HPLC测定珍珠滴丸中3，4-O-二咖啡酰基-奎宁酸的含量

珍珠滴丸系由羊耳菊、珍珠等药味组成，经提取精制而得，为贵州省中药现代化科技产业研究开发基金项目。本方具有解毒定痛，化腐生肌之功效，临床用于复发性口腔溃疡等症。处方中的君药羊耳菊为贵州地道药材，具有疏风散热，解毒消肿作用。

洋甘菊中2种咖啡酰基奎宁酸大孔树脂纯化工艺的优化

目的优化洋甘菊中2种咖啡酰基奎宁酸大孔吸附树脂纯化工艺。方法以2种咖啡酰奎宁酸的吸附率和解吸率为评价指标筛选树脂种类。以吸附率和解吸率为评价指标,筛选最优工艺参数,包括上样液浓度、上样量、吸附速率、水冲洗用量、洗脱剂种类和用量等。结果最佳条件为采用AB-8大孔吸附树脂纯化,药液浓度0.20 g/ml,树脂柱径高比1:6,吸附速率2 BV/h,在此条件下,上柱量达7 BV;吸附好的树脂先用1 BV水洗净,流速5 BV/h,再用3 BV 50%乙醇和1 BV 70%乙醇洗脱活性部位,合并洗脱液,浓缩,干燥既得。结论该工艺稳定可靠,可用于大孔吸附树脂纯化洋甘菊中2种咖啡酰基奎宁酸。

不同加工工艺对亳菊中绿原酸、木犀草苷和3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸含量的影响

目的比较不同加工方法对亳菊中绿原酸、木犀草苷和3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸含量的影响。方法样品用50%甲醇溶液提取,采用高效液相色谱法在同一色谱条件(色谱柱为Shimadzu VP-ODS,250mm×4.6mm,5μm;流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液;梯度洗脱;流速:1.0mL/min;柱温:30℃)下对亳菊3种成分同时进行测定并比较不同干燥条件下各成分的含量。结果不同加工方法对亳菊中3种有效成分含量有明显影响,对亳菊花的色泽、气味、质地有明显影响,胎菊和菊米无明显变化。结论微波和蒸制干燥可作为亳菊规模化生产的加工方法。

羊耳菊药材中3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量测定

目的 建立羊耳菊药材中3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的HPLC含量测定方法,为其质量控制和运用提供依据。方法 采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈-0.1%磷酸水（17∶83）为流动相等度洗脱,检测波长329 nm,柱温40℃,流速1.0 m L/min。结果 测定了20批不同产地的羊耳菊药材,3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量在0.12%~0.65%之间。结论 该方法简便、准确、重复性好,可用于羊耳菊药材的质量评价。

高效液相色谱法同时测定桑菊感冒片中绿原酸、木犀草苷和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定桑菊感冒片中绿原酸、木犀草苷和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量,以提高原质量标准。方法：样品用50%甲醇溶液提取,采用Phenomenex C18色谱柱（5μm,4.6mm×250mm）分离;流动相为0.1%磷酸-乙腈,梯度洗脱;流速为1.0mL.min-1;检测波长为348nm。结果：绿原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸分别在2.8128～140.6400μg.mL-1、0.9580～47.9023μg.mL-1、0.9879～49.3944μg.mL-1范围具有良好的线性;加标回收率分别为99.1%、100.9%、100.1%;RSD分别为1.5%、1.8%、1.8%（n=9）。结论：该方法简单易行,准确性和重复性好,可用于桑菊感冒片的质量控制。

RP-HPLC同时测定颜复康胶囊中绿原酸、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸、迷迭香酸和黄芩苷的含量

目的建立了同时测定颜复康胶囊中绿原酸、3，5-O-双咖啡酰基奎宁酸、迷迭香酸、黄芩苷含量的反相高效液相色谱法（reversedphasehighperformanceliquidchromatography，RP—HPLc）。方法色谱柱：依利特C18柱（200mm×4．6nlin，5Ixm），流动相：乙腈（A）一体积分数为0．05％的磷酸水溶液（B）（梯度洗脱），流速：1．0mL·min一，柱温：30℃，检测波长：330am。结果绿原酸、3，5-0-双咖啡酰基奎宁酸、迷迭香酸、黄芩苷的线性分别为5．12～40．96（r=0．9996）、3．93～31．41（r=0．9997）、0．89～7．12（r=0．9996）、10．30～82．44mg·L。（r=0．9991），4种成分的平均加样回收率为99．7％～101．8％，RSD为2．8％～4．0％（n=6）。结论建立的含量测定方法可用于颜复康胶囊的质量控制。

HPLC法测定小儿感冒颗粒中绿原酸、木犀草苷3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、连翘苷的含量

目的:建立HPLC法测定小儿感冒颗粒中绿原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸和连翘苷的含量。方法:AgilentC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-0.4%磷酸,梯度洗脱;检测波长:0~45min(327nm),45~83min(202nm);柱温:30℃;流速:1mL·min^-1,进样量10μL。结果:绿原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、连翘苷浓度分别在0.01267~0.3801、0.1040~1.5600、0.00840~0.2526、0.03190~0.3190μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9999,1.0000,0.9966,1.0000);平均加样回收率分别为97.89%、96.37%、96.63%和103.3%(n=6)。结论:所建立的方法可同时测定小儿感冒颗粒中的多种有效成分的含量。

HPLC测定10种菊花中绿缘酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量

1仪器与试药 高效液相色谱仪为岛津LC-20A;电子天平为SartoriusME215S。绿缘酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸对照品（中国药品生物制品检定所,批号110753-201314,111720-200905,111782-201204）;色谱甲醇（DIKMA）,超纯水（MILLIPORE）,其余试剂为分析纯;菊花为市售。

HPLC法测定灯盏生脉胶囊中4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸的含量

目的：建立HPLC法测定灯盏生脉胶囊中4，5-二-0-咖啡酰奎宁酸的含量测定方法。方法：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0．1％三氟乙酸（20：80）为流动相；检测波长为327nm。理论塔板数按4，5-二-O-咖啡酰奎宁酸峰计算应不低于8000。结果：4，5-二-O-咖啡酰奎宁酸进样量在0．02～0．24μg范围内呈良好线性关系（r=0．9999）。样品平均回收率为99．45％，RSD=2．7％。结论：该法操作简便，结果准确，重现性好，可用于控制灯盏生脉胶囊的质量。

白花刺参中的咖啡酰基奎宁酸成分

著名藏药白花刺参Morinanepalensisvar .albaHand . Mazz.的全株的水溶性部分通过硅胶、RP 8、SephadexLH 2 0柱层析分离 ,得到 4个咖啡酰基奎宁酸 1～ 4,运用光谱和波谱方法 ,分别鉴定为 3 O 咖啡酰基 奎宁酸 ( 1 )、3,5 O 双咖啡酰基 奎宁酸 ( 2 )、3,4 O 双咖啡酰基 奎宁酸 ( 3)和 4,5 O 双咖啡酰基 奎宁酸 ( 4 ) .应用 2DNMR图谱 ,对其氢和碳的化学位移进行全归属 ,并报道 1 ,2在氘代甲醇和氘代二甲亚砜两种溶剂下测定1 H和1 3C化学位移 .

羊耳菊中咖啡酰基奎宁酸类化学成分研究

采用正相硅胶色谱柱、Sephadex LH-20以及制备HPLC等色谱方法对羊耳菊进行分离纯化,并通过理化常数和波谱数据鉴定其化学结构。深入研究羊耳菊干燥全草的咖啡酰基奎宁酸类化学成分。从羊耳菊中分离得到8个咖啡酰基奎宁酸类化合物,分别为1,5-O-二咖啡酰基奎宁酸（1）、1,3,5-O-三咖啡酰基奎宁酸（2）、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯（3）、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯（4）、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸乙酯（5）、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸乙酯（6）、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸（7）、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸（8）。化合物1-3为从该植物中首次分离得到,4-6从该属植物中首次分离得到。

黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类化合物体外抗类风湿性关节炎机制研究

目的探讨黑骨藤中分离得到的8个咖啡酰基奎宁酸类单体化合物抑制人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)增殖的作用,并对其活性较好的2个化合物进行可能的分子机制研究。方法采用50μg·L^(-1) TNF-α活化MH7A细胞。MTS法测定8个单体化合物对MH7A细胞增殖的影响;ELISA法测定细胞上清液中IL-1β、PGE_2含量;Griess试剂法测定NO的含量;Western blot检测各组细胞中COX-2、iNOS、NF-κB及MAPK通路相关蛋白表达。结果与TNF-α模型组比较,8个单体化合物均可不同程度抑制MH7A细胞的增殖和细胞因子的分泌(P<0.05,P<0.01),在200μmol·L^(-1)浓度下,3-O-咖啡酰基奎宁酸(3-CQA)作用最明显,其次是1,3-O-二咖啡酰基奎宁酸(1,3-DCQA);Western blot结果表明,3-CQA和1,3-DCQA均能明显降低COX-2、iNOS、NF-κB p65、p-IκB的蛋白水平,以及MAPK信号通路相关蛋白ERK、JNK、p38的磷酸化程度(P<0.01)。结论黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类化合物具有较好的抗类风湿性关节炎活性,其作用机制可能与抑制MAPK信号通路的激活,降低NF-κB活性,抑制下游炎症因子表达,进而减轻炎症反应有关。

超高效液相色谱-二极管阵列检测-串联质谱法测定菊花中的10种咖啡酰基奎宁酸和22种黄酮类化合物

采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱,以含0.1%甲酸的乙腈-水为流动相,0.3 mL/min梯度洗脱以超高效液相色谱-串联质谱法建立了测定菊花中多酚类化合物的方法。菊花样品经过甲醇水溶液超声提取后直接进样分析,通过质谱分析以及比对标准品或文献中化合物的保留时间和质谱参数等,鉴定了亳菊、滁菊、贡菊和杭菊中10种咖啡酰基奎宁酸类化合物和22种黄酮类化合物。结果表明,4种菊花中多酚类化合物的含量均符合《中国药典》规定的要求,但各种类咖啡酰基奎宁酸和黄酮化合物的组成及含量差异显著,含量较高的除绿原酸(3-CQA),3,5-二咖啡酰基奎宁酸(3,5-DCQA)和木犀草苷(L-7-O-Glu)之外,还有芹菜素-7-O-丙二酰葡萄糖苷(AP-7-O-6″-MGlu)、4,5-二咖啡酰基奎宁酸(4,5-DCQA)、1,5-二咖啡酰基奎宁酸(1,5-DCQA)、木犀草素-7-O-丙二酰葡萄糖苷(L-7-O-6″-MGlu)和芹菜素-7-O-葡萄糖苷(AP-7-O-Glu)等。4种菊花中,黄酮类化合物总量差异较大,但咖啡酰基奎宁酸类化合物总量相当,对多酚类化合物总量而言,贡菊含量最高,达66.85 mg/g,其次为杭菊、滁菊和亳菊,含量分别为54.69,44.59和37.10 mg/g。

苗药黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类部位对人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞MH7A增殖及炎症因子分泌的影响

目的:研究苗药黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类部位(CADF)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞MH7A增殖及炎症因子分泌的影响,探讨CADF抗RA的作用机制。方法:将MH7A细胞分为空白组、TNF-α模型组、甲氨蝶呤组(阳性对照,20 mg/L)和CADF不同质量浓度组(50、100、200、400 mg/L),除空白组外,其余各组均以50μg/L TNF-α刺激活化MH7A细胞。以TNF-α与相应药物的混合液共同作用24 h后,检测细胞的增殖情况和培养液中一氧化氮(NO)、前列腺素E_2(PGE_2)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的含量。结果:与空白组比较,TNF-α模型组细胞增殖活性显著增强(P<0.01),培养液中NO、PGE2、IL-1β、IL-6含量显著增加(P<0.01);与TNF-α模型组比较,各给药组细胞的增殖均受到显著抑制(P<0.05或P<0.01),培养液中NO、PGE2、IL-1β、IL-6含量均显著减少(P<0.01),且与CADF具有一定的量效关系。结论:CADF可通过抑制TNF-α诱导的MH7A细胞增殖,减少炎症因子NO、PGE2、IL-1β、IL-6的分泌,从而发挥其抗RA的作用。

天然咖啡酰基奎宁酸类化合物抗RSV活性及其构效关系研究

目的:研究天然来源的咖啡酰基奎宁酸类化合物体外抗呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus,RSV)的活性及其构效关系。方法:采用细胞病变(cytopathic effect,CPE)法对咖啡酰基奎宁酸类化合物抗RSV体外活性进行筛选,MTT法检测化合物对HEp-2细胞的细胞毒性,通过3D-QSAR(three-dimensional quantitative structureactivity relationship)模型分析其构效关系。结果:CPE结果显示咖啡酰基奎宁酸类化合物均表现出较好的抗RSV作用,其中活性最好的4,5-双咖啡酰基奎宁酸甲酯(CQA-4)的IC_(50)=2.5μmol/L,选择性指数SI>153.8,远远优于阳性对照药物利巴韦林(IC_(50)=8.3μmol/L,SI>20);3D-QSAR分析结果显示,咖啡酰基为咖啡酰基奎宁酸衍生物抗RSV的活性基团。结论:天然来源的咖啡酰基奎宁酸类衍生物均具有抗RSV活性,其中双咖啡酰基奎宁酸类化合物活性最好。构效关系研究表明,该类化合物抗RSV活性受其构型和取代基的影响很大。

单一内标多控法同步测定杏香兔耳风中绿原酸和3,5-二咖啡酰基奎宁酸的含量

目的建立杏香兔耳风中绿原酸和3,5-二咖啡酰基奎宁酸的一标多控含量测定方法。方法采用HPLC单一内标多控法进行测定,以绿原酸为3,5-二咖啡酰基奎宁酸的参照内标,在328nm处测定3,5-二咖啡酰基奎宁酸相对于绿原酸校正因子,利用校正因子和绿原酸同时测定绿原酸和3,5-二咖啡酰基奎宁酸的含量。结果绿原酸和3,5-二咖啡酰基奎宁酸分别在0.20～2.00μg和0.08～0.80μg范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率绿原酸为99.07%(RSD=0.77%),3,5-二咖啡酰基奎宁酸为99.26%(RSD=0.98%)。结论该方法准确、操作简单、专属性和重现性良好,可实现只用绿原酸一种对照品同时测绿原酸和3,5-二咖啡酰基奎宁酸的含量。

HPLC法测定猪毛蒿中绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸成分的含量

目的:建立猪毛蒿中绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸的含量测定方法。方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:0.1%磷酸水-乙腈,梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;检测波长:327 nm;柱温:30℃;进样量:10μL,采用HPLC法测定猪毛蒿中绿原酸和3,5-O-二咖啡酰奎宁酸的含量。结果:建立的含量测定方法稳定可靠,精密度、稳定性、重复性及加样回收率试验结果均良好。结论:本实验建立的猪毛蒿含量测定方法可用于该药材的质量控制。

5-0-[(3,4-亚甲二氧基)-肉桂酰基]-奎宁酸甲酯的合成

目的研究5-O-[(3,4-亚甲二氧基)-肉桂酰基]-奎宁酸甲酯的合成工艺。方法以(3,4-亚甲二氧基)-肉桂酰氯和奎宁酸为原料经5步反应制得本品。并对本品进行鸭乙肝病毒2215细胞体外抗病毒试验。结果得到的样品经NMR和MS分析为结构正确的化合物,本品抗乙肝病毒作用明显。结论5-O-[(3,4-亚甲二氧基)-肉桂酰基]-奎宁酸甲酯为一新的化合物,有可能成为治疗乙型肝炎的新药或先导化合物。

3,5-O-二咖啡酰奎宁酸的合成

目的研究3,5-O-二咖啡酰奎宁酸的合成工艺。方法根据目标化合物3,5-O-二咖啡酰奎宁酸的结构特点,本文选择咖啡酸与奎宁酸作为合成原料,拟采用选择性地保护二者活泼官能团-酰氯成酯-脱保护的方法以得到目标产物。结果目标产物经NMR和MS分析为结构正确的化合物。结论本合成工艺提高了3,5-O-二咖啡酰奎宁酸的产率,但副产物较多,分离较困难。