微量元素在4-硝基喹啉氧化物诱发口腔腭粘膜癌变中的变化及意义(英文)

目的 :研究 4 硝基喹啉氧化物 (4 nitroquinoline 1 oxide ,4NQO)诱发大鼠腭粘膜上皮细胞癌变过程中细胞内微量元素的变化及意义。方法 :将 4NQO涂于 2 8只Wistar大鼠硬腭后部粘膜 ,每周三次 ,共 19周。不同时期的所有粘膜标本被病理学分别证实为正常粘膜 ,癌前病变及鳞状上皮细胞癌 ,并进行电子探针显微分析。结果 :鳞状上皮细胞癌核及胞浆内铜 (Cu) ,锌 (Zn)明显下降 (P <0 .0 5 )。癌前病变上皮细胞浆内钼明显减少 (P <0 .0 1) ,而鳞癌细胞胞浆内Mo明显升高。癌变过程中 ,细胞内Se无明显变化。同时 ,鳞癌细胞Cu/Zn升高 ;Cu/Se ,Zn/Se降低。结论 :细胞内Cu ,Zn ,Mo的改变与口腔癌变有明显关联。

低强度微波与4-硝基喹啉氧化物对人淋巴细胞DNA损伤的研究

目的 研究低强度 2 4 5 0MHz微波 (5 0mW cm2 )与 4 硝基喹啉氧化物 (4 NQO)对人淋巴细胞DNA损伤效应的联合作用。方法 采用彗星试验来检测人外周血淋巴细胞经微波与 4 NQO联合作用后的DNA损伤情况。微波与 4 NQO联合暴露方式有 3种 :微波辐射后 4 NQO染毒、微波与4 NQO同时暴露、4 NQO染毒后微波辐射。结果 微波辐射组的DNA损伤指标 (彗星形状和彗星全长 )与对照组比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。微波照射后 4 NQO染毒组中 ,5 0 ,2 5 μmol L剂量的DNA损伤指标与相应 4 NQO组比较差异均有显著性 (P <0 0 5或P <0 0 1)。微波与 4 NQO同时暴露组或 4 NQO染毒后微波照射组与相应 4 NQO组比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 低强度 2 4 5 0MHz微波不能诱发DNA损伤 ,当微波辐射先于 4 NQO暴露时 ,微波能增强 4 NQO诱发的DNA损伤效应。

4-硝基喹啉-1-氧化物诱导C57BL/6小鼠舌黏膜癌变的研究

目的用4-硝基喹啉-1-氧化物（4NQO）诱导C57BL/6小鼠舌黏膜癌变。方法将85只小鼠随机分为蒸馏水对照组（n=5）、1,2丙二醇对照组（n=5）、实验组（n=75）,分别给予蒸馏水、1,2丙二醇及4NQO溶液饮用。实验组小鼠再分为15笼,每2周处死一笼,对照组小鼠于28周处死。对小鼠进行称质量和大体观察及组织病理学检查。结果实验组死亡1只。实验组小鼠体质量在24周后体质量较对照组明显降低（P〈0.05）。实验动物的舌、口底、上颚、颊部共出现79处肉眼可见的病变,其中舌部病变70处（88.6%）。实验组动物在不同时间点黏膜病变不同,28周时均发生高分化鳞状细胞癌。对照组未见病变。结论舌癌动物模型被成功建立。实验12~16周及20~28周可作为研究舌黏膜癌变早期和中晚期阶段的时间点。

4-硝基喹啉-1-氧化物诱导食管鳞状细胞癌发生的研究进展

食管鳞状细胞癌(ESCC)是一种常见且预后较差的恶性肿瘤,其发病机制尚未完全明确。建立ESCC模型,研究ESCC发病机制,对于降低ESCC的发病率和病死率具有重要意义。4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)是一种肿瘤诱导剂,已广泛用于口腔癌的研究,而在ESCC研究中的应用还较少。因此,本文就4NQO体内代谢特点、诱导ESCC模型及诱癌机制的相关文献进行综述,以期为食管癌的防治提供一些新的研究线索。

FAT10在4-硝基喹啉-1-氧化物诱导舌癌模型中的表达特点

目的:建立与人舌黏膜鳞癌相近的大鼠舌癌模型,并研究其发生发展过程中双泛素FAT10的表达变化。方法:实验组SD雄性大鼠使用含有40μg/m L的4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)饮水喂养,分别在8、16、24周时取大鼠舌体中病灶部位组织,行组织学观察;对照组大鼠正常饮用水喂养24周。使用免疫组织化学法检测FAT10、p53在舌黏膜不同程度病变组织中的表达。结果:大鼠舌黏膜经过4-NQO不同时间的刺激,可发展成不同程度的上皮异常增生以及鳞状细胞癌。从正常黏膜到不同程度的不典型增生以及最后高分化的鳞癌中,FAT10的表达强度呈逐渐增高趋势;p53在正常黏膜为阳性表达,在不典型增生中表达升高,而在癌组织中表达降低。结论:在舌癌的发生、发展过程中,FAT10可能发挥了癌基因的作用。

唾液乳杆菌降解4-硝基喹啉-1-氧化物所需条件的研究

4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)是一种基因毒素。广西巴马老人源唾液乳杆菌FDB89可降解4-NQO为无毒物质。将不同浓度的唾液乳杆菌FDB89菌悬液与4-NQO溶液(4-NQO终浓度为20mg/L)混合,反应一定时间后分别取样,用高效液相色谱法(HPLC)检测其中的4-NQO含量变化情况。唾液乳杆菌FBD89菌体浓度达到OD600=2.3(约2.1×1011cfu/mL)时,降解现象比较明显,并在菌体浓度约为1.4×1013cfu/mL时能检测到4-NQO的降解产物。研究结果表明,唾液乳杆菌FBD89具有降解4-NQO的能力,降解能力随菌体浓度升高而提高。

4-硝基喹啉-1-氧化物诱导大鼠舌癌过程中Notch1的表达特点

目的:研究Notch1在大鼠舌癌模型发生发展过程中的表达变化。方法:将40只SD大鼠随机分为对照组(A组10只)和实验组(B、C、D组各10只),使用质量百分比浓度为0.004%的4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline-1-oxide,4NQO)饮用水喂养实验组SD大鼠,用蒸馏水喂养对照组SD大鼠。B、C、D组分别于8、16、24周取大鼠舌体组织;A组在8、16、24周同时各取3只、3只、4只作为正常对照。行常规组织学观察,并使用免疫组织化学法检测Notch1在病变不同阶段的舌粘膜内的表达。结果:4NQO可以有效诱导大鼠舌黏膜鳞状细胞癌的发生。在不同的给药时间点,可以诱导大鼠舌黏膜产生不同程度的癌前病变。Notch1在正常舌黏膜、癌前病变、舌鳞癌中的表达逐渐增高(P<0.01)。随着异常增生程度的增加,阳性表达部位逐渐由基底层向表层扩展,且Notch1的膜型表达逐渐增多。结论:Notch1的高表达及其在细胞膜上的集中表达可能与舌癌的发生、发展过程相关。

4-氨基-6-硝基-3-溴喹啉的合成

喹啉衍生物是一类重要的杂环类药物,其中4-氨基喹啉衍生物可以作为痛敏肽拮抗剂,而4-氨基-6-硝基-3-溴喹啉是制备4-氨基喹啉衍生物的前体。本文以4-硝基喹啉N-氧化物为原料,在醋酸的作用下,经铁粉还原反应生成4-氨基喹啉;再经溴代反应生成4-氨基-3-溴喹啉;最后经混酸硝化反应生成4-氨基-6-硝基-3-溴喹啉。化合物结构用1H-NMR、13C-NMR、IR、MS表征。

槲皮素改善4-硝基喹啉-1-氧化物诱导小鼠食管癌作用机制研究

目的 探究槲皮素缓解4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)饮水法诱导的食管癌的作用机制。方法 利用4NQO诱导食管癌小鼠模型,分为正常组、模型组、西药组(奥美拉唑+铝碳酸镁+吗丁啉)和槲皮素组。肉眼和显微镜观察槲皮素治疗后食管的病理变化;流式细胞仪检测小鼠脾脏Th17和Treg细胞的占比;酶联免疫吸附实验检测血清白介素10(IL-10)、白介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量;Western Blotting检测PI3K、AKT、p-AKT的蛋白含量。结果 4NQO诱导的食管癌小鼠食管癌组织出现异常增生,槲皮素组增生程度减轻;相比模型组,槲皮素组Th17细胞升高,Treg细胞、IL-10、IL-17、TNF-α降低,Th17/Treg比例升高(P <0.05);Western Blotting结果显示,经槲皮素干预后,PI3K、AKT、p-AKT/AKT蛋白表达水平降低(P <0.05)。结论 槲皮素通过调节Th17/Treg平衡从而延缓4NQO诱导食管癌的进程。

4-硝基喹啉-1-氧化物诱导小鼠食管鳞状细胞癌模型的研究进展

食管鳞状细胞癌(ESCC)是最常见的恶性肿瘤之一,预后较差。4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)是一种水溶性的喹啉衍生物,在体内可以成功诱导鳞状上皮细胞癌的产生。建立并优化4NQO诱导小鼠ESCC形成的实验方法可以为ESCC研究提供更适宜的原位模型。

六君子汤对4-硝基喹啉-1-氧化物诱导食管癌小鼠免疫调节的影响

目的:观察六君子汤对4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)诱导食管癌小鼠一般情况、脏器重量和指数、食管组织病理形态、细胞因子及淋巴细胞亚群的干预作用。方法:小鼠分正常组、模型组和六君子组,16周后撤除干预因素,观察进食饮水并称重,32周后取脏器称重计算脏器指数,观察食管组织,检测外周血IL-10、TNF、IFN-γ、MCP-1、IL-6、IL-12p70等细胞因子、淋巴细胞亚群(CD3^+/CD19^+,CD3^+/CD8^+)。结果:六君子组小鼠活动度较正常,体质量下降不明显等;脾、心和肝重量高于模型组具有显著性差异(P<0.05),肾、肺指数显著降低(P<0.05);镜下食管基底细胞层未见"癌珠"和"病理分裂象",可上调IL-10、TNF、MCP-1、IL-6、IL-12p70(P<0.05),且显著提高CD4^+/CD8^+比例(P<0.05)。结论:六君子汤能改善4NQO诱导食管癌小鼠生存质量、保护脏器;防治食管组织损害;提高IL-10等细胞因子水平提升机体免疫功能,纠正CD4^+/CD8^+比例改善免疫功能失衡及免疫抑制。

敲除SLC39A5基因对4-NQO诱发C57BL/6小鼠食管癌模型建立的影响

目的探索敲除SLC39A5基因对4-NQO诱导的C57BL/6小鼠食管癌模型的影响。方法选取10只C57BL/6野生型小鼠作为阴性对照组,饮用浓度为100μg/ml的丙二醇空白溶液;选取140只野生型小鼠与80只SLC39A5基因敲除小鼠,采用饮水法摄入诱癌剂,即浓度为100μg/ml的4-NQO(4-nitroquinoline 1-oxide),实验时间为28周,实验结束后处死三组小鼠。结果阴性对照组小鼠、野生型小鼠和SLC39A5基因敲除小鼠在实验结束时其存活率分别为100%、92.96%、91.25%;三组小鼠食管癌诱癌成功率分别为0、61.36%、28.77%,两实验组小鼠诱癌成功率差异有统计学意义(χ2=19.98,P<0.001)。结论成功建立了C57BL/6小鼠及SLC39A5基因敲除小鼠的食管癌模型,同时验证了SLC39A5基因在食管癌发生发展中的促进作用。

4-NQO饮水法构建Balb/c小鼠口腔癌及淋巴道转移模型

目的:利用化学诱导法构建与人口腔癌发生发展相似的Balb/c小鼠口腔癌及淋巴道转移模型。方法:实验组68只小鼠,采用4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline-oxide,4-NQO)300mg/L饮水喂养8～20周,停药后自来水喂养至40周,对照组32只仅给自来水喂养12～40周;8周后,每隔2周处死4只实验组小鼠,肉眼及HE染色和免疫组化广谱细胞角蛋白(pan-ck)染色观察癌变及淋巴道转移全过程。结果:随着4-NQO作用时间及观察时间的延长,实验组小鼠舌背黏膜相继出现白色斑块,红白相间的斑块及乳头状新生物等改变,斑块出现的位置由最初的舌根部向舌尖部蔓延,并在舌腹、口底、牙龈、上腭等部位发现类似斑块。24周及以前,小鼠口腔黏膜表现为不同程度的上皮异常增生。25～32周期间,16只中有14只发生肿瘤,其中一部分发生同侧或双侧颌下淋巴结转移(2/16)。33～40周期间,全部发现有原发灶肿瘤以及同侧或双侧下颌淋巴结转移(16/16),HE染色确定有转移的实验组小鼠颌下淋巴结免疫组化pan-ck染色均为阳性。未发现远处转移。结论:4-NQO化学诱导法成功建立小鼠口腔癌前病变、口腔癌及淋巴道转移模型,发病过程与人发病过程相似,具有较高的成瘤率以及淋巴道转移率。

4-硝基喹啉-1-氧化物饮水法构建BALB／C小鼠胃癌及食管癌模型

4-硝基喹啉-1-氧化物（4NQO）饮水法已用于建立小鼠口腔癌模型。我们采用4NQO饮水法构建小鼠舌癌模型，在实验中可见部分小鼠产生食管癌或胃癌，舌部病变仅为中度异常增生。

4-NQO饮水法不同给药时间诱发小鼠舌癌模型的比较

目的比较4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline 1-oxide,4-NQO)饮水法在不同给药时间诱发小鼠舌癌模型过程中口腔黏膜病变程度的差异。方法 70只balb/c小鼠,随机分为两组:实验组60只,给予200 mg/L 4-NQO饮水喂养8、14、20 W(各20只),停药改用普通自来水喂养到45 W;对照组10只小鼠,单纯饮用自来水。45 W时通过肉眼和组织学观察各组的病变情况并比较小鼠体重的变化情况。结果随着给药时间的延长,实验组小鼠舌背黏膜相继出现白色斑块、溃疡、乳头状增生等改变,小鼠舌背产生轻度异常增生-中度异常增生-重度异常增生-原位癌-鳞癌的典型病理变化。给药8 W组70.6%小鼠舌背黏膜表现为单纯性增生,29.4%为轻中重度异常增生,舌癌发生率为0%;给药14 W组88.2%为轻中重度异常增生,11.8%为原位癌;给药20 W组100%为鳞癌,并且100%转移颈部淋巴结;三组未见远处转移。14、20 W组小鼠体重较给药前明显减轻(P<0.05),8 W组和对照组小鼠体重较给药前无明显变化(P>0.05)。结论在相同剂量下,随着给药时间延长,舌癌前病变以及舌癌发生率越高,但是体重减轻越明显。

4-硝基喹啉-1-氧化物诱发大鼠舌黏膜鳞癌模型和分子发病机制研究进展

发展一种新的方法用来提高口腔癌的诊断和治疗效果,建立能够模拟人类口腔鳞癌自然发生的动物模型是必需的,应用4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline-1-oxide,4NQO)诱导SD大鼠舌黏膜鳞癌是一种可靠的方法。水溶性喹啉衍生物4NQO可以形成DNA加成物,引起碱基的改变(G→A)或丢失突变。但4NQO要发挥这种诱变剂作用,需要在4NQO还原酶作用下将4NQO转化成4-羟氨基喹啉-1-氧化物及4-乙酰基喹啉-1-氧化物(4-AAQO),4-AAQO能够以共价键的方式结合到核酸上并破坏染色体的结构,进一步影响抑癌基因和癌基因表达。动物舌根黏膜该酶含量较高,所以可以靶向性在舌根形成癌。饮水中很低剂量的4NQO便可特异性在舌根形成癌,其形成过程和形态学变化都和人的口腔鳞癌发生过程十分相似,该模型是研究口腔癌发生和癌变机制的理想模型。

4NQO诱发大鼠舌黏膜癌变过程中胎盘型谷胱甘肽S-转移酶的表达

目的:观察大鼠实验性舌癌癌变过程中胎盘型谷胱甘肽S-转移酶(GST-P)的表达特点。方法:6周龄雄性SD大鼠42只,随机分为2组。实验组动物(n=30)的饮水中加入体积分数为0.001%的4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)水溶液7mg/(kg·d)。对照组(n=12)则仅给予饮用水。实验第2周、4周、8周、12周、16周和26周末,处死大鼠,其中实验组各5只,对照组各2只。处死动物后,从会厌部至口底前缘整体分离舌体,观察其大体形态,常规组织处理,免疫组化法检测舌黏膜组织内GST-P。结果:对照组大鼠未出现任何舌黏膜病变,舌体标本均呈GST-P阴性。实验第8周末,实验组大鼠舌黏膜开始出现上皮异常增殖,实验第16周末即有1只大鼠发生舌癌,26周实验组大鼠均出现舌癌。2周时实验组大鼠舌黏膜内开始出现GST-P阳性细胞,随着时间的推移,GST-P阳性灶数目和大小逐渐增加。结论:GST-P可能与舌癌的发生有关。GST-P阳性反应早于大鼠舌黏膜的形态学改变,可作为反映癌前细胞代谢特点的良好标记。

协同刺激分子B7-H4在小鼠食管癌前病变中的表达

目的:研究协同刺激分子B7同系物4(B7-H4)在小鼠食管癌前病变中的表达变化,探讨其在食管鳞状细胞癌发生中的作用。方法:133只C57BL/6小鼠,分为对照组42只和诱癌组91只。诱癌组小鼠采用饮水法给予50μg/mL 4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)15周,诱导小鼠食管癌前病变。通过苏木素-伊红(HE)染色法评价食管组织病理变化;免疫组化和Western blot检测B7-H4蛋白在食管组织中的表达,Western blot检测B7-H4蛋白在小鼠血清中的表达。结果:从16~28周,4NQO诱癌组小鼠食管组织出现肉眼可见的增厚、凸起、肿块等病理改变。HE染色结果显示,小鼠食管组织癌前病变级别与诱癌时间呈正相关(r=0.55,P<0.01)。另外,B7-H4在食管组织的表达水平与食管癌前病变级别呈正相关(r=0.57,P<0.01)。与对照组相比,第26周和第28周诱癌组小鼠食管组织B7-H4蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。与正常小鼠相比,高级别上皮内瘤变小鼠血清B7-H4蛋白浓度显著升高(P<0.05)。结论:小鼠食管癌前病变进程中,B7-H4蛋白在血清和食管组织中表达上调,B7-H4可能参与了食管癌前病变的进程。

PD-1在4NQO诱导的小鼠口腔黏膜鳞状细胞癌中表达变化

目的研究程序性死亡蛋白1(programmed cell death1,PD-1)在小鼠口腔黏膜鳞状细胞癌微环境中的变化和可能作用。方法利用化学致癌剂4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline-1-oxide,4NQO)饮水诱导建立C57小鼠口腔黏膜鳞癌动物模型。对小鼠模型口腔黏膜肿瘤病变部位进行组织病理学检测和分析;通过Real-time PCR和流式细胞术检测免疫检查点PD-1基因和蛋白的表达水平。结果在暴露4NQO 28周后,成功诱导小鼠发生口腔黏膜鳞癌。组织病理学结果显示,小鼠发生的肿瘤为口腔黏膜鳞癌。Real-time PCR和流式细胞术检测结果表明,小鼠舌部黏膜肿瘤组织和脾脏中的CD4^+T细胞,PD-1基因和蛋白表达都明显上调。结论免疫检查点PD-1在小鼠口腔黏膜鳞癌发生中出现明显升高,PD-1与口腔黏膜鳞癌的发展可能相关。

4-NQQ诱导小鼠舌癌形成过程中的血清差异蛋白筛选

目的通过蛋白组学i BT技术,筛选舌癌形成过程中血清的差异表达蛋白,以期筛选出舌癌早期诊断的肿瘤标志物。方法使用4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQQ)诱导小鼠舌黏膜癌变,收取小鼠舌癌形成过程中特定时间点血清行蛋白组学分析。结果在24周时成功诱导小鼠舌黏膜癌变并有部分小鼠出现了浸润癌,血清蛋白组学分析结果显示,在8周和16周对比组中显示癌相关蛋白胶原蛋白α-1高表达,纤连蛋白(FN)低表达;在16周和24周的对比组中显示癌相关蛋白FHL1、FN、热休克蛋白84b(HSP 84b)、Serine/threonine-protein(PP2A)、(14-3-3)低表达。通路分析结果显示在舌癌形成过程中,RAS通路(RAS)、NF-κB通路(NF-κB)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、JAK-STAT通路(JAKSTAT)癌相关通路异常。结论在蛋白组学的结果中发现的差异蛋白FHL1、FN、HSP、PP2A、14-3-3等在舌癌形成的过程中异常表达,有可能成为舌癌诊断的标志物,异常表达的通路如:NF-κB、PI3K、JAK-STAT等则有可能成为舌癌免疫治疗重要的靶点。