新型4-苯胺基喹唑啉类酪氨酸激酶抑制剂的抗肿瘤活性研究

目的对合成的新型4-苯胺基喹唑啉类酪氨酸激酶抑制剂TYIG1~TYIG9进行抗肿瘤活性研究,为寻找具有靶向抗肿瘤活性的候选化合物提供依据。方法采用均相时间分辨荧光（HTRF）法对化合物进行EGFR、VEGFR-2两个靶点的体外活性筛选;采用MTS法对化合物进行肿瘤细胞（A431、A549、H1975、MDA-MB-231）增殖抑制的体外活性评价;采用人肺癌H1975细胞的移植瘤裸鼠模型评价其在动物体内抗肿瘤活性。结果采用HTRF法从合成的一系列化合物中筛选出化合物TYIG4~TYIG9对EGFR、VEGFR-2激酶的活性较好。MTS法检测得到这6个化合物对4种肿瘤细胞（A431、A549、H1975、MDA-MB-231）均有不同程度的抑制作用,其中TYIG6的增殖抑制作用的选择性更为突出;体内试验结果表明TYIG6能够剂量相关性地抑制肿瘤生长,50、100 mg/kg TYIG6对H1975的相对肿瘤抑制率分别为42.59%、34.92%。结论 TYIG6具有良好的体内外抗肿瘤活性,具有成为新型双靶点酪氨酸激酶抑制剂的潜能,有进一步的研究价值。

苯胺基喹唑啉类酪氨酸激酶抑制剂的电喷雾质谱裂解规律

研究吉非替尼、厄洛替尼和艾克替尼3种苯胺基喹唑啉类酪氨酸激酶抑制剂,在电喷雾质谱正离子模式下的裂解规律.通过电喷雾质谱产生各化合物稳定的[M+H]^+准分子离子峰,进而对[M+H]^+离子进行高能诱导裂解和碰撞诱导裂解,获得相应化合物的质谱图.结果表明:在电喷雾电离(ESI)多级质谱中,3种药物的裂解主要发生在喹唑啉环C_4,C_6和C_7位取代基上,并伴随分子内重排和H+的迁移重排;在二级质谱图中,吉非替尼的高丰度特征离子质荷比(m/z)为128.1,厄洛替尼的m/z值为278.1和336.1,埃克替尼的m/z值为278.1,304.1.

4-(1-苯乙基氨基)-6-硝基喹唑啉的简便合成方法

4-氯-6-硝基喹唑啉与α-甲基苄胺在异丙醇等6种溶剂中,经回流可生成4-(1-苯乙基氨基)-6-硝基喹唑啉,反应可在1.5～2h内完成。通过对产物进行柱层析分离,纯品产率为85.7％,并对产物进行了波谱表征。

微波辅助合成4-苯基氨基-7-氨基喹唑啉

以2-氨基-4-硝基苯甲酸和甲酰胺为原料,经Niementowski、氯代、烃化反应合成4-苯基氨基-7-硝基喹唑啉盐酸盐,再经铁粉还原得4-苯基氨基-7-氨基喹唑啉。目标化合物的结构经1HNMR、IR、MS谱表征。前三步反应采用微波辐助合成,大大缩短了反应时间,提高了反应速率和收率。

^(18)F标记表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂4-苯氨基-喹唑啉类方法进展

分子成像可在活体状态下直观判断分子靶向药物靶位点存在状态,分子靶向药物与靶位点结合率及精确监测分子靶向药物的治疗疗效,为临床治疗方案的选择和调整提供依据。EGFR是多种恶性肿瘤的关键靶点。研究表明放射性核素标记的表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂是很有潜力的成像探针,其中尤以4-苯氨基-喹唑啉类研究最为广泛。本文简要介绍4-苯氨基-喹唑啉不同衍生物的结构及性质。阐述了18F标记4-苯氨基-喹唑啉类的主要方法:先用18F标记苯氨基,然后将18F标记化合物与喹唑啉或衍生物进行连接,和18F标记喹唑啉或其衍生物,然后与苯胺或其衍生物进行连接。并且进一步比较不同示踪剂在体外、动物和人体内生物分布、肿瘤摄取和代谢的异同。特别是对18F标记示踪剂与11C标记示踪剂在动物和人体分布进行比较。尤其是[18F]ML04肝脏摄取低,肿瘤-本底高,多数学者认为[18F]ML04是最有潜力成为18F标记表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂4-苯氨基-喹唑啉类示踪剂。

4-氯-7-甲氧基-6-(3-氯丙氧基)喹唑啉的合成

以3-羟基-4-甲氧基苯甲酸为初始原料,经过6步反应,合成了喹唑啉类酪氨酸激酶抑制剂Gefitinib及一系列衍生物的关键中间体4-氯-7-甲氧基-6-(3-氯丙氧基)喹唑啉,其中涉及到喹唑啉环的合成、羟基的合理保护等,反应总收率为44.56%;产物结构经H NMR确证。该方法反应条件温和,原料易得操作简便,适合于工业化生产。

含3-羟基-4-吡啶酮片段的EGFR酪氨酸激酶抑制剂的合成及抗肿瘤活性研究

目的设计合成含具备铁离子螯合功能的3-羟基-4-吡啶酮片段的4-芳胺基喹唑啉类衍生物,并评价其体外抑制肿瘤增殖活性。方法 4-芳胺基-6-硝基-7-氟喹唑啉与3-苄氧基吡啶-4-酮脂肪醇发生取代反应,再经过硝基还原得到4-芳胺基-6-氨基-7-(3-苄氧基-4-吡啶酮)烷氧基喹唑啉中间体,该中间体与各种酰氯或者酸缩合后再脱去苄基得到目标化合物1~6;4-芳胺基-6-氨基-7-烷氧基喹唑啉与3-苄氧基吡啶-4-酮-1-乙酸经缩合后脱苄基得到目标化合物7~12。采用MTT法,以吉非替尼(gefitinib)为阳性对照药,测定目标化合物对人表皮癌细胞系A431、人肺腺癌细胞系H1975和人宫颈癌细胞系HeLa的增殖抑制活性。结果与结论合成了12个未见文献报道的新化合物,其结构经~1H-NM R、MS谱确证;初步体外生物活性筛选结果显示,该类化合物具有较好的抗肿瘤细胞增殖活性,其中化合物1~4、7~10在人表皮癌A431细胞株上的抗增殖活性与阳性对照吉非替尼相当。

4-(1＇-哌嗪基)喹啉化合物的合成与分子动力学模拟研究

分别以7-氟-4-氯喹啉(化合物1)及7-甲氧基-4-氯喹啉(化合物2)为原料合成7-氟-4-(1'-哌嗪基)喹啉(化合物3)和7-甲氧基-4-(1'-哌嗪基)喹啉(化合物4),化合物结构以ESI-MS确证.将化合物3和化合物4分别与HER1、HER2蛋白形成的复合物进行分子动力学模拟,结果显示:化合物3与HER1的亲和力和化合物4与HER1的亲和力相似;化合物4与HER2的亲和力大于化合物3与HER2的亲和力;目标化合物与蛋白氨基酸残基形成氢键不是亲和力大小的决定性因素.

新型EGFR/IGF-1R双靶点抑制剂的设计、合成与抗肿瘤活性研究

目的发现结构新颖的表皮生长因子受体/胰岛素样生长因子-1受体(epidermal growth factor receptor/insulin-like growth factor 1 receptor,EGFR/IGF-1R)双靶点抑制剂。方法以IGF-1R抑制剂BMS-754807的结构为基础,参照前期合成的EGFR酪氨酸激酶抑制剂ET-1的结构和激酶结合模式,设计、合成一类4位连有2-氨基苯并咪唑片段的喹唑啉类化合物,通过氨基咪唑片段与EGFR和IGF-1R铰链区的关键氨基酸残基形成氢键结合,从而获得新型EGFR/IGF-1R双靶点抑制剂。结果合成了10个4-(苯并咪唑-2-氨基)喹唑啉类化合物,通过^(1)H-NMR和ESI-HRMS表征了目标化合物的结构;激酶活性实验表明目标化合物对EGFR和IGF-1R均具有一定的抑制活性;分子模拟对接结果表明目标化合物结构中的氨基咪唑片段是其产生EGFR/IGF-1R双靶点抑制活性的关键药效团。结论合成的目标化合物为EGFR/IGF-1R双靶点抑制剂,后续通过结构优化有望发现新型抗肿瘤药物。

六种酪氨酸激酶抑制剂的电子结构与药效关系的理论研究

苯胺喹唑啉类药物是一类典型的小分子表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFRTKIs)。该类化合物是ATP竞争性抑制剂,能抑制蛋白酪氨酸激酶磷酸化,从而阻断肿瘤细胞瀑布式的信号传递,是用于治疗非小细胞肺癌的常用药物。基于量子化学中的密度泛函理论(DFT),采用自洽反应场(SCRF)方法中的极化连续介质模型(Polarized Continuum Model,PCM)模拟水环境,在B3LYP/6-31+G(d)的水平下优化搜索得到了六种苯胺喹唑啉类EGFRTKIs的最稳定几何构型,并在CAM-B3LYP/6-311++G(d,p)水平下对其电子结构性质进行了系统的研究。基于理论计算可以推测此类药物靶点是EGFR受体上的富电子区域,所以分子的最低非占据轨道(LUMO)对于药物与靶点的结合起着关键作用。此外,概念密度泛函分析表明该类药物的垂直电离能、电负性及软硬度参数可能与其药效相关。上述研究结果为进一步改进此类药物的抗肿瘤性能以及设计、合成新型EGFR-TKIs药物分子提供了理论指导与依据。

含异羟肟酸喹唑啉类非可逆EGFR/HDAC双靶点抑制剂的合成及抗肿瘤活性研究

目的设计、合成含异羟肟酸片段的4-芳氨基喹唑啉类衍生物,评价其体外抗肿瘤活性。方法以4-芳氨基-6-硝基-7-羟基喹唑啉为起始原料,经取代、还原、酰化、还原、缩合及脱保护6步反应得到目标化合物,采用MTT法测定目标化合物对人表皮癌细胞系A431、人肺腺癌细胞系H1975、人宫颈癌细胞系HeLa和人肝癌细胞系HepG2的增殖抑制活性。结果合成了12个未见报道的新化合物,其结构均经1H-NMR和HRMS谱确证;初步生物活性测试结果表明,该系列化合物具有良好的抗肿瘤细胞增殖活性,其中化合物5的活性优于吉非替尼,接近阿法替尼和SAHA。结论本研究设计的EGFR/HDAC双靶点抑制剂对进一步优化设计喹唑啉类EGFR多靶点抑制剂具有参考价值。

以Niementowski反应的改进

在三氯氧磷存在下，以甲酰胺和邻氨基苯甲酸类化合物为原料，用改进的Niementowski反应合成了5种喹唑啉酮化合物：6-X-4(3H)-喹唑啉酮（X=NO2，Cl,Br,I)和1-（呋喃-2-甲基）-6-磺酰胺基-7-氯-4（1H）-喹唑啉酮，并对该反应的历程进行了初步探讨。

尼达尼布的合成新方法

以N-甲基-4-硝基苯胺作为起始原料,依次经氯乙酰化、取代及氢化还原反应制得关键中间体N-(4-氨基苯基)-甲基-2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙酰胺(4);以4-氯-3-硝基苯甲酸为原料,依次经酯化、取代、氢化还原及环合反应制得6-甲氧羰基-2-吲哚酮(8);8与原苯甲酸三乙酯和乙酸酐经"一锅煮"反应制得中间体1-乙酰基-3-甲氧基(苯基)亚甲烯基-2-氧代吲哚环-6-羧酸甲酯(9);4和9进行取代反应的同时脱除保护,经"一锅煮"反应合成尼达尼布,总收率57.2%,其结构经~1H NMR,^(13)C NMR和MS(ESI)确证。

吉非替尼合成路线图解

4-苯胺基喹唑啉是一类较早的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR—TKI）；对此类化合物研究很多，一系列的报道证实了4-苯胺基喹唑啉化合物通过与ATP的结合位点结合，高度选择性地抑制表皮生长因子受体（EGFR）的磷酸化，从而抑制肿瘤细胞的生长，其中，4-取代苯胺基-6，7-二甲氧基喹唑啉被证明有良好的抑制性，现已上市的药物有吉非替尼等优秀的酪氨酸激酶抑制剂。