HPLC测定哈蟆油中4-胆甾烯-3-酮及胆固醇含量

目的：采用高效液相法同时测定哈蟆油中4-胆甾烯-3-酮和胆固醇.方法：使用Agilent TC-C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相甲醇-永（91.5∶8.5）,柱温35℃,体积流速1.0 mL·min-1,检测波长215 nm,进样量10 μL.结果：哈蟆油中4-胆甾烯-3-酮进样量在0.011 65～0.116 5μg呈良好的线性关系,平均回收率为100.0％,RSD 1.83％ （n =6）,且稳定性、精密度及重复性均良好;胆固醇进样量在2.282～22.82 μg成良好的线性关系,平均回收率为99.3％,RSD 1.19％（n=6）,且稳定性、精密度及重复性均良好.结论：该方法能够同时、准确、稳定、快速的测定哈蟆油中4-胆甾烯-3-酮和胆固醇的含量.

利用胆固醇氧化酶转化胆固醇制备胆甾-4-烯-3-酮

用酶法催化氧化胆固醇制备胆甾 4 烯 3 酮相对于化学法合成具有反应简单、成本较低等优点 .作者探讨了在正辛烷作为有机相的两相反应体系中 ,以胆固醇氧化酶催化氧化胆固醇制备胆甾 4 烯 3 酮的方法 .在胆固醇质量浓度为 4 0 g/L ,反应时间 4 0min、反应温度 4 0℃、磷酸缓冲液 正辛烷体积比 3:2、通氧 4 0L/h及搅拌转速 30 0r/min下 ,胆固醇转化率达到 92 % ,经薄板层析及紫外扫描 ,发现转化产物为单一的胆甾 4 烯 3

(3E)-胆甾-4-烯-3,6-二酮-3-肟及其类似物的合成

以胆甾醇为原料,经氯铬酸吡啶氧化生成胆甾-4-烯-3,6-二酮(2),2与盐酸羟胺反应合成了(3E)-胆甾-4-烯-3,6-二酮-3-肟(3),总收率66%。利用合成3的反应条件合成了两个3的类似物——(3E)豆甾-4-烯-3,6-二酮-3-肟(6)和(3E)-谷甾-4-烯-3,6-二酮-3-肟(7)。2,3,6和7的结构经NMR和IR表征。

名贵中药——海龙中活性成分胆甾-4-烯-3-酮分离纯化及含量测定

海龙（Syngnathus）系名贵中药，中医学认为其具补肾壮阳、散结消肿等功效，现代生物化学与药理学的研究表明，海龙的药效与所含的甾醇类成分密切相关。本研究利用高效液相色谱分离精制了海龙的甾醇类化合物，通过对精制产物的质谱分析确定了一种甾醇类化合物——胆甾-4烯-3-酮。海龙中甾醇类物质占海龙干粉比重为0．177％，其中胆甾-4-烯3-酮在总甾醇中占9．39％。本研究为名贵中药海龙的有效成分标准化奠定了一定的基础。

哈蟆油脂溶性化学成分的研究

目的:对哈蟆油化学成分进行研究。方法:色谱技术进行分离,波谱等方法进行鉴定。结果:分离出了4个化合物,其中结晶Ⅰ为十六烷酸胆甾醇酯,结晶Ⅱ为胆甾-4-烯-3-酮,化合物Ⅲ为胆甾醇,结晶Ⅳ为十六烷酰胺。结论:结晶Ⅰ、Ⅳ为首次从哈蟆油中获得。

高效转化胆固醇菌株的筛选、鉴定及转化条件优化

胆固醇由甾体母核和侧链构成,是一种新的甾体资源.以胆固醇为唯一碳源的选择培养基,利用富集培养法从土壤中筛选出一株细菌,编号5901.该菌能够快速高效转化胆固醇,专一性生成4-胆甾烯-3-酮.经形态学观察和16S rDNA序列比对分析,该菌株为Rhodococcus sp.该菌株转化胆固醇的最优条件为:生长温度和转化温度均为30℃,初始pH 8.0.胆固醇质量浓度为5 g/L,反应24 h后,胆固醇转化率为95%.本研究表明,590 1菌株较之前报道的菌株,底物浓度高,转化速率快,也可以催化其它甾体化合物的3β-羟基氧化和5位双键位移反应,具有潜在的研究和应用价值.

一株高效氧化胆固醇的简单节杆菌构建与转化条件优化

为实现胆固醇的高效生物氧化,利用基因工程手段将编码简单节杆菌胆固醇氧化酶的DNA片段克隆到质粒pTY2中,构建pTY2-5332插入表达载体。该载体以简单节杆菌基因组中的16S rDNA位点为整合点,提高了胆固醇氧化酶在基因组中的拷贝数,实现了简单节杆菌胆固醇氧化酶的过表达。重组菌的生长实验分析表明,插入到16S rDNA位点的胆固醇氧化酶没有影响简单节杆菌的生长。重组菌可在20h将2g/L的胆固醇完全转化为4-胆甾烯-3酮,比原始菌的转化时间缩短了4h,提高了胆固醇的转化效率。经过转化条件优化确定了该重组菌以2%的接种量后继续培养16h,然后胆固醇经120目过筛后投料量为2g/L,并添加2%(体积比)二甲基甲酰胺作为促溶剂;胆固醇添加18h后可完全转化为4-胆甾烯-3-酮,是优化前的1.11倍。

海马药材的高效薄层鉴别方法研究

目的建立海马中药材的高效薄层鉴别系统,为科学评价及有效控制其质量提供有效方法。方法以胆固醇和胆甾4-烯-3-酮为对照品,对海马中药材进行薄层鉴别,并考察不同提取方式,不同展开系统、不同点样量、不同薄层板、不同显色剂对海马药材薄层色谱的影响。结果经优化后的高效薄层色谱条件,海马药材鉴别斑点清晰,专属性强,分离效果好。结论该方法简单可行,重复性好,可作为海马药材的有效鉴别方法之一。