食管鳞癌组织中基质金属蛋白酶-3和溶酶体相关4次跨膜蛋白B-35的表达

目的探讨食管鳞癌组织中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和溶酶体相关4次跨膜蛋白B-35(LAPTM4B-35)的表达及其临床意义。方法采用免疫组化S-P法检测120例食管鳞癌和60例癌旁正常食管黏膜组织中MMP-3和LAPTM4B-35的表达。结果食管鳞癌组织中MMP-3和LAPTM4B-35的阳性率分别为75.00%(90/120)、58.33%(70/120),癌旁正常食管黏膜组织中分别为15.00%(9/60)、10.00%(6/60),差异均有统计学意义(P均<0.05)。食管鳞癌组织中MMP-3的表达与浸润纤维膜与否、TNM分期、淋巴结转移与否有关(P均<0.05)。食管鳞癌组织中LAPTM4B-35的表达与浸润纤维膜与否、TNM分期有关(P均<0.05)。食管鳞癌组织中MMP-3和LAPTM4B-35的表达呈正相关关系(r=0.488,P<0.001)。结论食管鳞癌组织中MMP-3和LAPTM4B-35具有较高的阳性表达水平,且两者可能与食管鳞癌的侵袭转移有关。

胃癌组织中溶酶体相关四次跨膜蛋白B、三叶因子家族1表达与胃癌的关系

目的探讨胃癌组织中溶酶体相关四次跨膜蛋白B(LAPTM4B)、三叶因子家族1(TFF1)蛋白表达与胃癌的关系。方法选取2015年8月至2018年6月郑州人民医院收集的80例胃癌组织及40例胃癌癌旁组织,采用免疫组织化学染色技术检测LAPTM4B、TFF1蛋白表达情况,观察不同病灶最大径、TNM分期、组织学分化程度、淋巴结转移情况、浸润程度及胃癌组织中LAPTM4B、TFF1蛋白的阳性表达率。结果胃癌组织中LAPTM4B蛋白阳性表达率为61.25%、TFF1蛋白阳性表达率为68.75%,胃癌癌旁组织中LAPTM4B蛋白阳性表达率为25.00%、TFF1蛋白阳性表达率为35.00%;胃癌组织均高于癌旁组织(P<0.05)。在TNM分期(Ⅲ期+Ⅳ期)、发生淋巴结转移的胃癌组织中LAPTM4B蛋白阳性表达率分别为78.79%、74.42%,高于TNM分期(Ⅰ期+Ⅱ期)48.94%、未发生淋巴结转移45.95%的病人(P<0.05);在TNM分期(Ⅲ期+Ⅳ期)、发生淋巴结转移、低分化的胃癌组织中TFF1蛋白阳性表达率分别为90.91%、81.40%、87.10%,高于TNM分期(Ⅰ期+Ⅱ期)53.19%、未发生淋巴结转移54.05%、高分化和中分化的57.14%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌组织中LAPTM4B、TFF1表达强度明显较癌旁组织增强,可能与胃癌的发生及发展有一定的关系。

LAPTM4B-35、CTGF蛋白在食管胃交界部腺癌中的表达及其意义

目的探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白b(lysosomeassociated protein transmembran e-4b,L A P T M4B)基因-35及结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白在食管胃交界部腺癌组织中的表达及其意义.方法采用免疫组织化学染色及蛋白印迹分析检测137例食管胃交界部腺癌组织中LAPTM4B-35及CTGF蛋白的表达情况,分析蛋白表达与患者临床病理参数的关系及对患者预后的影响.结果LAPTM4B-35蛋白在89.1%的食管胃交界部腺癌组织中呈高表达状态,LAPTM4B-35高表达组癌细胞发生远处转移(P=0.011)、肿瘤进展至TNMⅢ/Ⅳ期(P=0.026)显著多于低表达组.CTGF蛋白在51.1%的癌组织中呈高表达状态,CTGF高表达组发生远处转移(P=0.033)、肿瘤直径>5 cm(P=0.021)均多于低表达组.癌组织中LAPTM4B-35蛋白与CTGF蛋白表达之间呈正相关关系(r=0.218,P=0.010).单因素生存分析显示LAPTM4B-35、CTGF蛋白高表达的患者其术后生存时间分别显著低于LAPTM4B-35、CTGF蛋白低表达的患者(双侧log-rank检验,P<0.001).LAPTM4B-35蛋白表达(P<0.001)、发生远处转移(P<0.001)、淋巴结转移(P=0.007)、查见脉管癌栓(P=0.022)及患者性别(P<0.001)是影响食管胃交界部腺癌患者的独立预后因子.结论LAPTM4B-35及CTGF蛋白的高表达与肿瘤的侵袭转移及不良预后密切相关.

血清LAPTM4B-35及DKK1联合低剂量超声造影在肝肿瘤良恶性诊断中的应用价值

目的探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白B-35(LAPTM4B-35)、Dickkopf相关蛋白1(DKK1)在肝肿瘤血清中的表达以及联合低剂量超声造影在肝肿瘤良恶性诊断中的应用价值。方法收集2021年1月至2022年8月青岛市中心医院急诊创伤外科进行治疗的160例肝肿瘤患者临床资料。根据病理学结果,将患者分为良性组(n=74)和恶性组(n=86)。比较两组血清LAPTM4B-35、DKK1水平及低剂量超声造影指标;多因素Logistic回归分析肝恶性肿瘤的影响因素;ROC曲线分析血清LAPTM4B-35、DKK1联合低剂量超声造影对肝恶性肿瘤的诊断效能。结果恶性组患者血清LAPTM4B-35、DKK1表达水平均高于良性组(P<0.05)。恶性组达峰时间低于良性组(P<0.05),峰值强度显著高于良性组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析,结果显LAPTM4B-35、DKK1、达峰时间、峰值强度是发生肝恶性肿瘤的影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清LAPTM4B-35、DKK1、低剂量超声造影联合检测诊断肝恶性肿瘤的AUC为0.960,敏感性为89.53%,特异性为91.89%,优于其各自单独预测(Z两者联合-LAPTM4B-35=5.116、Z两者联合-DKK1=4.986、Z两者联合-达峰时间=4.657、Z两者联合-峰值强度=4.214,P<0.05)。结论肝肿瘤恶性患者血清LAPTM4B-35、DKK1表达水平显著升高,联合低剂量超声造影在肝恶性肿瘤的诊断中具有较高的应用价值。

能谱CT与血清LAPTM4B-35、KLF5联合检测对早期原发性肝癌患者的诊断价值

目的:探究能谱计算机断层扫描(CT)与血清溶酶体相关4次跨膜蛋白B-35(LAPTM4B-35)、Kruppel样因子5(KLF5)联合检测对早期原发性肝癌患者的诊断价值。方法:选取本院2021年6月至2023年6月收治的94例原发性肝癌患者作为研究组,94例肝硬化患者作为良性肝病组及医院健康体检者作为对照组,所有受试者均行能谱CT扫描并采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清LAPTM4B-35和KLF5水平;采用Logistic回归分析和ROC曲线分析原发性肝癌的影响因素和血清LAPTM4B-35和KLF5水平诊断原发性肝癌的诊断效能。结果:能谱CT检测原发性肝癌的准确度、灵敏度和特异度分别为89.89%、90.43%和89.36%。与对照组和良性肝病组相比,研究组血清LAPTM4B-35、KLF5水平异常升高(P<0.05)。多因素Logistic回归分析LAPTM4B-35、KLF5是影响原发性肝癌的危险因素(P<0.05)。根据ROC曲线得知,血清LAPTM4B-35和KLF5诊断原发性肝癌的曲线下面积(AUC)为0.874、0.848,二者联合诊断原发性肝癌的AUC为0.938。LAPTM4B-35和KLF5在原发性肝癌诊断中准确度为85.64%、84.57%,三者联合检测在原发性肝癌诊断中准确度为94.15%。结论:原发性肝癌患者血清LAPTM4B-35、KLF5水平显著升高,能谱CT与血清LAPTM4B-35、KLF5联合检测可提高早期原发性肝癌的诊断价值。

溶酶体相关4次跨膜蛋白B对结直肠癌增殖和侵袭的影响

目的：探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白B （LAPTM4B）在结直肠癌增殖和侵袭中的作用。方法采用实时定量PCR检测30对结直肠癌及相应癌旁组织中LAPTM4B mRNA的表达水平，并取6对结直肠癌组织通过免疫组织化学方法检测LAPTM4B蛋白表达水平。选取结直肠癌细胞系HCT116分别构建LAPTM4B过表达和低表达细胞株，采用CCK8实验检测LAPTM4B对结直肠癌细胞增殖能力的影响，采用Transwell实验检测LAPTM4B对结直肠癌细胞侵袭能力的影响。结果无论mRNA还是蛋白水平，LAPTM4B在结直肠癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织（P＜0．01）。 LAPTM4B过表达细胞株的增殖能力和侵袭能力均显著增强（P＜0．01），而LAPTM4B低表达细胞株的增殖能力和侵袭能力则显著减弱（P＜0．01）。结论 LAPTM4B可促进结直肠癌细胞的增殖和侵袭，有可能成为一项重要的预后分子标记物。

含有MS4A7基因启动子的荧光素酶报告基因质粒的构建及意义

目的构建含有人4次跨膜监视蛋白A(MS4A)基因启动子的萤火虫荧光素酶报告基因质粒。方法用PCR方法扩增获得含有人MS4A7基因启动子的DNA片段,将其连接至TA克隆质粒后转移至虫荧光素酶质粒pGL3-basic中,得到pGL3-MS4A7-Promoter重组质粒;经限制性内切酶酶切、PCR及测序鉴定得到确认;将该质粒转染进入HL-60细胞,并检测细胞中虫荧光素酶的活性。结果 pGL3-MS4A7-Promoter重组质粒插入片段和相邻序列正确,克隆的MS4A7基因片段有启动子活性。结论成功构建了pGL3-MS4A7-Promoter报告基因质粒,为进一步研究MS4A7基因的表达调控奠定了基础。

子宫内膜癌组织LAPTM4B-35和LRG1表达变化及其临床意义

目的探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白B-35(LAPTM4B-35)和富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)在子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法选取86例子宫内膜癌患者手术切除的子宫内膜癌组织及其癌旁正常组织,采用real-time PCR法检测LAPTM4B-35、LRG1 mRNA表达。分析子宫内膜癌组织LAPTM4B-35、LRG1 mRNA表达与患者临床病理参数的关系。以子宫内膜癌组织LAPTM4B-35、LRG1 mRNA相对表达量的均数为界值,将患者分为LAPTM4B-35、LRG1高表达者与低表达者,比较不同LAPTM4B-35、LRG1表达者5年生存率。结果子宫内膜癌组织LAPTM4B-35、LRG1 mRNA相对表达量均明显高于癌旁正常组织(P均<0. 05)。子宫内膜癌组织LAPTM4B-35mRNA表达与组织病理分级、浸润深度、淋巴结转移和临床分期相关(P均<0. 05),LRG1 mRNA表达与淋巴结转移和临床分期相关(P均<0. 05)。LAPTM4B-35、LRG1高表达者术后5年生存率及术后生存时间均低于LAPTM4B-35、LRG1低表达者(P均<0. 05)。结论 LAPTM4B-35、LRG1高表达可促进子宫内膜癌的发生及发展,并与患者不良预后有关。

LAPTM4B新基因在肿瘤细胞中的表达及其免疫学检测技术的建立

目的利用制备的鼠抗人肝癌相关LAPTM4B蛋白的单克隆抗体,检测LAPTM4B蛋白在不同肿瘤细胞中的表达。方法重组质粒pGEX-KG-LAPTM4B-N1-99经酶切及测序鉴定正确后,1 mmol/L IPTG 37℃诱导获得融合蛋白。利用亲和层析方法纯化抗人LAPTM4B单抗,免疫印迹法进行单抗鉴定,免疫细胞化学染色法检测5种肿瘤细胞中LAPTM4B的表达。结果经western b lot分析抗LAPTM4B单抗可与LAPTM4B-N1-99编码的融合蛋白以及肿瘤细胞中的天然蛋白特异性结合。免疫细胞化学染色(IHC)检测到肝癌、肺癌等5种肿瘤细胞均表达LAPTM4B蛋白。IHC和免疫印迹分析证明了LAPTM4B蛋白在肿瘤细胞中的表达。结论该单抗能特异识别原核及真核细胞表达的LAPTM4B蛋白,为进一步探讨LAPTM4B蛋白的生物学效应提供了条件。

MS4A基因家族与临床相关疾病的研究进展

4次跨膜蛋白亚型A(membrane-spanning 4-domains subfamily A,MS4A)基因家族是一个新的基因家族,自2001年被定义以来,在人类中迄今共有16个成员被发现,包括MS4A1(CD20)、MS4A2(FcεRIβ)和MS4A3(HTm4)等。MS4A基因家族在细胞增殖和分化过程中起到重要作用,而其异常表达也与多种临床疾病密切相关,本文就MS4A家族与临床疾病的关系作一综述。

食管癌LAPTM4B mRNA表达及其启动子区甲基化

研究溶酶体相关4次跨膜蛋白B(lysosome associated protein transmembrane 4 beta,LAPTM4B)基因在食管癌中的表达,及其启动子区甲基化状态,为进一步揭示LAPTM4B在不同肿瘤中表达高低机理提供参考.采用半定量RT-PCR法,确定42对食管癌中LAPTM4B mRNA表达.采用5对肝癌中LAPTM4B mRNA表达做内对照(利用灰度值比较),分析该基因在食管癌中的表达强度.选取其中3对食管癌组织样品(癌组织和癌旁正常组织),提取基因组DNA,采用亚硫酸氢钠修饰法,联合基因测序法分析LAPTM4B启动子区是否有甲基化修饰位点存在.结果发现,在42对食管癌组织中,癌组织和癌旁正常组织LAPTM4B mRNA表达存在差异:癌组织中LAPTM4B mRNA表达阳性为37/42(88.1%),癌旁正常组织中LAPTM4BmRNA表达阳性为26/42(61.9%).经基因测序法分析3对食管癌组织经通用引物PCR扩增的片段,发现1例癌旁正常组织样品中有3个CpG位点.以上结果表明,LAPTM4B基因与肝癌比较在食管癌中低表达,其启动子区1例癌旁正常组织在靠近转录起始点上游-418、-416和-398位置,存在3个CpG位点,而其他2例癌旁正常组织和3例癌组织中,没有发现CpG位点.这提示,LAPTM4B基因启动子区甲基化是其表达调节的重要方式.

乳腺癌癌组织中新肿瘤相关基因LAPTM4B的表达水平及临床意义

目的分析乳腺癌癌组织中新肿瘤相关基因溶酶体相关4次跨膜蛋白B(lysosome-associated protein transmembrane-4 beta,LAPTM4B)的表达水平及临床意义。方法研究对象为2019年1月-2020年3月在本院接受乳腺癌手术治疗的患者;应用RT-PCR法检测乳腺癌组织及癌旁组织中LAPTM4B mRNA水平,比较乳腺癌组织、癌旁组织中LAPTM4B mRNA水平及不同临床特征的乳腺癌患者癌组织LAPTM4B mRNA水平,Logistic回归分析乳腺癌临床特征与LAPTM4B mRNA水平的关系。结果乳腺癌癌组织中LAPTM4B mRNA水平显著高于癌旁组织;将乳腺癌患者癌组织LAPTM4B mRNA水平按中位数分高表达组(≥0.89,n=52)、低表达组(<0.89,n=35),导管浸润性、淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、Ki-67阳性的乳腺癌患者癌组织LAPTM4B mRNA高表达比例分别显著高于非导管浸润性、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、Ki-67阴性患者(P<0.05);Logistic回归分析显示乳腺癌病理分型、淋巴结转移、TNM分期及Ki-67表达均是LAPTM4B mRNA表达的独立影响因素。结论乳腺癌癌组织中新肿瘤相关基因LAPTM4B mRNA存在高表达现象,并与乳腺癌病理分型、淋巴结转移、TNM分期及Ki-67表达存在密切关联。

Laptm4b缺失对小鼠造血干祖细胞稳态维持的影响

目的:探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白B(LAPTM4B)在小鼠造血干祖细胞稳态维持过程中的作用。方法:构建造血系统特异的Laptm4b缺失小鼠;采用流式细胞术分析该模型小鼠的造血干祖细胞:LSK、LT、ST、MPP等细胞的数目和比例;通过流式分选仪分选造血干细胞SLAM-HSC,体外培养检测Laptm4b缺失对造血干细胞克隆形成能力的影响;通过造血干细胞SLAM-HSC竞争性骨髓移植实验分析Laptm4b缺失对小鼠造血干细胞造血重建能力的影响。结果:Laptm4b基因缺失仅轻微上调稳态下小鼠外周血中的T细胞的比例,对稳态下小鼠造血干祖细胞的比例和数量无显著影响。Laptm4b基因的缺失不影响造血干细胞竞争性移植后的造血重建能力,但能够抑制体外培养下造血干细胞的克隆形成。结论:Laptm4b缺失可能在造血干细胞体外扩增等快速增殖压力下发挥一定的抑制作用。在造血系统中特异敲除Laptm4b基因对小鼠造血干祖细胞的稳态维持及其造血重建能力无显著影响。

趋化素样因子超家族8研究进展

趋化素样因子超家族(CMTM)是北京大学人类疾病基因研究中心在国际上首次报道的新基因家族,CMTM8是该家族成员,其基因编码产物具有潜在的4次跨膜蛋白结构,是一个新的肿瘤抑制基因。CMTM8在多数肿瘤细胞系和组织中表达明显下调或不表达,过表达可抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭功能。CMTM8抗肿瘤的机制尚未完全明确,可能参与多个与癌症发生发展密切相关的信号通路。对CMTM8与肿瘤发生发展机制的进一步研究具有重要意义,其有望成为肿瘤基因治疗的新靶标。