Al-4.1Cu-1.4Mg合金均匀化退火工艺研究

半连续水冷铸造的Al-4.1Cu-1.4Mg合金出现枝晶偏析。采用光学显微镜、扫描电镜、差热分析等手段研究工业化生产条件下合适的均匀化退火制度。研究结果表明:适宜于工业化生产的均匀化退火制度为(490±5)℃20 h。按该制度均匀化退火后Al-4.1Cu-1.4Mg合金枝晶偏析消除,弥散相分布也趋于均匀,铸造应力下降,加工性能良好。

蛋白4.1R对肝细胞HL-7702增殖、凋亡以及糖酵解的影响

目的探究蛋白4.1R对肝细胞增殖、凋亡以及糖酵解的影响,并初步阐明其分子机制。方法以肝细胞株HL-7702为材料,利用CRISPR/Cas9技术构建4.1R^(-/-)HL-7702细胞株。设置对照组为正常培养的4.1R+/+HL-7702细胞,实验组为4.1R^(-/-)HL-7702细胞。细胞在培养24、48以及72 h时,分别用CCK-8及EdU-488染色,然后利用酶标仪以及流式细胞术检测细胞的增殖能力。细胞经Annexin V-FITC/PI染色后,流式细胞术检测HL-7702细胞在培养24、48以及72 h时的凋亡水平。利用生化试剂盒分别检测HL-7702细胞葡萄糖摄取量、乳酸分泌量以及ATP生成的变化。pH计检测培养48 h HL-7702细胞上清培养基的pH值。qRT-PCR检测HL-7702细胞糖酵解过程关键调节酶HK2、PFKL、PKM2以及LDHA的mRNA表达量。Western blotting检测AMPK、p-AMPK、Raptor以及p-Raptor的蛋白表达量。结果Western blotting以及基因测序结果表明4.1R^(-/-)HL-7702细胞株构建成功。与对照组相比,4.1R^(-/-)组的CCK-8和EdU-488实验结果均显示HL-7702细胞的增殖能力降低;细胞凋亡实验结果表明,4.1R^(-/-)HL-7702细胞凋亡水平升高。蛋白4.1R的缺失导致HL-7702细胞葡萄糖摄取量(P<0.05)、乳酸分泌量(P<0.001)、ATP生成(P<0.001)下降,细胞上清培养基pH值(P<0.01)升高。qRT-PCR实验结果表明糖酵解过程关键调节酶的mRNA表达量均下降(P<0.001)。相较于HL-7702细胞,4.1R^(-/-)HL-7702细胞的AMPK和Raptor蛋白表达量下降,p-AMPK和p-Raptor蛋白表达量升高。结论蛋白4.1R的缺失导致HL-7702细胞增殖能力降低、凋亡水平增加,糖酵解过程被抑制,其调控机制与下游AMPK-mTORC1信号通路的激活密切相关。

蜈蚣毒液中钾离子通道Kv4.1抑制剂SsTx-P2的分离和结构鉴定

目的:挖掘蜈蚣毒液中的电压门控钾离子通道Kv4.1多肽抑制剂,确定其一级结构,并对其空间结构进行建模分析。方法:利用离子交换层析和反相高效液相色谱对蜈蚣毒液的多肽组分进行分离纯化,通过全细胞膜片钳技术鉴定能够抑制Kv4.1通道的多肽;运用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱鉴定多肽的分子量,借助Edman降解测序和二维质谱测序确定多肽的一级结构;基于迭代线程装配细化在线分析建立多肽空间结构模型。结果:从蜈蚣毒液中分离纯化得到一条能够抑制Kv4.1通道的多肽SsTx-P2,分子量为6122.8,氨基酸序列为NH2-ELTWDFVRTCCKLFPDKSECTKACATEFTGGDESRLKDVWPRKLRSGDSRLKD-OH,其在1.0µmol/L浓度下能够抑制Kv4.1通道超过95%的电流。空间结构模型显示,多肽SsTx-P2拥有一个保守的螺旋结构。结论:本文通过分离纯化从蜈蚣毒液中得到一条多肽SsTx-P2,能够强效抑制钾离子通道Kv4.1,其空间结构具有一定的保守性。

脂多糖活化星形胶质细胞并下调其内向整流性钾离子通道(Kir4.1)的表达

目的探讨脂多糖(LPS)对星形胶质细胞的活化作用及内向整流性钾离子通道4.1(Kir4.1)表达的影响。方法分离培养新生SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞;LPS处理或者和白细胞介素1受体拮抗剂(IL-1ra)处理培养的细胞,MTT法检测细胞活力,免疫细胞化学技术检测星形细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,ELISA检测细胞培养上清中的IL-1β的水平,实时定量PCR法检测星形胶质细胞IL-1β和Kir4.1 mRNA的表达情况。结果 LPS促进星形胶质细胞的活化具有浓度和时间依赖性。LPS可促进星形胶质细胞IL-1β的分泌和IL-1βmRNA的表达,下调Kir4.1 mRNA的表达;与LPS组相比较,IL-1ra可以有效对抗上述两结果。结论 LPS可诱导培养的星形胶质细胞活化;LPS下调星形胶质细胞Kir4.1 mRNA表达可能与IL-1β有关。

人颞叶内侧癫痫海马组织星形胶质细胞水通道蛋白4和内向整流性钾离子通道4.1的再分布

目的研究人颞叶内侧癫痫海马组织星形胶质细胞水通道蛋白4(AQP4)和内向整流性钾离子通道4.1(Kir4.1)的分布。方法对10例颞叶内侧癫痫(MTLE)和6例非颞叶内侧癫痫(non-MTLE)手术切除海马组织,应用光镜及透射电镜观察组织学及超微结构,免疫荧光组织化学法观察星形胶质细胞AQP4和Kir4.1的分布。结果 MTLE海马组织星形胶质细胞大量增生伴明显肿胀,神经元显著固缩。non-MTLE海马组织中,AQP4和Kir4.1在星形胶质细胞血管周围足突(pAST-ef)分布多于其他部位,呈现极性分布特点;而在MTLE海马组织中,AQP4和Kir4.1在pAST-ef分布减少,其他部位分布增加,极性分布改变。结论海马组织星形胶质细胞上AQP4和Kir4.1极性分布变化可能与颞叶内侧癫痫发生相关。

中国人先天性溶血性贫血红细胞膜骨架4.1蛋白电泳变异型(英文)

目的 :鉴定中国人先天性溶血性贫血 (溶贫 )红细胞膜 4.1蛋白 (band4.1)电泳变异类型。 方法 :以普通显微镜、相差镜和扫描电镜观察 2 5例溶贫患者红细胞形态学变化。以 4%～ 15 %梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳作红细胞膜蛋白定性定量分析。结果 :(1) 2 5例红细胞形态学异常溶贫患者中 ,band4.1定性定量改变者 11例 (4 4%)。(2 ) Band4.1电泳变异型 :14.1a/b亚基同时缺陷 ;2 4.1a亚基缺陷 ,a/ b亚基相对含量比值倒置 (患者 0 .6 5～ 1.2 0 ,正常对照 1.87± 0 .2 2 ) ;34 .1a亚基部分缺失伴异常区带 (相对分子质量 70 0 0 0、6 2 0 0 0、480 0 0 ) ;44 .1a亚基完全缺失伴 740 0 0异常区带。 (3)除了 band4.1a完全缺失者为筛孔状红细胞形态变化以外 ,其他电泳变异型与细胞形态学变化无明显对应关系。结论 :Band 4.1缺陷不仅可以导致红细胞椭圆形变和球形变 ,还可导致其他形态改变如筛孔形状。除了 spectrin、band 3以外 ,band 4.1缺陷是中国人遗传性球形红细胞增多症 (HS)另一种常见病因 ,而欧美国家为 ankyrin缺乏 ,在日本更常见 band 4.2缺乏。 Band 4.1a完全缺失和部分缺失伴异常区带电泳型未见于国外文献报道。结果提示 ,HS的主要病因和 band 4.1变异型差异可能与种族不同有关。

长江三峡工程库首区胡家坪MS4.1水库诱发地震研究

本文在系统收集有关资料并对地震现场进行考察的基础上,分析了2008年11月22日发生在秭归县归州镇香溪村胡家坪MS4.1级地震及其发生的地质-水文地质与地震活动背景条件,介绍了地震灾害。并进一步讨论了相关的地震前兆异常、地震成因等科学问题,认为该地震是在水库水体荷载与库水下渗的共同作用下沿仙女山断裂发生的构造型水库诱发地震,并认为震前有一定的前兆异常,这个地震的发生除了水库蓄水作用之外,可能还与汶川地震对该区应力场的影响有关。

肺小细胞癌组织中4.1蛋白家族的表达

目的:探讨肺小细胞癌组织中4.1蛋白家族的表达情况以及与淋巴结转移的关系。方法:取肺小细胞癌标本41例,采用免疫组织化学Envision+染色法检测4.1蛋白家族的表达情况。以21例癌旁正常组织作为对照。结果:肺小细胞癌组织中4.1R、4.1N和4.1G的阳性表达率低于癌旁正常组织(P<0.05),4.1B在2种组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05);癌组织中4.1N、4.1G和4.1B的表达均与淋巴结转移无关(P>0.05),4.1R的表达与淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:4.1蛋白家族成员在肺小细胞癌的发生、发展过程中作用不同。

Kir 4.1基因沉默对U-251细胞周期的影响

目的:针对人内向整流性钾离子通道(inwardly rectifying potassium channel protein,Kir)4.1基因构建si RNA干扰载体,探讨其对U-251细胞增殖、生长的影响,为临床治疗及开发新的抗肿瘤药物提供实验依据。方法:采用细胞培养、质粒转染、流式分选、RT-PCR、Western blot及流式细胞仪对构建的质粒进行鉴定并观察对照组和干扰组细胞周期的变化。结果:对DH5α中抽提的重组载体测序验证结果和插入序列一致;成功筛选出一个有效质粒;质粒转染U-251细胞后,细胞周期中的G2期细胞数量由19.39%降至1.5%,明显减少(P=0.018),S期细胞数量由36.32%升至51.22%,明显增多(P=0.027)。结论:成功构建针对人Kir 4.1基因的si RNA干扰载体;Kir 4.1干扰载体可能是通过抑制U-251细胞周期中的G2期,使U-251细胞的生长停滞在S期,从而达到干扰U-251细胞的增殖能力。

IL-1β促进星形胶质细胞增殖并下调Kir4.1的表达

目的探讨白细胞介素1β(IL-1β)对星形胶质细胞增殖及其内向整流性钾离子通道4.1(Kir4.1)表达的影响。方法体外培养新生SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞;用IL-1β或者和白细胞介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)处理培养的星形胶质细胞,流式细胞术检测IL-1β对星形胶质细胞细胞周期的影响;荧光定量PCR检测IL-1β对星形胶质细胞Kir4.1 mRNA表达的影响;Western blot法检测IL-1β对星形胶质细胞Kir4.1蛋白表达的影响。结果 IL-1β可以以剂量和时间依赖的方式促进星形胶质细胞的增殖。用10 ng/m L的IL-1β处理星形胶质细胞24 h后,Kir4.1 mRNA和蛋白的表达均下降,IL-1Ra可以有效对抗由IL-1β引起的Kir4.1 mRNA和蛋白的表达下降;Kir4.1 mRNA和蛋白的表达下调也能因IL-1β的去除而部分被恢复。结论 IL-1β可以促进星形胶质细胞的增殖,IL-1β是影响星形胶质细胞Kir4.1表达的关键因素。

RegCM4.1对中国区域气候模拟能力评估

利用中国气象局提供的1985—2004年756个台站的逐日降水和气温观测数据评估了区域气候模式(Reg CM4.1)对中国地区不同季节的降水和气温的模拟性能,并结合中国的区域气候特征和气候带分布进行分区讨论。结果表明Reg CM4.1能够较好地再现中国地区四季降水占全年百分比、降水率的空间分布特点以及降水带南北摆动的季节变化特征。Reg CM4.1对平均气温分布模拟较好,强度和高低中心与观测事实接近,但对青藏高原地区的气温分布模拟值一致偏低。同时发现Reg CM4.1能够合理再现内陆地区气温日较差明显大于沿海地区的总体分布特征,不过模拟值在新疆和沿海地区比观测结果均偏低。

ASME PTC4.1—1964标准和ASME PTC4—2013标准关于锅炉效率计算的区别

简要介绍了国内锅炉性能试验的常用标准,包括中国标准和美国标准。由于不同标准版本会带来试验结果上的差异,有必要对如何使用不同标准版本进行研究分析,以便工程技术人员更好地理解和掌握不同标准版本在实际工程中的使用。本文针对实际工程中常用的美国标准,重点对ASME PTC4.1—1964标准和ASME PTC4—2013标准中锅炉效率计算方法的区别进行了分析讨论,详细比较了锅炉效率的定义、适用范围、基准温度以及主要热损失计算的差异。试验案例计算结果表明:如果忽略物理输入热,2个标准计算的锅炉效率结果相对偏差值为0.054%;如果考虑物理输入热,2个标准计算的毛效率相对偏差值为0.055%,锅炉燃料效率相对偏差值为0.079%。

2018-04-06无为M_L4.1地震震源机制和深度及发震构造研究

基于华东地区测震台网记录,采用CAP方法反演2018-04-06无为M L4.1地震的震源机制解和震源深度,利用双差定位方法对2016年以来无为地区发生的地震进行重新定位。结果显示,地震的震源机制解为:节面I,走向120°,倾角57°,滑动角27°;节面Ⅱ,走向15°,倾角68°,滑动角144°;震源深度为12 km。双差定位结果显示,2016年以来无为地区发生的地震位于无为盆地西南边界,沿SE向分布,震中由NW向SE迁移。根据震源机制解和精定位结果推测,无为M L4.1地震的断层面解为节面I,地震可能是在区域背景应力场作用下由无为盆地西南边界底部的SE向断裂运动引起的。

细胞骨架蛋白4.1N与E-cadherin、β-catenin在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨胃癌组织、癌旁胃组织中细胞骨架蛋白4.1N与E-cadherin、β-catenin在胃癌转移扩散中的作用及三者间的相互关系。方法收集52例胃癌标本(腺癌)、30例距癌组织边缘10 cm以上的癌旁胃组织标本作为对照。应用免疫组织化学Elivision法检测这些组织中的细胞骨架蛋白4.1N与E-cadherin、β-catenin的蛋白表达情况。结果胃癌组织中细胞骨架蛋白4.1N、E-cadherin及β-catenin蛋白表达明显低于对照组(P<0.05);低分化胃癌组织中细胞骨架蛋白4.1N与E-cadherin、β-catenin的蛋白表达较高-中分化胃癌组织表达显著降低(P<0.05);细胞骨架蛋白4.1N与E-cadherin、β-catenin的蛋白在无淋巴结转移的胃癌组与有淋巴结转移的胃癌组间比较差异有统计学意义(P<0.05);细胞骨架蛋白4.1N与E-cadherin、β-catenin的蛋白在胃癌组织中的IOD值随着TNM分期的增高而降低,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05),细胞骨架蛋白4.1N与E-cadherin、β-catenin的蛋白的表达与胃癌患者的年龄、性别无关(P>0.05);细胞骨架蛋白4.1N与E-cadherin(r=0.381,P<0.05)、E-cadherin与β-catenin(r=0.571,P<0.05)、细胞骨架蛋白4.1N与β-catenin(r=0.602,P<0.05)之间均呈正相关关系。结论细胞骨架蛋白4.1N与E-cadherin、β-catenin在胃癌中的表达呈正相关,三者在胃癌发生发展中可能具有重要的协同作用。

食管小细胞癌组织中4.1蛋白家族的表达及意义

采用免疫组织化学方法检测食管小细胞癌以及癌旁组织中4.1蛋白家族的4个成员4.1B、4.1R、4.1N、4.1G表达水平。结果发现上述4种蛋白在食管小细胞癌组织中的阳性表达率极低,明显低于癌旁组织(P<0.01),且其表达情况与有无淋巴结转移均无相关性。认为4.1蛋白家族表达降低参与食管小细胞癌的发生,但不参与其转移过程。

蛋白4.1家族在不同乳腺癌细胞株中的表达与定位

背景与目的:目前,已在多种人类肿瘤中发现蛋白4.1家族成员表达异常。本研究旨在通过检测蛋白4.1家族成员(4.1R/B/G/N)在3株转移能力不同的人乳腺癌细胞株MCF-7、T-47D和MDA-MB-231中的表达和定位,探讨蛋白4.1家族成员与乳腺癌细胞转移能力之间的关系。方法:采用Westernblot检测蛋白4.1家族成员在MCF-7、T-47D和MDA-MB-231细胞中的表达;免疫荧光标记对蛋白4.1家族成员在3株细胞中的表达进行定位。结果:4.1R/B/G在3种细胞系中均有表达,在T-47D细胞中的表达量均明显高于在MCF-7细胞中的表达量(P<0.05);但在高转移性的MDA-MB-231细胞中它们的表达水平转而下降。4.1N在T-47D细胞中的表达量明显低于在MCF-7细胞中的表达量(P<0.01),而在MDA-MB-231细胞中的表达则几乎检测不到,提示4.1N表达下调或缺失与乳腺癌细胞转移能力密切相关。4.1R/B/G/N在MCF-7和T-47D细胞中均主要定位于细胞膜及胞间连接处,同时4.1B在细胞核中也有表达;而在高转移的MDA-MB-231细胞中蛋白4.1家族成员均定位于细胞质中,提示蛋白4.1家族成员亚细胞定位的改变可能是乳腺癌细胞转移过程中的重要事件。结论:4.1N表达缺失和蛋白4.1家族成员亚细胞定位的改变与乳腺癌细胞MDA-MB-231的高转移性密切相关。

TSLC1和DAL-1/4.1B在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨TSLC1和DAL-1/4.1B两种蛋白在胰腺癌中的表达和临床病理意义.方法:采用免疫组织化学S-P法检测42例胰腺癌组织、11例胰腺炎组织和9例正常胰腺组织中TSLC1和DAL-1/4.1B两种蛋白的表达.结果:TSLC1、DAL-1/4.1B蛋白在胰腺癌组织中的阳性表达率均明显低于在正常胰腺组织和胰腺炎组织中的表达(30.95%vs77.78%,81.82%;28.57% vs 66.67%,81.82%,P<0.05或0.01).TSLC1和DAL-1/4.1B蛋白的异常表达均与胰腺癌的分化程度、淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、部位和病理分型无关.在42例胰腺癌中TSLC1与DAL-1/4.1B蛋白表达呈显著正相关(rs=0.489,P<0.01).结论:胰腺癌中存在TSLC1和DAL-1/4.1B基因的失活和蛋白表达下调,二者可能通过TSLC1-DAL-1/4.1B级联反应共同参与胰腺癌的发生、发展和转移.

2018年安徽无为M_(L)4.1地震地下流体前兆异常特征

对2018年4月6日无为M_(L)4.1地震前的地下流体前兆异常特征以及该地震的震源机制解进行了分析,结果表明,无为地震前的异常分布在距震中64~233 km范围内,这些异常在时间进程上,可分为中期趋势背景异常和短临异常,主要以中期趋势背景异常为主。这些中期趋势背景异常均表现为水位的破年变变化。从空间演化上看,2018年安徽无为M_(L)4.1地震前出现的中期趋势背景异常沿着长江破碎带有序分布。这种比较明显的异常群体性特征为地震预测提供了较好的依据。震源机制解结果显示,节面I的走向为NE向,节面Ⅱ的走向NW向。反演的震源机制的P轴(主压轴)方向为NE向(70°),倾角近水平(7°)。无为地震震源机制解所得主压应力作用方向与无为地震前异常展布方向相同。这说明地震孕育过程中区域应力加载作用和流体前兆响应具有密切关系。

ASME PTC4.1—1964标准锅炉效率的问题探讨

介绍了ASME PTC4.1—1964标准中锅炉效率计算方法,对工程应用存在的普遍问题进行了分析讨论,改进了简化效率试验计算方法,为ASME PTC4.1—1964标准工程应用提出一些建议,以供参考。

养阴益气活血法对糖尿病大血管病变KK-Ay小鼠Epb 4.1基因超甲基化的抑制作用

目的探讨糖尿病大血管病变KK-Ay小鼠细胞膜骨架成分带4.1蛋白Epb4.1基因的表观遗传学变化,及使用中药(参芪复方)、西药(二甲双胍)分别干预后该基因甲基化修饰的改变,从而摸索Epb 4.1基因与糖尿病大血管病变发生发展之间的关联。方法 8周龄SPF级雄性自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠20只,随机分为空白组、模型组、参芪复方组、二甲双胍组。高脂饲料连续饲养8周,建立糖尿病大血管病变模型。造模后与中药参芪复方及西药二甲双胍分别干预参芪复方组和二甲双胍组,疗程均为6周。监测动物血糖、体重。第14周末处死全部动物,取腹主动脉做HE染色及TUNEL细胞凋亡检测;每组随机抽取1只小鼠胸主动脉做甲基化免疫共沉淀检测。结果第14周末,模型组小鼠血糖、体重及内皮细胞凋亡率显著高于空白组(P<0.01);HE染色可见胸主动脉血管内膜不光滑,内皮细胞肿胀,炎细胞浸润,内皮细胞轻度脱落。参芪复方组小鼠血糖、体重、内皮细胞凋亡率均较模型组明显降低(P<0.01),与二甲双胍组之间无明显差异(P>0.05)。模型组、参芪复方组、二甲双胍组的甲基化程度均高于空白组;其中模型组的甲基化程度又高于参芪复方组和二甲双胍组;而参芪复方组的甲基化程度低于二甲双胍组。其中参芪复方降低甲基化修饰的基因片段发生于更为关键的区域(CGI、CGI shore、TTR),而二甲双胍组则发生于内含子区域。各组间甲基化差异比较的P值均小于等于0.001。结论糖尿病大血管病变动物血管Epb 4.1基因的超甲基化程度与血管病变的严重程度呈正比。益气养阴活血法(参芪复方)对糖尿病大血管病变动物的降糖、减重作用与二甲双胍基本相当,对血管的保护作用在组织水平上与二甲双胍不相上下,而在基因水平上则较二甲双胍具有更好的降低Epb 4.1基因关键位点超甲基化修饰的作用。