Oct4假基因在肝癌中作用的研究进展

在21世纪,肿瘤死亡率极高,也将是人类面临的重大威胁。其中肝癌是较常见的恶性癌症,在世界范围内死亡率高。肝癌起病隐匿,患者确诊时多为肝癌中期或晚期阶段,治疗手段有限且效果不理想,因此肿瘤标志物的发现对于早期诊断有很大帮助。研究表明八聚体结合转录因子4(Oct4),在维持胚胎干细胞的多潜能和自我替换方面起着关键作用。

子宫内膜异位症不孕患者miR-145与Fascin-1、OCT4的相关性及临床意义

目的 研究子宫内膜异位症(EMs)不孕患者miR-145与Fascin-1、OCT4的相关性及临床意义。方法 选择2020年1月至2022年1月于重庆高新区第一人民医院行腹腔镜手术的100例EMs不孕患者作为研究组,留取异位子宫内膜组织;另取同期因宫腔粘连行宫腔镜手术的55例患者作为对照组,留取正常子宫内膜组织。检测两组以及EMs组中不同AFS分期患者内膜组织中miR-145、Fascin-1、OCT4的表达水平,分析EMs组中miR-145与Fascin-1、OCT4表达的相关性,随访EMs不孕患者术后1年的自然妊娠情况,比较EMs组中不同miR-145表达患者术后自然妊娠率。结果 EMs组子宫内膜组织中miR-145的表达水平及Fascin-1、OCT4的mRNA和蛋白表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);EMs组中AFSⅢ~Ⅳ期患者子宫内膜组织中miR-145的表达水平及Fascin-1、OCT4的mRNA和蛋白表达水平均高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05);EMs组患者子宫内膜组织中miR-145的表达水平与Fascin-1、OCT4的mRNA和蛋白表达水平均呈正相关(P<0.05);根据EMs组患者子宫内膜组织中miR-145表达水平的中位数分为miR-145高表达患者和低表达患者,miR-145高表达患者术后累积自然妊娠率低于miR-145低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 EMs不孕患者子宫内膜组织中miR-145表达增加与Fascin-1、Oct4表达增加及术后自然妊娠率降低有关。

异位高表达OCT4的人骨髓间充质干细胞对T淋巴细胞功能的影响

目的:探讨异位高表达OCT4的人骨髓间充质干细胞(MSC)在体外对T细胞增殖、活化及分泌功能的影响。方法:分离健康儿童外周血单个核细胞,使用Anti-CD3/CD28单克隆抗体体外激活T淋巴细胞,白介素(IL)2体外刺激培养的T细胞1周。建立异位高表达OCT4的MSC(MSC-OCT4)与活化T细胞的体外共培养体系,收集共培养1周后的上清液,流式细胞仪测定Th1/Th2细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α、γ干扰素)水平。收集共培养1周后的淋巴细胞,通过Countstar软件进行计数,用流式细胞仪测定T细胞及活化T细胞亚群的比例后,计算出绝对值,以均数±标准差表示。结果:与对照单独T细胞培养组相比,MSC及MSC-OCT4均能显著抑制CD3^(+)T细胞、CD3^(+)CD4^(+)T细胞和CD3^(+)CD8^(+)T细胞增殖。与MSC相比,MSC-OCT4能更好地抑制CD3^(+)CD8^(+)T细胞增殖(P=0.049),且主要抑制早期T细胞活化。与对照单独T细胞培养组相比,MSC及MSC-OCT4均能显著下调细胞因子IL-2和γ干扰素水平。与T细胞共培养1周后,MSC与MSC-OCT4组细胞因子IL-6水平显著增加。与对照MSC组相比,MSC-OCT4组在共培养1周后活细胞数更高(P=0.019),且能耐受更高浓度丝裂霉素C的抑制增殖作用。结论:MSC及MSC-OCT4在体外均能抑制IL-2刺激的T细胞增殖及活化,过表达OCT4后MSC能更强地抑制CD3^(+)CD8^(+)T细胞增殖,且具有更好的体外增殖能力,可能具有更好更持久地调节Th1/Th2造血因子平衡的作用。

肺金生方对肺癌干细胞自我更新的抑制作用及其机制研究

目的:检测肺金生方对肺癌干细胞自我更新的抑制作用,并探究其可能的分子机制。方法:采用无血清培养法从人源A549肺癌细胞中诱导肺癌干细胞,建立肺癌干细胞体外培养体系;通过球落形成实验检测肺金生方对肺癌干细胞自我更新的作用;同时,检测肺金生方对肺癌干细胞相关分子造血干细胞抗原CD133、转录因子SOX2、八聚体结合转录因子4(OCT4)及Notch信号通路关键分子Notch1、Jagged1表达的影响。结果:无血清培养法培养的肺癌干细胞成球落状生长,肺癌干细胞表面标志物CD133及干细胞核转录因子SOX2、OCT4的表达增加,表明本研究成功建立了肺癌干细胞体外培养体系。肺金生方可显著减少肺癌干细胞的球落形成数量及体积。与对照组相比,肺金生方可显著抑制肺癌干细胞相关分子CD133、SOX2、OCT4及Notch信号通路关键分子Notch1、Jagged1的表达。结论:肺金生方可抑制肺癌干细胞自我更新,其作用机制可能与抑制Notch1信号通路相关分子有关。

miR-145通过下调OCT4基因抑制肺腺癌干细胞增殖

背景与目的 miR-145是通过miRNA芯片及qPCR验证筛选出的一种潜在肺癌"保护性"miRNA。本研究旨在探讨miR-145与肺癌干细胞之间的关系及分子机制。方法 miRNA芯片对肺腺癌患者瘤旁和正常组织进行表达谱分析;生物信息学软件预测miR-145潜在的靶基因;脂质体2000介导转染miR-145模拟物和阻遏物进入A549细胞株;实时定量PCR检测miR-145表达水平;Western blot检测OCT4蛋白水平;双荧光素酶报告基因验证miR-145是否作用于OCT4mRNA的3'UTR区预测靶位;细胞增殖实验检测miR-145对于A549细胞生长的作用;流式细胞术检测干细胞表型CD133+的表达。结果在肺腺癌组织中miR-145表达明显低于瘤旁正常组织;miRanda软件预测OCT4是miR-145潜在靶基因;与对照组相比,miR-145模拟物组和阻遏物组miR-145表达分别明显上调和下调;miR-145对A549细胞的生长有双向调节作用,过表达miR-145抑制细胞生长;过表达miR-145可明显降低OCT4蛋白水平及干细胞表型CD133百分比,而抑制miR-145表达则明显增加OCT4蛋白水平及CD133百分比。双荧光素酶报告基因检测证明miR-145可作用于OCT4mRNA的3'UTR区预测靶位。结论 miR-145可通过下调OCT4基因表达抑制A549肺腺癌细胞株中干细胞的增殖,是一种潜在的肺癌"保护性"miRNA。

肺腺癌组织中OCT4表达与患者临床指标及预后的相关性

背景与目的肺腺癌发病率不断升高,而OCT4是调控干细胞自我更新的关键基因,在癌干细胞的增殖分化过程中起重要调节作用。本研究目的为检测肺腺癌组织中OCT4表达,并分析其与肺腺癌患者转移、化疗疗效及预后的相关性。方法采用免疫荧光方法检测肺腺癌组织OCT4表达。卡方检验OCT4表达与临床病理指标的关系,Kaplan-Meier生存曲线计算生存率,采用Cox分析评估各指标与患者生存之间的关系。结果 126例肺腺癌组织中,91例可观察到OCT4阳性细胞。OCT4表达与肺腺癌患者转移及化疗耐药密切相关,且与患者无病生存期和生存期呈明显负相关。结论 OCT4表达与肺腺癌患者的转移及化疗耐药相关,提示预后不良。

OCT4在膀胱癌中的表达及其临床意义

目的检测干细胞标记物OCT4在膀胱癌中的表达,并探讨其与临床病理因素及肿瘤转移的相关性。方法采用Westernblotting、qRT-PCR检测OCT4在5种膀胱癌细胞株及人膀胱上皮永生化细胞株SV-HUC-1中的表达情况;同时收集46例患者膀胱癌根治手术切除的膀胱癌组织标本,应用免疫组织化学方法检测OCT4蛋白的表达。结果 OCT4在人类膀胱癌细胞株RT-4、Tcc-Sup、KK47、T24、5637中均有表达,而在人膀胱永生化细胞株中无表达。OCT4在膀胱癌组织中的表达率为76.1%,在正常膀胱组织中无表达。其异性染色定位于肿瘤细胞核内;膀胱癌组织OCT4蛋白阳性表达率显著高于正常组织(P<0.05);膀胱癌组织中的OCT4蛋白的表达与肿瘤病理分级呈正相关(P<0.05),与膀胱癌的浸润深度无相关性(P>0.05);与肿瘤转移呈正相关(P<0.05);与年龄、性别、TNM分期无明显相关性。OCT4阳性膀胱癌患者及阴性患者的3年总生存率分别为42.2%和76.7%,无转移生存率分别为35.4%和59.2%,结果均有统计学意义。结论膀胱癌组织中OCT4蛋白的表达与肿瘤分化程度及转移相关,对膀胱癌的早期诊断和预后分析有显著意义。

Oct4基因在宫颈癌中的表达及其意义

目的研究胚胎特异性基因Oct4在宫颈癌中的表达及其在宫颈癌发生发展中的作用。方法通过RT-PCR、免疫组织化学等方法检测Oct4基因在宫颈癌组织、宫颈癌细胞系以及原代宫颈癌肿瘤球细胞中的表达状况。结果①Oct4 mRNA在宫颈癌组织中的表达率为73.3%(22/30),显著高于正常宫颈组织中的表达率25.0%(3/12),P<0.01;②Oct4蛋白在宫颈癌组织中表达率为53.7%(22/41),显著高于正常宫颈组织中的表达率7.7%(1/13),P<0.01;③Oct4蛋白在宫颈癌细胞系Si Ha、HeLa、Caski和C33A中表达;④Oct4蛋白的表达随着宫颈癌肿瘤细胞的分化而降低。结论Oct4基因在宫颈癌中的表达增加,可能与宫颈癌干细胞有密切的关系,这还有待于进一步的研究。

MicroRNAs与OCT4基因之间的相互作用

OCT4基因是POU转录因子家族中的一员,它能与含八聚体基序(ATGCAAAT)的DNA结合。OCT4是一个关键的转录因子,在未分化胚胎干细胞中参与维持多能性和自我更新性,在许多种癌症包括肺癌、生殖细胞肿瘤、乳腺癌、宫颈癌、前列腺癌、胃癌、肝癌和卵巢癌中过表达。Micro RNAs(mi RNAs)是一种小的非编码RNA,通过和靶基因m RNA碱基配对来调控m RNA表达,降解m RNA或阻碍蛋白合成。一些mi RNAs被证实在癌细胞中调控干细胞因子如OCT4、NANOG、SOX2和KLF4,进而调控癌细胞的增殖、凋亡、分化、抗药性和免疫性。

干细胞转录因子SOX2和OCT4在喉癌中的表达及与预后的关系

目的:探讨喉癌组织中干细胞转录因子SOX2和OCT4的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法:构建69例喉癌组织及20例癌旁正常组织芯片,应用免疫组织化学法检测喉癌组织及癌旁正常组织中SOX2和OCT4蛋白表达。结果:SOX2和OCT4蛋白在喉癌组织中的阳性表达率高于癌旁正常组织(P<0.05)。SOX2蛋白表达与喉癌T分期、临床分期和淋巴结转移有关(P<0.01);OCT4蛋白表达与喉癌分化程度有关(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析结果显示,SOX2阳性表达患者的生存率明显低于阴性表达患者(P<0.01);OCT4阳性表达患者的生存率与阴性表达患者比较,差异无统计学意义。COX回归分析显示,SOX2是危险因子,其表达越高,患者预后越差(P<0.01)。结论:SOX2与喉癌的浸润、转移有关,可能是影响预后的独立危险因素。

OCT4在肝细胞癌中的表达及其临床意义

背景与目的:近年关于肝癌干细胞问题备受关注,已发现部分干细胞标志物在肝细胞癌中表达并与预后有关,其中OCT4基因是POU转录因子的重要组员,是维持胚胎干细胞自我更新能力和分化潜能的关键因子。本研究旨在检测OCT4A在肝细胞癌中的表达情况,并探讨其与病理因素和预后的关系。方法:用半定量RT-PCR检测5株人肝癌细胞系和1株永生化肝细胞系,以及107例肝细胞癌组织、相应的癌旁肝组织和20例正常无肝硬化肝组织中OCT4A mRNA的表达,并结合肝癌临床病理因素及预后进行分析。结果:OCT4A mRNA在人肝癌细胞系SMMC-7721、BEL-7402、Hep-G2、MHCC-97L、MHCC-97H中均表达,而在永生化肝细胞系L-02中无表达。OCT4A mRNA在肝癌组织中表达率为72.0%,明显高于癌旁肝组织的30.8%(P<0.001),在正常无肝硬化肝组织中无表达。肝癌组织中OCT4A mRNA的表达与肿瘤大小、血管侵犯及TNM分期有关(P<0.05)。OCT4A mRNA阳性肝癌患者及阴性患者的3年总生存率分别为48.0%和83.7%,3年无瘤生存率分别为34.1%和58.0%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:OCT4A mRNA在肝癌细胞及肝癌组织中高表达,可能在肝癌发生发展中发挥重要作用,可以作为肝癌临床预后的一个重要参考指标。

Oct4B1在结直肠癌干细胞中的表达及意义

目的:探讨胚胎干细胞转录因子Oct4的亚型Oct4B1在结直肠癌干细胞中的表达及其可能的作用。方法:以结直肠癌细胞株SW480细胞采用悬浮培养法培养出的3D微球体及其亲本细胞SW480为研究对象,采用细胞分化实验、细胞软琼脂克隆实验、流式细胞技术检测干细胞标记物CD133、CD44的表达以验证3D微球体是否富集肿瘤干细胞(CSCs),实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测两种细胞Oct4B1 mRNA表达水平。结果:3D微球体具有分化为普通肿瘤细胞的能力,相对于亲本细胞,3D微球体体外克隆形成能力明显增强(P<0.01),干细胞标记物CD133、CD44明显高表达(P<0.01),Oct4B1 mRNA表达水平明显增高(P<0.01)。结论:干细胞调控因子Oct4的亚型Oct4B1在富集结直肠癌CSCs的3D微球体中表达明显增高,其可能参与结直肠癌CSCs的调控。

大肠癌细胞中Oct4与CD133的表达及意义

目的探讨大肠癌细胞中转录因子Oct4及干细胞标志物CD133抗原的表达情况及相关意义。方法采取术后大肠癌石蜡包埋的组织标本30例,应用免疫组化的方法分别检测癌组织及癌灶外邻近正常组织中Oct4及CD133抗原的表达情况。结果其中83.3%(25/30)的癌细胞标本中检测到Oct4+细胞,73.3%(22/30)检测到CD133+细胞。而且标本中CD133+细胞的比例与Oct4+细胞的比例呈正相关(r=0.586,P<0.05)。癌灶外邻近正常组织中检测到CD133+细胞与Oct4+细胞均显著少于癌组织(P<0.01)。结论大肠癌细胞中均有Oct4与CD133的表达,两者呈现正相关性,提示两者间可能存在相互调节的机制,其关系及相关意义有待进一步研究。

人脑胶质瘤组织中Oct4、Wnt2的表达及其临床意义

目的:探讨Oct4和Wnt2在人脑胶质瘤组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:选取临床及病理资料完整的长江大学附属第一医院2006-2009年手术切除并经病理证实为胶质瘤的石蜡标本56例,采用免疫组织化学方法检测56例胶质瘤组织(其中15例为术后复发)和10例脑外伤行内减压术切除的脑组织标本Oct4、Wnt2的表达。结果:正常脑组织中Oct4表达均为阴性,Wnt2表达仅1例呈弱阳性;56例胶质瘤组织中Oct4阳性34例(60.7%),Wnt2阳性40例(71.4%)。Oct4、Wnt2在低度恶性胶质瘤组中和高度恶性胶质瘤中的阳性率分别为46.2%和73.3%(P<0.05)及57.7%和83.3%(P<0.05),Oct4在复发肿瘤和初诊肿瘤中的阳性率分别为86.7%和51.2%(P<0.05)。人脑胶质瘤组织中Oct4和Wnt2表达呈正相关(r=0.537,P<0.01)。结论:Oct4、Wnt2的表达与人脑胶质瘤的恶性程度相关,Oct4的表达与胶质瘤的复发相关;Oct4可能是通过Wnt通路而参与了胶质瘤的发生、发展。

转录因子Oct4、Sox2在人肺癌中的表达及其临床意义

目的观察干细胞关键转录因子Oct4和Sox2在肺癌中的表达,探讨Oct4和Sox2的表达与肺癌病理分级和临床分期的关系。方法分别用免疫组织化学检测132例肺癌组织、42例癌旁组织及34例正常肺组织病理标本中的Oct4和Sox2表达。结果免疫组织化学显示Oct4和Sox2在肺癌组织的表达高于癌旁组织和正常肺组织,随着病理分级的升高和淋巴结转移的出现,Oct4和Sox2表达水平逐渐升高,各组间差异有统计学意义(P<0.05),但不同分期的肺癌组织中Oct4表达差异有统计学意义(P<0.05);Oct4或Sox2阳性与肺癌恶性表型明显相关,经过单因素及多因素分析发现Oct4或Sox2是肺癌预后的独立因素,Oct4和Sox2均阳性的患者预后最差。结论 Oct4和Sox2的表达与肺癌的分级和淋巴结转移密切相关亦与临床分期有关,Oct4的过高表达可能在肺癌的发生发展中起重要作用,Oct4和Sox2可以作为预测肺癌预后的新的分子标记。

非小细胞肺癌组织中转录因子Oct4、Sox2的表达变化及意义

目的观察非小细胞肺癌组织中转录因子Sox2和Oct4的表达变化,并探讨其意义。方法选取非小细胞肺癌患者45例和肺部良性病变患者30例,采用免疫组化法和RT-PCR法检测Sox2、Oct4蛋白在两种不同组织中的表达,分析非小细胞肺癌组织中Sox2、Oct4蛋白表达与临床病理参数的关系。结果 Sox2、Oct4在30例肺部良性病变组织中表达均为阴性。45例非小细胞肺癌组织中Sox2蛋白阳性24例,阳性表达率为51.1%;Oct4蛋白阳性33例,阳性表达率为73.3%。Sox2、Oct4蛋白水平随分化程度的增高而降低,随TNM分期的增高而升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。Sox2与Oct4在肺癌组织中的表达无相关性(P>0.05)。Sox2、Oct4均阳性表达者远处转移发生率明显高于阴性表达者(P<0.05)。结论非小细胞肺癌组织中Sox2与Oct4表达升高,并与肿瘤分期、分化程度密切相关;二者可能参与了非小细胞肺癌的发生发展。

不同分子亚型乳腺浸润性导管癌组织中Sox2和Oct4蛋白的表达

目的:探讨不同分子亚型乳腺浸润性导管癌组织中Sox2与Oct4蛋白的表达及意义。方法:根据癌组织ER、PR、HER-2的表达情况将120例乳腺浸润性导管癌分型为LuminalA45例、LuminalB29例、HER-2过表达27例和Basal-like19例。采用免疫组化SP法检测不同分子亚型乳腺浸润性导管癌组织中Sox2与Oct4蛋白的表达。结果:4种分子亚型乳腺浸润性导管癌组织中Sox2与Oct4蛋白的表达比较,差异有统计学意义(H=27.688和50.737,P<0.001);Basal-like型乳腺浸润性导管癌组织中Sox2与Oct4蛋白的表达高于其他3种类型,LuminalA型低于其他3种类型(P<0.05)。乳腺浸润性导管癌组织中Oct4与Sox2的表达相关(rS=0.506,P<0.001)。结论:肿瘤干细胞标志物Sox2与Oct4蛋白的表达可能与乳腺浸润性导管癌的生物学行为密切相关。

肿瘤干细胞标志物CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的研究肿瘤干细胞标记物CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义,为探索非小细胞肺癌肿瘤干细胞提供参考。方法采用免疫组织化学方法检测70例NSCLC组织、14例非癌组织中的CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1蛋白的表达并对结果进行分析。结果 (1)CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在70例NSCLC组织中的阳性表达率分别为88.57%、98.57%、100%、100%、100%,强阳性表达率分别为48.57%、67.14%、67.14%、31.43%、50%;CD133、C C D 4 4在N S C L C与非癌组织中的表达差异存在统计学意义(P均<0.0001),SOX2、OCT4、ALDH1在NSCLC与非癌组织中的表达差异无统计学意义(P均>0.05)。(2)随着病理级别的升高,CD133、CD44、SOX2、OCT4及ALDH1的表达呈上升趋势,分化越低的NSCLC表达上述指标的概率越高,其中CD133、SOX2、OCT4的表达在高、中、低分化组织中差异存在统计学意义(P值分别为0.001、0.040、<0.0001);CD133的表达在吸烟史、分化程度、淋巴结转移、肿瘤分期四个因素上差异存在统计学意义(P值分别为0.033、0.001、0.033、0.046);CD44与SOX2的表达在年龄上的差异存在统计学意义(P值分别为0.001、0.040)。结论 NSCLC组织中CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1阳性率高,CD133、CD44的表达明显高于非癌组织;CD133、SOX2、OCT4与NSCLC的恶性程度有关;CD44与SOX2与年龄因素有关。