4-羟基白藜芦醇甲基化合物的羟丙基-β-环糊精包合物的制备及表征

目的:制备4-羟基白藜芦醇甲基化合物(MR-4)的羟丙基-β-环糊精的包合物。方法:采用溶液-搅拌法制备包合物,并采用紫外光谱扫描及红外光谱测定包合物的包封率和溶解度。结果:通过溶-搅拌液法能够顺利制备4-羟基白藜芦醇甲基化合物的羟丙基-β-环糊精包合物,并且4-羟基白藜芦醇甲基化合物的溶解度得到改善。结论:采用溶液-搅拌法制备4-羟基白藜芦醇甲基化合物-羟丙基-β-环糊精包合物的制备工艺较为简便,且包合效果较好,明显提高了MR-4的药物溶解度。

4-羟基白藜芦醇甲基化物的合成研究

目的合成抗氧化活性化合物4-羟基白藜芦醇甲基化物。方法以四氢呋喃为溶剂,3,4,5-三甲氧基苯甲酸为起始原料,经过还原反应、卤代,制备格利雅试剂,与大茴香醛缩合制备目标化合物。结果合成得到的4-羟基白藜芦醇的四甲基衍生物经MS、1H-NMR确证。结论该路线能顺利实现4-羟基白藜芦醇甲基化物的合成。

白藜芦醇通过SIRT1/AMPK信号通路减轻MPTP诱导的小鼠多巴胺能神经元丢失

目的观察白藜芦醇(RV)对帕金森病(PD)小鼠的神经保护作用,并探索其发挥神经保护作用的可能机制。方法将48只小鼠随机分为CON组、MPTP组、RV+MPTP组和EX527+RV+MPTP组,每组12只。腹腔注射MPTP建立PD小鼠模型,并给予RV灌胃、SIRT1特异性抑制剂EX257腹腔注射处理,利用免疫荧光、western blot等检测相关蛋白表达。结果给予RV后,与MPTP组相比,RV+MPTP组SIRT1蛋白表达显著增加(P<0.001),p-AMPK蛋白水平显著升高(P<0.01),Cleaved caspase 3蛋白水平显著下降(P<0.01),小鼠黑质区TH阳性神经元丢失率明显降低,纹状体组织中TH蛋白表达显著增加(P<0.01)。给予EX527后,阻断了RV的上述作用,p-AMPK蛋白水平显著降低(P<0.01),Cleaved caspase 3显著升高(P<0.01),小鼠黑质区TH阳性神经元丢失率明显升高,纹状体组织中TH蛋白表达显著下降(P<0.001)。结论 RV可能通过激活SIRT1/AMPK信号通路,SIRT1与AMPK相互调控,减少MPTP小鼠黑质区多巴胺能神经元丢失。

天然产物白藜芦醇结构类似物的合成

二苯乙烯类化合物是植物中常见的组分，具有多种生物活性，如降压降酯、抗血小板凝集、抗菌、抗肿瘤等。3,5，4＇三羟基-E-二苯乙烯（白藜芦醇，resveratrol）的抗癌活性被《科学》杂志发表后，对这方面对研究也越来越深入。

天然活性化合物羟基白藜芦醇中间体的制备研究

白藜芦醇（Resveratrol,3,4＇,5-trihydroxy-trans-stil-bene）即反式3,4＇,5-三羟基茋,广泛存在于虎杖、葡萄、花生等多种植物中。白藜芦醇作为一种重要的植物抗毒素,具有多种医疗保健生理活性作用,如抗菌、抗氧化、抗癌、抗血小板凝聚、抗艾滋病活性等[1～5]。被誉为继紫杉醇后的第二大抗癌药物。

川射干黄酮胶囊中非黄酮部分化学成分的研究

目的：研究川射干黄酮胶囊中非黄酮部分的化学成分。方法：利用各种色谱方法进行化学成分分离,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果：从川射干黄酮胶囊中分离、鉴定了6个非黄酮化合物,分别为软脂酸（1）、十四酸（2）、4-羟基~3-甲氧基苯乙酮（3）、胡萝卜苷（4）、B-谷甾醇（5）、白藜芦醇（6）。结论：分离出的非黄酮成分为其药理作用阐明了物质基础。

HPLC法同时测定大黄药材中8个非蒽醌类成分的含量

目的:建立同时测定大黄药材中8个非蒽醌类成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Symmetry C18,流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0mL/min,柱温为30℃,检测波长为280nm,进样量为30μL。结果:没食子酸、儿茶素、表儿茶素、白藜芦醇4′-O-葡萄糖苷、表儿茶素没食子酸酯、白藜芦醇4′-O-β-D(- 6″-O-没食子酰)-葡萄糖苷、番泻苷A、4′-羟基苯基-2-丁酮-4′-O-β-D(- 2″-O-没食子酰-6″-O-对羟基桂皮酰)-葡萄糖苷检测进样量的线性范围分别为6.16~2 464 ng(r=0.999 9)、37.4~14 960 ng(r=0.999 9)、7.635~3 054 ng(r=0.999 7)、7.63~3 052 ng(r=0.999 9)、8.32~3 328 ng(r=0.999 9)、11.5~4 600 ng(r=0.999 9)、16.08~6 432 ng(r=0.999 9)、29.3~11 720 ng(r=0.999 9);定量限分别为3.48、4.30、6.40、4.40、3.39、2.87、8.40、4.95ng,检测限分别为2.32、2.58、2.40、2.64、2.26、1.23、4.20、2.97ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于5%;加样回收率分别为94.32%~100.54%(RSD=2.78%,n=6)、91.15%~99.36%(RSD=3.72%,n=6)、92.16%~98.04%(RSD=2.39%,n=6)、93.41%~100.73%(RSD=3.17%,n=6)、93.89%~98.40%(RSD=1.99%,n=6)、92.61%~101.74%(RSD=3.71%,n=6)、92.66%~103.40%(RSD=3.76%,n=6)、95.45%~102.70%(RSD=3.06%,n=6)。结论:所建方法简便、准确、专属性强,可用于同时测定大黄药材中8个非蒽醌类成分的含量。

散结镇痛胶囊中酚酸类成分的指纹图谱研究和多指标成分定量测定

目的建立散结镇痛胶囊中酚酸类成分的UPLC指纹图谱,并进行多成分定量分析,为评价散结镇痛胶囊提供依据。方法采用UPLC法,色谱柱为Phenomenex Kinetex 2.6μm C18100 A柱,乙腈-水梯度洗脱,体积流量为1.7 mL/min,柱温40℃,检测波长为280、325 nm。结果得到分离度、重现性均较好的散结镇痛胶囊酚酸类成分UPLC指纹图谱,标示出15个共有峰,各批次样品相似度均在0.96以上;通过对照品比对,确定了5个成分,分别为白藜芦醇、7,4′-二羟基黄酮、龙血素A、龙血素B和紫檀茋,并对其进行定量分析。结论同时对散结镇痛胶囊中酚酸类成分进行UPLC指纹图谱和5个指标成分分析,方法快速、简便、准确,可作为全面评价该制剂质量的有效方法之一。

不同产地龙血竭中5种成分的HPLC法测定

目的建立龙血竭的5种成分定量分析方法,为科学评价和有效控制龙血竭的质量提供依据。方法采用Phenomenex KinetexC18柱(100mm×4.6mm,2.6μm),以乙腈–水梯度洗脱,体积流量:1.7mL/min,柱温:40℃,检测波长为280nm和325nm。结果白藜芦醇、7,4′-二羟基黄酮、龙血素A、龙血素B和紫檀茋分别在7.76～248.4μg/mL(r=0.9999)、6.84～219μg/mL(r=1.0000)、5.75～184μg/mL(r=1.0000)、10.08～322.6μg/mL(r=1.0000)和23.71～758.6μg/mL(r=0.9998)呈良好的线性关系,平均回收率分别为97.61%、99.24%、102.72%、101.75%、102.65%,RSD值分别为1.16%、0.87%、0.86%、0.49%、1.10%。结论本方法快速、简便、准确,其结果可为龙血竭质量标准的制定提供一定的依据。

一测多评法测定龙血竭中5种有效成分

目的建立龙血竭中5种有效成分的一测多评法,探讨一测多评法在龙血竭质量控制中的应用。方法采用高效液相色谱法,使用Fortis Xi C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈(A)-1.0%冰醋酸水溶液(B),梯度洗脱,0~10 min,25%~30%A;10~60 min,30%~50%A,体积流量1.0 mL/min;检测波长278 nm;柱温30℃;进样量10μL。以紫檀茋为内参,分别建立7,4′-二羟基黄酮、白藜芦醇、龙血素A和龙血素B相对于紫檀茋的相对校正因子,分别采用外标法和一测多评法测定5种成分的量,并比较二者结果的相对误差。结果 7,4′-二羟基黄酮质量浓度在10.23~102.27μg/mL、白藜芦醇质量浓度在11.01~110.14μg/mL、龙血素A质量浓度在9.47~94.72μg/mL、龙血素B质量浓度在11.59~115.90μg/mL、紫檀茋质量浓度在24.35~243.52μg/mL线性关系良好;4种化学成分相对于紫檀茋的相对校正因子分别为0.626、1.064、1.154、0.837;且在不同实验条件下耐用性良好(RSD<3.0%);一测多评法的计算结果与外标法测得结果无显著差异。结论建立的一测多评法可作为龙血竭中5种有效成分的测定方法,一测多评法为龙血竭质量控制提供了新的模式与方法。

朊病毒感染细胞模型中趋化因子CXCL1变化特征研究

目的 探究CXCL1在朊病毒感染细胞模型SMB-S15中的变化特征,比较感染细胞内朊病毒含量变化对CXCL1水平变化的影响。方法 通过荧光定量PCR、蛋白免疫印迹和酶联免疫吸附试验(ELISA)对朊病毒感染细胞模型SMB-S15及其对照细胞SMB-PS、SMB-RES中CXCL1的转录及翻译水平进行分析。利用ELISA对用白藜芦醇和3,4-二羟基苯亚甲基丙酮(DBL)分别处理不含朊病毒和含少量朊病毒的SMB-S15细胞的CXCL1蛋白水平进行分析。结果 在朊病毒感染细胞SMBS15中,CXCL1的转录水平显著高于对照细胞SMB-PS和SMB-RES,差异有统计学意义。在细胞裂解液和对应的培养基中,SMB-S15细胞的CXCL1蛋白表达水平均高于SMB-PS和SMB-RES细胞。白藜芦醇处理不同时间的SMB-S15细胞和不同浓度DBL处理的SMB-S15细胞中CXCL1蛋白水平均呈下降趋势,具有时间和剂量依赖性。结论 朊病毒感染细胞模型中CXCL1含量明显升高,且与胞内朊病毒的含量呈正相关。