桑葚花色苷的提取及对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453生长的抑制

目的以超声辅助乙醇浸提法提取桑葚花色苷,观察其对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453体内外生长的抑制作用。方法将桑葚冷冻干燥,冷冻干粉于常温下用70%乙醇以1∶15的料液比超声提取1 h,提取液采用AmberliteTMXAD7HP型大孔吸附树脂以1 ml/min的吸附流速和1 ml/min的洗脱流速在pH3.0酸性环境下纯化,得到桑葚花色苷提取物。利用CCK-8法检测不同浓度桑葚花色苷提取物(50、100、150、200 mg/ml)对人乳腺癌细胞MDA-MB-453增殖活力的影响;以24只雌性BALB/c裸鼠建立MDA-MB-453细胞移植瘤模型,随机分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,分别以0、50、100、200 mg/(kg.d)的桑葚花色苷提取物膳食干预,检测其对肿瘤生长的影响。结果获得花色苷含量为(41.8±4.8)%的桑葚花色苷提取物;CCK-8法检测发现桑葚花色苷提取物可显著降低乳腺癌细胞活力,并显示剂量-效应关系[50、100、150、200 mg/ml桑葚花色苷提取物处理组抑制率分别为(14.8±1.8)%、(29.8±2.2)%、(33.0±2.7)%、(44.3±3.8)%];体内实验发现,高剂量组和中剂量组移植瘤体积和质量均显著低于对照组[体积抑制率分别为(55.5±4.8)%、(39.3±3.2)%;质量抑制率分别为(51.6±4.2)%、(38.9±3.1)%],表明桑葚花色苷提取物膳食干预可有效抑制移植瘤的生长。结论桑葚花色苷提取物能够显著抑制人乳腺癌细胞株MDA-MB-453的生长。

三羟异黄酮与化疗药物联合作用对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453增殖的影响

目的观察三羟异黄酮（genistein,GEN）与紫杉醇（paclitaxel,PTX）或阿霉素（doxorubicin,DOX）联合作用对体外培养的HER2/neu高表达人乳腺癌细胞株MDA-MB -453增殖的作用,探讨三羟异黄酮和化疗药物的联合抗癌效应.方法 GEN和化疗药物PTX、DOX单独或联合处理体外培养的人乳腺癌细胞MDA-MB-453,MTT法测定细胞增殖抑制率并用联合用药公式分析合并效应,流式细胞仪分析细胞周期,形态学观察和Annexin-V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡.结果 GEN、PTX、DOX单独作用于乳腺癌MDA-MB-453细胞,均可抑制细胞增殖,引起细胞周期阻滞,并诱导细胞凋亡.10、20 μmol/L的GEN与DOX联合作用时,q值在0.85～1.15之间,二者的联合效应为相加效应;40 μmol/L的GEN与DOX联合作用时,q＞1.15,二者的联合效应为协同效应;而各剂量的GEN与PTX联合作用时,q＜0.85,二者的联合效应为拮抗作用.GEN（40 μmol/L）可增强DOX诱导MDA-MB-453细胞凋亡的作用,而削弱PTX诱导MDA-MB-453细胞凋亡的作用.结论 GEN能增加或协同DOX对MDA-MB-453细胞的抑制增殖作用,而拮抗PTX的抑制增殖作用.

染料木黄酮对MDA-MB-453乳腺癌细胞VEGF表达的影响

目的:观察染料木黄酮(genistein,Gen)对MDA-MB-453乳腺癌细胞血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响,探讨Gen抗HER-2/neu高表达乳腺癌血管生成的分子机制。方法:5×10-5mol/LGen处理MDA-MB-453细胞24、48、72h后,应用免疫组织化学、Westernblot及RT-PCR法检测MDA-MB-453乳腺癌细胞VEGF的表达变化。结果:Gen处理MDA-MB-453细胞24、48、72h后,VEGF的mRNA和蛋白表达量随着处理时间的延长逐渐下降。结论:Gen能在转录和翻译水平下调HER-2/neu高表达乳腺癌细胞VEGF的表达,这可能是Gen抑制HER-2/neu高表达乳腺癌血管生成的机制之一。

染料木黄酮对MDA-MB-453乳腺癌细胞uPA表达及PTK活性的影响研究

目的: 观察染料木黄酮(亦称三羟异黄酮,genistein,Gen)对MDA-MB-453乳腺癌细胞尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)表达及蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)活性的影响,探讨Gen抗HER-2/neu高表达乳腺癌血管生成的分子机制。方法: 5×10-5mol/L Gen处理MDA-MB-453细胞24、48、72 h后,应用Western blot、免疫沉淀、RT-PCR及激酶活性分析法检测Gen对MDA-MB-453乳腺癌细胞uPA表达、HER-2/neu受体蛋白磷酸化水平及PTK活性变化。结果: Gen处理MDA-MB-453细胞后,uPA的mRNA和蛋白表达量下调,HER-2/neu受体蛋白磷酸化水平降低,PTK活性下降,且这种作用具有时效性。结论: Gen能有效抑制乳腺癌细胞HER-2/neu受体的PTK活性和蛋白磷酸化水平,在转录和翻译水平下调uPA的表达,从而抑制HER-2/neu高表达乳腺癌血管生成。

染料木黄酮对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453、MCF-7、MCF-7/HER2增殖能力的影响

目的探讨染料木黄酮(Genistein)对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453(ER-,HER2-high)、MCF-7/HER2(ER+,HER2-high)、和MCF-7(ER+,HER2-low)增殖能力的影响,并观察HER2在染料木黄酮抑制肿瘤增殖中的作用。方法通过基因转染技术建立HER2/neu高表达的人乳腺癌MCF-7细胞,免疫荧光细胞化学法鉴定;不同浓度的Genistein分别处理3种乳腺癌细胞,MTT法分别检测Genistein对肿瘤细胞增殖能力的影响。结果Genistein对MDA-MB-453细胞的增殖抑制作用随处理浓度增加而增大,IC50约为100μmol/L;Genistein对MCF-7/HER2和MCF-7细胞在低浓度表现为增殖促进作用,分别在大于40μmol/L和10μmol/L时表现为增殖抑制作用。结论Genistein可通过ER依赖和非依赖两种途径,在一定浓度范围内抑制肿瘤细胞增殖,且HER2高表达能够降低染料木黄酮对ER+乳腺癌的增殖抑制作用。

染料木黄酮影响MDA-MB-453细胞对紫杉醇化疗敏感性的机制

目的:探讨染料木黄酮(genistein,GEN)影响紫杉醇(paclitaxel,PTX)体外化疗HER2/neu高表达人乳腺癌细胞株MDA-MB-453敏感性的作用机制。方法:GEN和PTX单独或联合处理MDA-MB–453细胞,流式细胞仪检测细胞周期分布,免疫细胞化学法检测HER2/neu蛋白、Westernblot检测Akt、p-Akt、CyclinB1、CDK1蛋白表达的变化。结果:GEN和PTX单独作用时MDA-MB-453细胞分别阻滞于G1/S期和G2/M期,HER2/neu、总Akt和CDK1蛋白水平均没有明显变化,但GEN可显著降低p-Akt和CyclinB1蛋白水平,而PTX则明显增加CyclinB1蛋白水平,二者联合处理时GEN拮抗PTX增加CyclinB1蛋白水平和诱导G2/M期阻滞的作用。结论:GEN拮抗PTX增加cyclin B1蛋白水平和G2/M期阻滞的作用,可能是其降低PTX体外化疗MDA-MB-453细胞敏感性的机制之一。

PI3K/Akt与染料木黄酮增敏阿霉素体外化疗人乳腺癌MDA-MB-453细胞的关系研究

目的观察染料木黄酮(GEN)对HER2/neu高表达人乳腺癌MDA-MB-453细胞PI3K/Akt信号途径的抑制作用,探讨其在GEN增敏阿霉素(DOX)体外化疗乳腺癌MDA-MB-453细胞中的作用。方法GEN、PI3K特异性抑制剂渥曼青霉素(WT)和DOX单独或联合处理体外培养的MDA-MB-453细胞,免疫细胞化学法检测HER-2/neu蛋白表达,免疫印迹法检测总Akt和磷酸化Akt蛋白(p-Akt)表达。结果GEN对MDA-MB-453细胞HER2/neu和总Akt蛋白没有明显影响,但可明显降低p-Akt蛋白水平;同时WT也能明显降低p-Akt蛋白,并显著增强DOX抑制MDA-MB-453细胞生长的作用。结论GEN增敏DOX体外化疗乳腺癌MDA-MB-453细胞株可能与其抑制PI3K/Akt信号途径有关。

TIMP-3基因真核表达载体的构建及其对乳腺癌MDA-MB-453细胞生长及侵袭的抑制作用

目的:构建组织基质金属蛋白酶抑制剂3(TIMP-3)真核表达载体并转染乳腺癌MDA-MB-453细胞,探讨TIMP-3对MDA-MB-453细胞生长及侵袭的抑制作用。方法:采用RT-PCR法从人新鲜胎盘组织中获得TIMP-3cDNA,连接至pMD18-T载体,EcoRⅠ、XbaⅠ双酶切pMD18-T-TIMP3重组质粒及pcDNA3.1载体并连接,构建pcDNA-TIMP-3真核载体,酶切鉴定、测序。将乳腺癌MDA-MB-453细胞分为正常对照组、pcDNA空载体组(只转染pcDNA空载体)和pcDNA-TIMP-3组(转染pcDNA-TIMP-3)。Western blotting法测定蛋白表达,采用MTT法和Boyden小室侵袭实验测定各组细胞的增殖活性及侵袭能力。结果:重组载体经过EcoRⅠ和XbaⅠ酶切后,产生633bp的TIMP-3目的片段和pcDNA 3.1线性化载体,经自动测序仪测定TIMP-3序列完全正确。转染重组载体后MDA-MB-453细胞稳定表达了TIMP-3,与正常对照组和pcDNA空载体组比较,pcDNA-TIMP-3组细胞增殖活性明显降低(P<0.05),穿透以Ⅰ型胶原(ColⅠ)、层黏连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(FN)和玻璃连接蛋白(VN)包被的Matrigel膜的侵袭细胞数明显减少(P<0.05)。结论:成功构建pcDNA3.1-TIMP-3真核表达载体,可在MDA-MB-453细胞中高表达TIMP-3蛋白,并对MDAMB-453细胞生长及侵袭性有抑制作用。

T453井三叠系石炭系地层安全钻井液密度窗口的确定

塔河油田三叠系、石炭系地层钻井过程中井壁垮塌严重,井径扩大率大,严重影响了钻井效率和固井质量。利用三叠系、石炭系地层岩心,进行了地应力与岩石力学参数室内试验研究,并根据试验结果标定了岩石力学测井解释的模型．根据S68井的测井资料分析了其坍塌压力、地层破裂压力,建立了安全钻井液密度窗口。根据研究成果,确定了T453井三开井段安全钻井液密度窗口,推荐了现场钻井作业的钻井液密度程序。现场试验表明,严格按照设计的钻井液密度程序施工可避免井壁垮塌、缩径导致的起下钻遇阻以及卡钻等井下复杂情况或事故。

SMF-453树脂富集氰化液中微量金银

就酸度曲线、吸附速度、吸附能力和吸附反应的活化能等几个方面分别对采用SMF - 45 3树脂吸附金银的机理进行了论述。结果表明 :SMF - 45 3树脂可以很强地吸附氰化物介质中的Au (CN) 2 -andAg (CN) 2 -络合离子。吸附在树脂上的金和银均易被 0 1mol/L的HCl和 3% (M/V)的硫脲溶液洗脱 ,回收率为 99%。

J453F型低压铸造机的技术改造

通过对J45 3F型低压铸造机抽芯机构、液面加压系统进行改进设计 ,使其功能增强 。

高职铁路信号基础设备维护课程的“453”构想与实践

本文以铁路信号基础设备维护课程为载体,按＂校企合作4平台、任务驱动5情境、岗学结合3项目＂的＂453＂构想进行课程设计和建设,在实践中形成了＂以岗定课、岗学相融、学训一体＂的课程特色。

1，25二羟基维生素D3对乳腺癌MDA－453细胞株凋亡的影响

目的 研究1，25二羟基维生素D3对乳腺癌细胞MDA－453细胞凋亡的影响。方法 选用MDA－453细胞株，用RPMI1640完全培养基调节成为一定细胞密度，实验组加入1，25－（OH）2D3，对照组加入等体积的PBS液，用流式细胞仪检测细胞凋亡，用液体闪烁检测仪检测细胞增殖。结果 在加入1，25二羟基维生素D3或PBS液进行细胞培养后6、12、18及24h，实验组细胞的凋亡率分别为3．2％、6．0％、8．5％和34．9％，而空白对照组凋亡率分别为1．1％、1．6％、2．6％、3．3％，实验组细胞的凋亡率明显高于空白对照组（P＜0．01）。1，25二羟基维生素D3对MDA－453细胞生长也有明显抑制作用（P＜0．01）。结论 1，25二羟基维生素D3可诱导乳腺癌细胞凋亡，并对乳腺癌细胞增殖有明显抑制作用。

Herceptin和9-顺式视黄酸对MDA-MB-453乳腺癌细胞协同抑制作用的研究

目的 探讨Herceptin和9-顺式视黄酸联合用药对MDA—MB-453乳腺癌细胞的协同抑制效应。方法用Herceptin、9-顺式视黄酸单独和联合处理MDA—MB-453细胞24～72h，用MTT法观察其对乳腺癌细胞的增殖抑制效应，通过流式细胞仪法检测乳腺癌细胞周期相的分布，用TUNEL法检测细胞凋亡的情况。结果 Herceptin和9-顺式视黄酸联合作用组较对照和单独作用组能够显著抑制HER2／neu阳性乳腺癌细胞的增殖活性，并将其细胞周期进程阻遏于G0／G1期，同时还能有效诱导其发生凋亡。结论 Herceptin和9-顺式视黄酸联合用药可有效协同抑制HER2／neu阳性乳腺癌细胞的增殖活性。

A453型系列粗纱机的技术改造

A453型系列粗纱机,包括A453本型、A453A、B、D型。这些设备一般役令不长,机械状态尚好,属于保留产品,只是其三上四下的牵伸型式,在牵伸过程中,对于纤维的控制能力,不如三罗拉双皮圈那样稳定和有效,因而适应不了当前纱线质量和品种发展的要求。但进行有针对性的技术改造后,仍可取得较好的纱线质量和经济效益。粗纱设备性能的提高和改善,对于改善纱线内在质量。

基于FPGA的ARINC708/453接口实现

以某型直升机的研制需求为出发点,用FPGA设计实现了ARINC708/453接口协议,采用自顶向下的设计方法设计ARINC453协议解码器,每帧数据包括同步头、有效数据和同步尾三部分。采用VHDL语言在FPGA上实现该解码器,使系统的功能高度集成,提高了系统的灵活性与兼容性。通过在Xilinx仿真环境下进行仿真验证,实验结果表明,该解码器能很好的解析传输过来的仿真数据,而且该解码器方式具有抗干扰能力强、传输速率高等优点。此设计已应用在型号项目中,能够正确、快速解析气象雷达数据。