抗肺炎衣原体42kDa蛋白种特异性单抗的制备及应用

目的 制备肺炎衣原体 (Cpn) 4 2kDa蛋白单克隆抗体并了解其在Cpn感染诊断中的应用价值。方法 采用纯化的Cpn 42kDa蛋白带制备出 2株特异性抗Cpn 42kDa蛋白单克隆抗体 ,用其中一株建立了检测Cpn的直接免疫荧光法 (DFA)。结果 2株能稳定分泌抗Cpn单抗的杂交瘤细胞株Ad6、Db1 均为IgG1 ,染色体数目为 90～ 1 0 2条 ,效价分别为 1∶32 768、1∶1 6 384(微量免疫荧光法 ,Micro -IFA)。将腹水 1∶1 0 0稀释 ,该单抗只与Cpn呈现阳性反应 ,与其他衣原体和呼吸道病原菌均无交叉反应。Westernblot证实单抗结合Cpn蛋白的分子量为 42kDa,且不与其他衣原体反应。建立的DFA对 1 2 0名呼吸道感染者的咽拭子、肺泡灌洗液、痰检测 ,其结果和PCR试剂盒检测结果经统计学处理 ,二者相关系数为 0 .9667,符合临床检测要求。结论 DFA灵敏、准确 ,可用于Cpn的检测。