4-邻氨基酚-4′去甲表鬼臼醚的抗氧化与抗肿瘤作用

目的研究4-邻氨基酚-4′去甲表鬼臼醚(ODE)的体外抗氧化与抗肿瘤活性。方法体外对SGC- 7901细胞的抗肿瘤活性用MTT比色法;体内抗肿瘤活性用动物移植瘤法。用TBA法测大鼠肝自发性和Fe^(2+)-抗坏血酸诱发的心、肝、肾组织匀浆丙二醛(MDA)的生成;分光光度法测H_2O_2诱导的红细胞溶血。结果ODE剂量依赖性地抑制SGC-7901细胞生长,IC_(50)为33.2(16.8～65.5)mg/L,体内对小鼠移植性肿瘤S180和H22均有明显的抑制作用,并浓度依赖性地抑制大鼠肝组织自发性和Fe^(2+)-抗坏血酸诱导的心、肝、肾组织匀浆MDA的生成,对H_2O_2诱导的大鼠红细胞溶血也有一定的抑制作用。结论ODE有明显抗氧化及抗肿瘤作用。

4-间氨基酚-4去甲表鬼臼醚诱导K562细胞凋亡

目的:鬼臼毒素具有抗炎作用,为限制其对机体产生不良反应,探讨经过结构改造的4-间氨基酚-4去甲表鬼臼醚对K562细胞生长抑制及诱导凋亡情况。方法:实验于2004-03/2005-01在兰州医学院完成。①实验材料:4-间氨基酚-4去甲表鬼臼酯由兰州大学应用有机化学国家重点实验室田暄教授惠赠,纯度98%。依托铂甙(连云港恒瑞药业产品,批号04060121,20g/L)临用前以5%二甲亚砜稀释至5g/L。K562细胞由兰州大学中药新药临窗前研究重点实验室传代保种。②细胞生长抑制率检测:取K562细胞,离心后调整浓度为1×108L-1,以100μL等量接种于96孔培养板。4-间氨基酚-4去甲表鬼臼醚组分别加入0.313,0.625,1.25,2.5,5,10,20,40mg/L的4-间氨基酚-4去甲表鬼臼醚药液10μL;依托铂甙组分别加入以上8种终浓度的依托铂甙药液10μL;正常对照组加入等量的溶媒;空白对照组不加细胞和任何药物,只加入等量的完全培养液。采用噻唑蓝法检测药物与细胞作用24,48,72h时K562细胞的生长抑制率。③细胞超微结构观察:取K562细胞,离心后调整浓度为1×109L-1,以2mL等量接种于24孔培养板。4-间氨基酚-4去甲表鬼臼醚组加入2.5mg/L的4-间氨基酚-4去甲表鬼臼醚药液200μL,正常对照组加入等量的溶媒。制作超薄切片,用醋酸双氧铀、柠檬酸铅染色,透射电镜观察细胞形态及细胞质、细胞核的变化。④细胞周期及凋亡检测:取K562细胞,离心后调整浓度为1×108L-1,以2mL等量接种于24孔培养板。4-间氨基酚-4去甲表鬼臼醚组分别加入1.25,2.5,5,10,20mg/L的4-间氨基酚-4去甲表鬼臼醚药液200μL,正常对照组加入等量的溶媒。在流式细胞仪上检测细胞周期,用Multicycle软件计算凋亡细胞百分率。结果:①4-间氨基酚-4去甲表鬼臼醚抑制K562细胞生长情况:在0.313～20mg/L范围内,其对K562细胞的抑制作用随浓度升高而增强,具有量效关系,同时抑制率随着作用时间的延长而升高,具有时效关系;超过20mg/L时抑制作用逐渐下降。依托铂甙对K562细胞的抑制情况与4-间氨基酚-4去甲表鬼臼醚类似。②细胞超微结构:正常对照组K562细胞核形状规则,核膜清晰可见,内质网丰富,内含大量线粒体,细胞表面微绒毛多,染色体分布于核中央。4-间氨基酚-4去甲表鬼臼醚组K562细胞出现明显的凋亡特征,微绒毛消失,细胞浆固缩,染色体凝集为团块状分布于核膜边缘,细胞内出现大量空泡,线粒体和内质网减少,细胞周围出现凋亡小体。③细胞周期及凋亡情况:1.25,2.5,5,10,20mg/L4-间氨基酚-4去甲表鬼臼醚作用24h,分别有19.4%,34.8%,34.0%,6.9%,4.5%的K562细胞发生凋亡,G0/G1期和S期K562细胞减少,于G2/M期明显增多。正常对照组凋亡率仅为0.3%。结论:①4-间氨基酚-4去甲表鬼臼醚能够抑制K562细胞的生长,呈时效、量效关系。②4-间氨基酚-4去甲表鬼臼醚可诱导K562细胞凋亡。

4-邻氨基酚-4’去甲表鬼臼酯(ODE)在K562肿瘤细胞凋亡中的作用

目的:研究不同浓度4-邻氨基酚-4’去甲表鬼臼酯(ODE)对肿瘤细胞生长的影响,探讨ODE诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法:采用MTT法测定ODE对K562细胞生长的抑制作用,透射电镜观察细胞超微结构,免疫细胞化学方法检测K562细胞中Bcl-2/Bax比率变化。结果:不同浓度ODE对K562细胞生长有抑制作用,随ODE浓度的增加及作用时间的延长细胞生长抑制率增高(P<0.05)。透射电镜观察可见凋亡细胞发生。凋亡细胞中Bcl-2灰度较正常细胞染色的灰度低,Bax在凋亡细胞中的灰度较正常细胞高。结论:ODE能够显著抑制K562细胞的生长,其抑制作用随浓度的增加及时间的延长而增强,通过形态学可观察到凋亡细胞的产生,其诱导凋亡可能是通过改变凋亡基因而发挥作用的。

4-邻氨基酚-4'去甲表鬼臼酯(ODE)在K562肿瘤细胞凋亡中的作用

目的研究不同浓度4-邻氨基酚-4'去甲表鬼臼酯(ODE)对肿瘤细胞生长的影响,探讨ODE诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法采用MTT法测定ODE对K562细胞生长的抑制作用,透射电镜观察细胞超微结构,免疫细胞化学方法检测K562细胞中Bcl-2/Bax比率变化。结果 (1)不同浓度ODE对K562细胞生长有抑制作用,随ODE浓度的增加及作用时间的延长细胞生长抑制率增高(P<0.05);(2)透射电镜观察可见凋亡细胞发生;(3)凋亡细胞中Bcl-2灰度较正常细胞染色的灰度低,Bax在凋亡细胞中的灰度较正常细胞高。结论 ODE能够显著抑制K562细胞的生长,其抑制作用随浓度的增加及时间的延长而增强,通过形态学可观察到凋亡细胞的产生,其诱导凋亡可能是通过改变凋亡基因而发挥作用的。

4-间氨基酚-4′去甲表鬼臼酯的抗氧化与抗肿瘤作用

目的研究4-间氨基酚-4′去甲表鬼臼酯(MDE)的体外抗氧化与抗肿瘤活性。方法体外对人胃癌细胞SGC-7901的抗肿瘤活性用四氮唑比色法;体内抗肿瘤活性用动物移植瘤法。用硫代巴比妥酸法测定大鼠肝自发性,Fe^(2+)-抗坏血酸诱发的心、肝、肾组织匀浆中丙二醛生成;分光光度法测定H_2O_2诱导的红细胞溶血。结果MDE剂量依赖性地抑制SGC-7901细胞生长,IC_(50)为36.5(17.1～77.8)mg/L,体内对小鼠移植性肿瘤S180和H22均有明显的抑制作用,并浓度依赖性地抑制大鼠肝组织自发性和Fe^(2+)-抗坏血酸诱导的心、肝、肾组织匀浆中丙二醛的生成,对H_2O_2诱导的大鼠红细胞溶血也有一定的抑制作用。结论MDE有明显的抗氧化及抗肿瘤作用。

邻-氨基酚去甲表鬼臼毒素抗骨肉瘤SOSP-9607细胞作用及机理研究

目的:研究邻-氨基酚去甲表鬼臼毒素(ODE)抗骨肉瘤SOSP-9607细胞作用及机理.方法:采用MTT比色法测定体外抗骨肉瘤SOSP-9607细胞作用,透射电子显微镜观察细胞凋亡形态学;采用激光共聚焦显微镜测定SOSP-9607细胞内[Ca2+],[Mg2+],pH值和线粒体膜电位(MMP)的荧光强度;免疫细胞化学技术检测细胞内Bc1-2和Bax表达.结果:ODE时间、浓度依赖性地抑制SOSP-9607细胞生长,诱导细胞凋亡具有典型的凋亡形态特征如细胞膜表面微绒毛消失、核固缩、核碎裂等;剂量依赖性地增加SOSP-9607细胞内Ca2+,Mg2+浓度而降低细胞内pH值和线粒体膜电位;使SOSP-9607细胞内Bcl-2蛋白表达下降而Bax蛋白表达增加.结论:邻-氨基酚去甲表鬼臼毒素在体外实验中能明显抑制骨肉瘤SOSP-9607细胞生长,其作用机制可能与改变细胞内环境稳态及Bcl-2和Bax蛋白表达而诱导细胞凋亡有关.

对-氨基苯甲酸-4’去甲表鬼臼酯的抗氧化与抗肿瘤作用

目的：研究对-氨基苯甲酸-4’去甲表鬼臼酯（4-p-amino-benzoinc acid-4’-demethylepipodophyllotoxin ester，PDE）的体外抗氧化与抗肿瘤活性。方法：体外对SGC-7901细胞的抗肿瘤活性用MTT比色法，体内抗肿瘤活性用动物移植瘤法。用TBA法测大鼠肝自发性，Fe^2＋-抗坏血酸诱发的心、肝、肾组织匀浆丙二醛（MDA）生成，分光光度法测H2O2诱导的红细胞溶血。结果：PDE剂量依赖性地抑制SGC-7901细胞生长，作用48h IC50为84．7（51．7-138．9）mg／L，在体内PDE 10、20mg／kg对S180和H22肿瘤的抑制率分别为25．2％、46．5％和22．9％、39．3％。PDE浓度依赖性地抑制大鼠肝组织自发性MDA生成，IC50为22．7（16．9-30．4）mg／L，也能浓度依赖性地抑制Fe^2＋-AA诱导的大鼠心、肝、肾组织匀浆MDA生成，IC50分别为30．3（13．9-66．1）、29．9（20．9-42．7）和13．3（1．8-96．9）mg／L。PDE对H2O2诱导的大鼠红细胞溶血也有一定的抑制作用，40、80mg/L的抑制率分别为26．8％和100．2％。结论：PDE有明显抗氧化及抗肿瘤作用，二者有一定的关系。

一种新的手性氨基醚配体的合成与表征

利用生产氯霉素的副产物(+)-(1S,2S)-1-(对硝基苯基)-2-氨基-1,3-丙二醇,经过4步反应合成了一种新的手性氨基醚催化剂———(+)-(4S,5S)-5-(N-甲基-N-邻甲氧苄基)氨基-2,2-二甲基-4-对硝基苯基-1,3-二烷,其结构经IR、1HNMR、13CNMR、HRMS确证。