ,用以分析AhJ 1株的粘附素及其受体。EPC细胞粘附和粘附抑制试验证实 ,AhJ 1株粘附素受体具有甘露糖、胆固醇成分 ,有少量半乳糖成分 ,无葡萄糖成分。HEp 2细胞粘附和粘附抑制试验证实 ,与其它非菌毛粘附素如S层及外膜蛋白相比 ,Ah 4型菌毛的粘附作用较为显著。抗 4型菌毛抗体抑制细菌的粘附力达 80 %以上。抗S层、外膜蛋白抗体也能使细菌的粘附力下降 ,表明Ah的粘附作用由菌毛粘附素与非菌毛粘附素共同参与。