1,4-二(2-苄硒乙氧基)蒽诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的研究

背景与目的:硒是人类生命活动中必不可少的微量元素之一,对人类健康的巨大作用是其他物质无法替代的。硒的小分子化合物1,4-二(2-苄硒乙氧基)蒽{1,4-bis[2-(benzylselanyl)ethoxy]anthracene,BSEA}具有杀菌消炎的作用,但BSEA的抗癌作用尚未见报道。该研究旨在探讨BSEA诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡及其作用机制。方法:不同浓度的BSEA处理人喉癌Hep-2细胞24 h后,采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞生长抑制率;在荧光显微镜下观察细胞形态;AnnexinⅤ-FITC法检测细胞凋亡;JC-1检测线粒体膜电位;酶标分析仪检测caspase-3和caspase-8活性;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)分别检测Bax、XIAP mRNA和蛋白表达水平。结果:BSEA处理人喉癌Hep-2细胞24 h后,BSEA对其生长抑制呈剂量依赖性,IC_(50)为35.74μmol/L;80μmol/L BSEA处理的Hep-2细胞在荧光显微镜下可观察到明显的凋亡小体;磷脂酰丝氨酸外翻加剧;线粒体膜电位开始下降;caspase-3活性的影响呈剂量依赖趋势,而caspase-8活性未见显著变化;Bax的mRNA和蛋白表达水平上升,XIAP的mRNA和蛋白表达水平下降。结论:BSEA对人喉癌Hep-2细胞生长有明显的抑制作用,并能通过线粒体途径诱导细胞凋亡。