HPLC同时测定花生壳中绿原酸3,4—二咖啡酰奎尼酸和木犀草素

建立了同时测定花生壳中绿原酸、3，4-二咖啡酰奎尼酸和木犀草素3种有效成分含量的反相高效液相色谱方法。采用KromasilC18。柱（200mm×4．6mm，5μm），乙腈和0．1％甲酸水溶液梯度洗脱，流速为1．0mL／min，检测波长340nm，柱温27℃。在该色谱条件下，绿原酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸和木犀草素的质量浓度分别为3．75～60μg／mL（R^2=0．9999），3．63～58．08μg／mL（R^2=0．9999），17．25～276μg／mL（R^2=O．9997）内与色谱峰面积呈现良好的线性关系，平均加标回收率（n=5）为121．6％，97．79％，124．35％，RSD分别为0．71％，1．49％，0．44％。该分析方法快速准确、重现性好．可应用于花生壳资源产业开发中质量标准的建立和完善。

反相高效液相色谱法定量分析旋覆花中1,5-二-O-咖啡酰奎尼酸

目的建立旋覆花药材中1,5-二-O-咖啡酰奎尼酸含量的HPLC测定方法。方法色谱柱为AgilentEclipse XDB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相甲醇-0.1%冰醋酸水溶液〔32∶68（0 min）~32∶68（15 min）~36∶64（40 min）〕梯度洗脱;检测波长320 nm;柱温30℃;流速1.0 ml/min。结果 1,5-二-O-咖啡酰奎尼酸在0.62～12.48μg（r=0.999 9）具有良好的线性;平均加样回收率（n=6）为100.9%（RSD=1.13%）,方法精密度、稳定性、重复性好。10批药材中1,5-二-O-双咖啡酰奎尼酸的含量范围为1.03%～2.09%,平均含量为1.53%。结论该定量分析方法可用于旋覆花药材的质量控制。

苦丁冬青苦丁茶咖啡酰奎尼酸类物质与α-淀粉酶的相互作用特性

探讨苦丁冬青苦丁茶中咖啡酰奎尼酸(caffeoylquinic acids,CQA):3-CQA、4-CQA、5-CQA、3,4-di CQA、3,5-di CQA和4,5-di CQA对α-淀粉酶的体外抑制活性,并采用荧光光谱法和圆二色谱法分析CQA与α-淀粉酶的相互作用特性,使用修正后的Stern-Volmer方程与van’t Hoff方程探讨CQA-酶之间的结合常数、结合位点数及热力学参数。结果表明:3-CQA、4-CQA、5-CQA、3,4-di CQA、3,5-di CQA和4,5-di CQA对α-淀粉酶均有较强的抑制作用,半抑制浓度(IC_(50))分别为1.54、1.05、1.28、0.96、0.33、0.64 mg/m L;CQA与α-淀粉酶发生结合反应,生成稳定的复合物,从而造成酶分子内部荧光发生猝灭;热力学参数分析表明CQA与α-淀粉酶主要靠疏水作用力结合,反应自发进行。此外,圆二色谱结果显示CQA的结合引起α-淀粉酶二级结构的变化,破坏了酶蛋白的天然构象,从而降低了酶的催化活性。

N，N-二（3，4-二羟基肉桂酰基）-1，2-乙二胺的合成

简介：大量研究表明，抑制HIV整合酶的活性是防止HIV-1传播的有效途径。含有咖啡酰基的化合物双咖啡酰奎尼酸（Dicaffeoylquinicacid）和L-巨菊酸（L chicoricacid）对HIV-1整合酶具有较高的抑制活性，其中咖啡酰基是药效团。

北刘寄奴中奎尼酸酯类化学成分研究

目的:对中药北刘寄奴中奎尼酸酯类活性成分进行化学研究。方法:溶剂提取及各种柱色谱法分离,光谱技术鉴定结构。结果:从北刘寄奴中分离得到3个奎尼酸酯类化合物,分别为3,十二咖啡酰基奎尼酸(I),灰毡毛忍冬素F(Ⅱ),3,4,5-三咖啡酰基奎尼酸甲酯(Ⅲ)。结论:均为首次从该属植物中分离得到。

不同产地野菊花中绿原酸、4,5-二咖啡酰奎尼酸的含量测定

目的建立不同产地野菊花中绿原酸、4,5-二咖啡酰奎尼酸的含量测定方法。方法采用HPLC,色谱柱为DiamonsilC18(4.6 mm×250 mm,5μm);采用梯度洗脱;检测波长327 nm;柱温30℃;流速1.0 mL.min 1。结果绿原酸、4,5-二咖啡酰奎尼酸的线性范围分别为0.011～0.22μg,0.017 5～0.35μg。加样回收率分别为99.1%和98.8%;RSD分别为1.93%和1.54%(n=9)。结论本方法操作简便,分析速度快,结果准确,重复性好,可用于野菊花中绿原酸和4,5-二咖啡酰奎尼酸含量的测定。

天山雪莲悬浮培养细胞中紫丁香苷、绿原酸和1,5-二咖啡酰奎尼酸的生物合成调控

紫丁香苷、绿原酸和1,5-二咖啡酰奎尼酸为野生天山雪莲中的3种活性化学成分,具多种药理活性,在药材中含量较低。研究在筛选得到天山雪莲上述3种化学成分高产细胞系的基础上,通过外源添加碳源和生物合成前体的方法调控紫丁香苷、绿原酸和1,5-二咖啡酰奎尼酸在天山雪莲培养细胞中的生物合成,极大地提高了其含量和产量。仅需培养16 d,紫丁香苷、绿原酸和1,5-二咖啡酰奎尼酸的质量浓度即可以分别达到339.0,225.3,512.7 mg·L-1;三者的含量分别为野生药材的67.9,1.9,10.6倍。研究为最终实现通过天山雪莲细胞培养同时规模化生产以上3种活性成分打下了坚实基础,具有理论和实际应用意义。

野菊不同部位绿原酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸的含量测定

目的:检测湖南衡阳产野菊不同部位(叶、花、花蕾、嫩茎及老茎)中绿原酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸的含量。方法:以80%的乙醇为溶剂,用超声法提取野菊不同部位中的绿原酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸。采用高效液相色谱法检测绿原酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸的含量,以0.05%磷酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长327 nm。结果:绿原酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸的质量浓度在10～100 mg.L-1(r=0.996,r=0.992)与峰面积呈良好的线性关系(n=5),平均回收率(n=6)分别为98.5%,99.7%。野菊叶、花、花蕾、嫩茎及老茎中绿原酸的含量分别为1.08%,0.44%,0.39%,0.58%及0.52%;3,5-二咖啡酰奎尼酸的含量分别为1.66%,1.01%,0.82%,0.93%,0.64%,其中野菊叶中绿原酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸的含量最高。结论:野菊不同部位均含有绿原酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸,但它们的含量存在明显差异。

UHPLC法测定不同产地野菊花中4种有机酸和蒙花苷含量

建立采用UHPLC同时测定野菊花中绿原酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸、3,5-二咖啡酰奎尼酸、4,5-二咖啡酰奎尼酸和蒙花苷含量的分析方法。UHPLC分析条件：Agilent ZORBAX RH C18色谱柱（50 mm×2.1 mm,1.8μm）,检测波长326 nm,流动相为乙腈-0.1%磷酸水进行梯度洗脱,流速0.4 mL/min,柱温25℃。实验结果显示绿原酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸、3,5-二咖啡酰奎尼酸、4,5-二咖啡酰奎尼酸、蒙花苷分别在1.20-24.00、1.16-23.20、2.23~44.60、1.75-35.00、2.25-45.00μg/mL范围内线性关系良好（r〉0.9998）,平均回收率分别为98.08%、98.42%、97.75%、98.27%、98.36%;RSD分别为0.38%、1.50%、0.77%、0.81%、0.62%。UHPLC法分析速度快、高效、重复性好、结果准确简便,可用于野菊花中四种有机酸和蒙花苷含量的测定。

不同产地加工方法对野菊花中二咖啡酰奎尼酸类成分含量的影响

目的：建立测定野菊花中二咖啡酰奎尼酸类成分含量的方法，并比较不同产地加工方法对其含量的影响，为确定其较佳加工方法提供依据。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为DiamonsilC18（250mm×4．6mm，5μm），流动相为0．1％磷酸溶液。甲醇（梯度洗脱），检测波长为326nm，柱温为25℃，流速为0．8ml／min。结果：3，4-二咖啡酰奎尼酸、3，5．二咖啡酰奎尼酸和4，5-二咖啡酰奎尼酸的进样量分别在87．36~873．60、65．81~658．10、32．00~320．00ng范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系（，分别为0．9999、0．9999、0．9998）；精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈2％；平均加样回收率分别为99．59％、99．65％、99．50％，RSD分别为1．53％、1．78％、2．27％（n均为6）。结论：该方法操作简便、结果准确、重复性好，可用于野菊花中二咖啡酰奎尼酸类成分的含量测定。野菊花中二咖啡酰奎尼酸类成分的含量除与温度有关外，还与烘晒时间长短有一定的关系。

一测多评法同时测定野菊花中5种有机酸

目的通过一测多评法同时测定野菊花Chrysanthemum indicum L.中5种有机酸的含有量。方法该植物70%乙醇提取液的分析采用Agela Venusil XBP C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相甲醇-0.2%磷酸,梯度洗脱;体积流量0.8 m L/min;检测波长326 nm;柱温20℃;进样量5μL。以绿原酸为内标,建立其他4种有机酸的相对校正因子。结果绿原酸、咖啡酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸、3,5-二咖啡酰奎尼酸和4,5-二咖啡酰奎尼酸分别在0.007 92～0.158 4、0.000 368～0.007 36、0.010 2～0.204、0.010 08～0.201 6、0.009 92～0.198 4μg范围内线性关系良好,平均加样回收率（RSD）分别为98.26%（1.48%）、96.30%（2.26%）、98.35%（2.08%）、99.16%（1.84%）、98.26%（2.10%）。相对校正因子重复性良好,一测多评法与外标法所得结果相近。结论该方法简便快速,准确可靠,可用于野菊花的质量评价。

金银花中3种有机酸的反相高效液相色谱法定量分析

目的 :建立用反相高效液相色谱内标法梯度洗脱同时测定金银花中绿原酸、咖啡酸、 3,5 -二咖啡酰奎尼酸含量的方法 ,并对 4个产地 3种金银花中上述 3种化合物进行定量分析。方法 :采用岛津CLC -ODS柱 (6 0mm× 15 0mm) ,甲醇 - 10 %的磷酸氢二钠和醋酸缓冲液流动相不同比例进行梯度洗脱 ,内标物为水杨酸 ,检测波长 30 4nm。结果 :西南地区金银花药材主流商品灰毡毛忍冬、细毡毛忍冬干燥花蕾中绿原酸、咖啡酸、 3,5 -二咖啡酰奎尼酸含量高于山东、河南产金银花。结论 :本法灵敏快速 。

UPLC-ESI-MS^n法分析白茅根中的化学成分

目的:应用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法鉴定白茅根中的化学成分。方法:实验采用Acquity BEH C18色谱柱,流动相采用0.05%甲酸水溶液(A)和甲醇(B)梯度洗脱。结果:根据正、负离子模式下的准分子离子峰和二级质谱,通过与文献数据或部分标准品对照,鉴定了8个化合物,分别是1-咖啡酰奎尼酸(1-O-caffeoylquinic acid,1-CQA)、3-CQA、5-CQA、4-CQA、3-阿魏酰奎尼酸(3-O-feruloylquinic acid,3-FQA)、咖啡酸、二咖啡酰奎尼酸(diCQA)、4,7-二甲氧基-5-甲基香豆素(Siderin)。结论:在白茅根中首次发现含有1-CQA、3-CQA、4-CQA、3-FQA、diCQA。

HPLC法测定野菊花水提取液中有机酸类药效组分的含量

目的建立同时测定野菊花中三种有机酸类药效组分含量的方法。方法采用HPLC法测定。色谱条件：Diamonsil C18色谱柱（4.6×250 mm,5μm）;流动相：A相为0.5%磷酸水溶液,B相为乙腈,进行梯度洗脱,在0-10 min,B相从10%线性改变至20%,10-30 min,B相从20%线性改变至30%;检测波长为326 nm;柱温为室温。结果绿原酸的线性范围为0.095 2-1.904μg（r=0.999 86）,咖啡酸的线性范围为0.0372-0.744μg（r=0.99988）,3,5-二咖啡酰奎尼酸的线性范围为0.186-3.72μg（r=0.999 91）。回收率分别为98.07%、98.73%和98.12%,RSD分别为1.96%、0.71%、0.99%（n=5）。结论HPLC法可同时测定野菊花中绿原酸、咖啡酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸三个有机酸类药效组分,该方法具有准确、快速、重现性好的特点。

青蒿中咖啡酰奎宁酸类成分研究

目的对青蒿Artemisiae Annuae Herba中酚酸类成分进行系统研究。方法综合应用各种现代色谱分离技术进行系统的分离纯化,根据化合物的理化性质和核磁共振波谱数据进行结构鉴定,并通过分子对接技术和酶活性检测的方法,对分离得到的咖啡酰奎宁酸类化合物进行了靶向磷酸二酯酶的抑制活性研究。结果从青蒿水提取物经HP-20大孔吸附树脂50%乙醇洗脱部位中共分离鉴定20个咖啡酰奎宁酸类化合物,分别为4-O-咖啡酰基-5-O-阿魏酰奎宁酸甲酯(1)、3-O-阿魏酰奎宁酸(2)、3-O-阿魏酰奎宁酸甲酯(3)、4-O-阿魏酰奎宁酸甲酯(4)、5-O-阿魏酰奎宁酸甲酯(5)、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸(6)、3-O-咖啡酰基-4-O-阿魏酰奎宁酸(7)、3,4-O-二阿魏酰奎宁酸甲酯(8)、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸(9)、3-O-阿魏酰基-5-O-咖啡酰奎宁酸甲酯(10)、1-O-咖啡酰基-3-O-阿魏酰奎宁酸(11)、1,3-O-二阿魏酰奎宁酸(12)、1,5-O-二咖啡酰奎宁酸(13)、1-O-咖啡酰基-5-O-阿魏酰奎宁酸(14)、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸(15)、4-O-阿魏酰基-5-O-咖啡酰奎宁酸(16)、4-O-咖啡酰基-5-O-阿魏酰奎宁酸(17)、4-O-阿魏酰基-5-O-咖啡酰奎宁酸甲酯(18)、4,5-O-二阿魏酰奎宁酸(19)、3,4,5-O-三咖啡酰取代奎宁酸(20);分离得到的奎宁酸类化合物对磷酸二酯酶的不同亚型蛋白具有较好的抑制潜力,其中化合物9对磷酸二酯酶PDE4B的抑制活性半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)值在0.36μmol/L左右。结论化合物1为新化合物,命名为青蒿酸A,化合物3~5、8、10~12、14、18为首次从蒿属植物中分离得到,该类化合物具有靶向抑制磷酸二酯酶的作用。

雪莲细胞培养物的质量标准研究

目的:建立雪莲细胞培养物的质量标准。方法:参照《中华人民共和国药典》2020年版附录,分别建立雪莲细胞培养物的一般检查项目及定性定量指标。以芦丁为对照品,利用紫外分光光度法建立雪莲细胞培养物总黄酮成分含量的测定方法;利用高效液相色谱(HPLC)法同时测定绿原酸、紫丁香苷和1,5-二咖啡酰奎尼酸成分含量,并建立其特征图谱,采用2012版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》对特征图谱进行相似度分析。结果:15批次雪莲细胞培养物总黄酮类成分含量10.0%~11.0%;绿原酸含量0.86%~1.09%;紫丁香苷含量0.34%~0.48%;1,5-二咖啡酰奎尼酸含量3.20%~3.75%。15批雪莲细胞培养物指纹图谱相似度大于0.9,特征图谱中呈现10个特征峰,指认峰2为绿原酸、峰4为紫丁香苷、峰7为1,5-二咖啡酰奎尼酸。结论:本研究建立了雪莲细胞培养物的质量标准,建议醇溶性浸出物不得低于29.4%;雪莲细胞培养物中的总黄酮类成分含量不得低于10.0%,绿原酸、紫丁香苷、1,5-二咖啡酰奎尼酸的含量应分别不得低于0.86%、0.34%、3.20%,为天山雪莲药制品的工业化生产提供了参考。

不同种质金银花中有机酸类及苷类成分的测定

目的建立高效液相色谱法同时测定不同种质资源金银花中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸、3,5-二咖啡酰奎尼酸和4,5-二咖啡酰奎尼酸等7种有机酸及断氧马钱子苷的量。方法采用高效液相色谱法测定,色谱条件为phenomenex C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相0.1%磷酸溶液和甲醇采用梯度洗脱,检测波长225nm,体积流量0.8 mL/min。结果金银花中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸、3,5-二咖啡酰奎尼酸和4,5-二咖啡酰奎尼酸及断氧马钱子苷在各自的线性范围内均呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.41%、99.05%、99.01%、98.71%、98.79%、98.82%、98.89%、99.16%,RSD分别为0.56%、0.37%、0.93%、1.11%、0.90%、0.87%、0.71%、1.04%。结论该方法快速、简便、准确,可用于不同种质金银花中7种有机酸及断氧马钱子苷的定量测定。

不同产地野菊花中3种有机酸的含量测定

目的:建立不同产地野菊花中绿原酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸、3,5-二咖啡酰奎尼酸的含量测定。方法:采用HPLC方法,色谱柱为Diamonsil(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-0.1%磷酸溶液做流动相进行梯度洗脱,检测波长326 nm,柱温25℃,流速0.8 mL.min-1。结果:绿原酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸和3,5-二咖啡酰奎尼酸的线性范围分别为1.00～20.00,4.64～92.80,2.233～44.66 mg.L-1;加样回收率分别为98.97%,99.14%;99.39%,RSD分别为1.81%,1.66%,1.36%(n=6)。结论:方法操作简便,分析速度快,结果准确,重复性好,可用于野菊花中绿原酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸、3,5-二咖啡酰奎尼酸的含量测定。

睡菜醋酸乙酯部位化学成分及其神经保护作用研究

目的研究神农架产睡菜Menyanthes trifoliate全草醋酸乙酯部位的化学成分及其神经保护作用。方法采用薄层色谱,正相硅胶、AB-8大孔树脂、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶及制备型HPLC等柱色谱方法分离纯化,利用NMR、MS等波谱学方法鉴定化合物结构。采用体外建立皮质酮诱导PC12细胞损伤模型,就单体化合物对皮质酮诱导PC12细胞损伤的保护作用进行初步确认。结果从睡菜醋酸乙酯部位中得到了21个化合物,分别鉴定为4-O-咖啡酰奎尼酸甲酯(1)、绿原酸甲酯(2)、绿原酸(3)、异秦皮素(4)、异嗪皮啶(5)、7R,7'R,8S,8'S-(+)-新-橄榄脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、肿柄雪莲苷(7)、丁香脂素(8)、苏式-(7R,8R)-愈创木基丙三醇-8-香草醛醚(9)、(7S,8R)-二氢去氢二松柏醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)、(—)-落叶松脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(11)、山柰酚-3-O-芸香糖苷(12)、槲皮素-3-O-芸香糖苷(13)、去氢吐叶醇(14)、布卢门醇A(15)、黑麦草内酯(16)、(E)-6-羟基-2,6-二甲基辛-2,7-二烯酸甲酯(17)、3-甲氧基酚-1-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(18)、2-羟基苯并咪唑(19)、丁香醛(20)、1-苯基-1,2-乙二醇(21)。皮质酮诱导PC12细胞损伤的神经保护作用研究显示,化合物1~3、7、9对皮质酮诱导PC12细胞损伤具有显著的保护作用,化合物4、5、10、11、15~17表现出中等的保护作用。结论化合物1~9、11~12、14~21为首次从该植物中分离得到;部分化合物对皮质酮诱导PC12细胞损伤具有保护作用。

青龙衣正丁醇部位化学成分研究

目的研究青龙衣（核桃楸Juglans mandshurica的未成熟的外果皮）正丁醇部位的化学成分。方法采用正、反相硅胶柱色谱,Sephadex LH-20,高效液相制备色谱等方法进行分离纯化,并通过波谱数据分析鉴定化合物的结构。结果从青龙衣正丁醇提取部位中分离得到14个化合物,分别鉴定为5-O-咖啡酰基奎宁酸丁酯（1）、3,5-二咖啡酰奎宁酸丁酯（2）、香草酸-4-O-β-D-（6′-O-没食子酰基）葡萄糖苷（3）、4-羟基-2,6-二甲氧基苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）、4,5,8-三羟基-α-萘酮-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）、1,4,8-三羟基萘-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（6）、1,4,5-三羟基萘-1,4-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（8）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（9）、槲皮苷（10）、杨梅苷（11）、阿福豆苷（12）、金丝桃苷（13）、胡萝卜苷（14）。结论化合物1~4为首次从胡桃属植物中分离得到,化合物5、8~12为首次从青龙衣中分离得到。