维生素E琥珀酸酯联合5-氟尿嘧啶和5′-脱氧氟脲苷促进人结肠癌细胞凋亡

目的探讨维生素E琥珀酸酯(VES)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)和5′-脱氧氟脲苷(5′-DFUR)对人结肠癌细胞株LS174T凋亡的影响。方法 LS174T细胞常规培养,分6组(0,20μmol/L VES,1μmol/L 5-FU,2μmol/L 5′-DFUR,20μmol/L VES+1μmol/L 5-FU,20μmol/L VES+2μmol/L 5′-DFUR),处理24 h,倒置显微镜观察细胞形态,MTS法检测细胞的增殖情况;Western blot法检测细胞bid、bax、bcl-2蛋白的表达情况;流式细胞仪技术检测细胞凋亡情况。结果 VES分别与5-FU、5′-DFUR联合能够抑制人结肠癌细胞的增殖,增强bid、bax蛋白的表达,降低bcl-2蛋白的表达,促进细胞发生凋亡。结论 VES分别与5-FU、5′-DFUR联合作用时能抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,其中VES+5′-DFUR联合作用效果最为显著。这可能与细胞中促凋亡蛋白bid、bax表达的增加、抗凋亡蛋白bcl-2表达的降低有关。

5'-脱氧氟尿苷和5-氟尿嘧啶对6株大肠癌细胞的抑制作用

目的:测定大肠癌细胞的胸苷磷酸化酶(dThdPase)蛋白含量,探讨dThdPase与5’-脱氧氟尿苷(5’-DFUR)、5-氟尿嘧啶(5-FU)对大肠癌细胞的生长抑制作用的相互关系。方法:采用ELISA法对6株大肠癌细胞系LS174T、CloneA、Col0320、CX-1、Lovo和MIP101进行dThdPase蛋白定量分析,然后进行5’-DFUR、5-FU对6株大肠癌细胞的生长抑制实验。把大肠癌细胞分别接种于96孔培养板的每孔中培养24 h,分别加入2倍梯度稀释的5’-DFUR和5-FU.继续培养96 h后应用MTT分析分别测定5’-DFUR和5-FU对6株大肠癌细胞的半数有效剂量(IC50)。结果:除LS174T检出0.5 u/mg、Lovo检出8.9 u/mg的dThdPase蛋白外,其它4株癌细胞未检出。6株大肠癌细胞均对5-FU高度敏感,其半数有效浓度(IC50)分别为1.52～13.68μmol/L,而5’-DFUR对6株大肠癌细胞的IC50则分别为68.71～528.15μmoL/L,是5-FU的15倍-94倍,差异有显著性(P<0.01)。结论:6株大肠癌细胞很少有dThadPase蛋白表达;每一株大肠癌细胞对5’-DFUR的敏感性均明显低于5-FU。

Apoptosis induced by preoperative oral 5′-DFUR administration in gastric adenocarcinoma and its mechanism of action

瞄准：为了学习， apoptosis 在胃的腺癌和它行动的机制由外科手术前的口头的 5'-DFUR 管理导致了。方法：六十个胃的癌症病人在手术前随机被划分成三个组(20 每组) ：在为 3 的 800-1200 mg/d 的剂量的组 one:5'-DFUR 口服 - 5 d，组织二：500 mg 5-FU + 200 mg/d CF 由静脉为 3 滴下 - 5 d，组三(控制组) 。在化疗以后的一或二天，病人被操作。Fas/FasL， PD-ECGF 和 PCNA 被免疫组织化学检验， apoptotic 肿瘤房间被原位 TUNEL 方法检测。54 个病人收到了胃切除术，包括 12 辩解的切除术和 42 激进的切除术。六个病人被排除。最后，在 5'-DFUR 组，在 CF+5-FU 组的 16 个盒子，和在控制组的 20 个盒子的 18 个盒子被分析。结果：在耐心的吝啬的年龄没有有效差量，性，白血房间计数， haematoglobin (HB ) ，凝血致活酶，在三之中的复杂并发症发生，基或减轻切除术，侵略深度(T) ， lymphonode 参与(N) ，转移(M) 和 TNM 阶段组织的起作用的仙子。然而， PCNA 索引(PI ) 在 5'-DFUR，组(40.51+/-12.62 ) 和 5-FU+CF 组(41.12+/-15.26 ) 在控制组(58.33+/-15.69 ) 是比那显著地低的(F=9.083， P=0.000 ) 。在 5'-DFUR 组(14.39+/-9.49 ) 和 5-FU+CF 组(14.11+/-9.68 ) 的 apoptotic 索引(AI ) 在控制组(6.88+/-7.37 ) 比那显著地高(F=4.409， P=0.017 ) 。船边交货和 FasL 在的表示率组一和组三是 66.7%(12/18 ) 并且 50%(9/18 ) ， 43.8%(7/16 ) 并且 81.3%(13/16 ) ， 45.0%(9/20 ) 并且 85%(17/20 ) 分别地。在 5'-DFUR 组的 FasL 的表示率在另外的二个组是比那显著地低的(chi2=6.708， P=0.035 ) 。同时， PD-ECGF 的表示率比在 CF+5-FU 组(9/16,56.3%) 和控制组(13/20,65.0%) 在 5'-DFUR 组(4/18,28.6%) 是显著地更低的(chi2=7.542， P=0.023 ) 。船边交货表示的频率显著地与辩解或激进的切除术被相关(chi2=7.651， P=0.006 ) ，侵略深度(chi2=8.927， P=0.003 ) ，淋巴的传播(chi2=4.488， P=0.034 ) 并且 UICC 阶段(chi2=8.063， P=0.045 ) 分别地。在 3 月 2005,45 日底，病人们被跟随起来。0.5- ， 1- ， 2- ，分别地， 3 年的幸存率是 96%,73%,60%,48% 它与 T， N， M 和船边交货表示，然而并非与 PD-ECGF 和 FasL 表示是相关的。结论：外科手术前的口头的 5'-DFUR 管理可以导致胃的癌房间和减少肿瘤房间增长索引的 apoptosis，但是不能与 FasL 和 PD-ECGF 表示的胃的 cancer.Down 规定改进病人的预后由 5'-DFUR 调停了可以是它的反癌症机制之一。有胃的癌的前进的船边交货表示相互关联并且可以是一个有效预示的因素。

去氧氟尿苷及其代谢物在肿瘤病人体内药代动力学研究

目的:主要研究了去氧氟尿苷(5’－deoxy－5－fluridine)及其主要代谢物5－氟尿嘧啶在肿瘤病人体内的药代动力学特征。方法:肿瘤病人口服800mg去氧氟尿苷胶囊,采用高效液相色谱法(HPLC)分别测定肿瘤病人体内中的去氧氟尿苷和其主要代谢物5－氟尿嘧啶的血药浓度。结果:肿瘤病人体内去氧氟尿苷的血药浓度－时间曲线下面积AUC0-∞为:6.45±1.71mg·h·L-1末端相消除半衰期t(1/2)为:0.65±0.23h,峰时间和峰浓度分别为:1.00±0.37h和5.11±1.36mg·L-1。5－氟尿嘧啶的血药浓度－时间曲线下面积AUC0-∞为:222.7±86.3μg·h·L-1,末段消除相的半衰期t(1/2)为:0.65±0.50h,峰时间tmax和峰浓度Cmax分别为的0.93±0.26h和199.11±89.14μg·L-1。比较不同肿瘤病人的药动学参数,胃癌病人对去氧氟尿苷的吸收与肝癌和结肠癌病人有差异,去氧氟尿苷在不同肿瘤病人体内代谢成5－氟尿嘧啶未见明显差异。结论:去氧氟尿苷在三种肿瘤病人体内的吸收可能有差异,其主要药代动力学特征没见明显改变。

脱氧氟尿苷在食管癌化疗中的高选择性抗肿瘤作用研究

目的:(1)了解脱氧氟尿苷(5-deoxy-5-fluorouridine,5-DFUR)在食管癌组织中转化为5-FU的情况及其高选择性抗肿瘤作用。方法:(1)选择拟行手术治疗的17例食管癌患者,术前5～7天口服5～DFUR1200mg/人/天后再行手术;(2)用柱切换反相高效液相色谱法检测食管癌组织、转移淋巴结、远癌正常食管组织及肝脏组织的5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)浓度。结果:(1)在同一时点食管癌患者各组织的5-FU浓度分别是:癌组织214.18±92.53ng/g、转移淋巴结147.50±71.86ng/g、远癌食管组织50.67±20.24ng/g、肝脏组织17.80±9.09ng/g,P值<0.05。(2)不同分化程度的癌组织中5-FU浓度分别为:高分化鳞癌184.27±92.18ng/g、中分化鳞癌214.53±82.43ng/g、低分化鳞癌412.18±192.53ng/g,P值=0.024。(3)不同分期食管癌组织中的5-FU浓度为:Ⅱ期212.38±92.63ng/g,Ⅲ期247.50±91.99ng/g,P值=0.098。结论:5-DFUR能够高选择地在食管癌组织中转化为5-FU。不同分化程度的食管癌组织对5-DFUR的转化能力不同,分化能力愈低,转化为5-FU的能力愈强。

术前希罗达化疗对大肠癌组织TP/PD-ECGF表达和血管生成的影响

目的研究术前希罗达化疗对大肠癌胸苷磷酸化酶血小板衍化内皮细胞生长因子(TP/PD-ECGF)和肿瘤组织微血管密度(MVD)的影响。方法对30例术前应用希罗达化疗的大肠癌和30例术前未化疗的大肠癌组织,采用免疫组织化学检测TP/PD-ECGF表达及微血管密度。结果术前化疗组TP PD ECGF表达阳性率为35.0%,对照组为63.0%;化疗组和对照组MVD值分别为37.4±18.0和65.8±12.5,差异有显著性。结论术前化疗能使TP PD ECGF活性降低,从而抑制大肠癌的肿瘤血管生成。

氟铁龙治疗晚期恶性肿瘤的临床观察

目的:观察氟铁龙治疗晚期恶性肿瘤的疗效及毒副反应。方法:将46例晚期恶性肿瘤病人分为两组:甲组15例,均为手术后患者,用氟铁龙口服或加用DDP进行联合化疗6周期;乙组31例,为术后复发或晚期失去手术指征者,与甲组用相同的方法进行治疗。结果:甲组在近期内未发现复发病例;两组按WHO癌治疗客观效果评定标准,总有效率(CR+PR)为48.4％(15/31),两组毒副反应均表现仅有轻度消化道反应、白细胞下降及脱发。结论:虽观察病例较少,时间较短,但证明氟铁龙在晚期恶性肿瘤的治疗中疗效肯定,毒副作用轻微,深受病人欢迎。

脱氧氟尿苷术前口服化疗对胃癌组织PD-ECGF表达的影响及意义

[目的]了解术前脱氧氟尿苷口服化疗对胃癌组织血小板衍化内皮细胞生长因子(PD-ECGF)表达的影响及意义。[方法]胃癌患者术前随机分为三组:组1:氟铁龙800mg/d～1200mg/d,3～5天;组2:5-Fu0.5+CF200mg/d静脉滴注,3～5天;组3:对照组。化疗结束后第1～2天行手术。切除标本采用免疫组化法及TUNEL法检测胃癌组织中PD-ECGF表达率及细胞凋亡指数(AI)。[结果]全组PD-ECGF阳性率为51.9%。PD-ECGF表达率与根治切除、肿瘤侵犯深度、淋巴结转移、有无远处转移及UICC分期无关(P>0.05)。组1中PD-ECGF表达率(28.6%,4/18)明显低于组2(56.3%,9/16)及对照组(65.0%,13/20)(P=0.023)。AI在组1为14.39±9.49,组2为14.11±9.68,明显高于对照组(6.88±7.37)。在PD-ECGF阳性组中肿瘤细胞凋亡指数(8.12±5.19)明显低于阴性组(14.69±11.23),差异有显著性(F=7.409,P=0.009)。随访截止至2006年12月31日,50例获得随访,总的1、2、3、5年生存率分别为78.0%、58.8%、48.7%、48.7%。PD-ECGF阳性患者1、2、3、5年生存率分别为76.0%、56.0%、47.7%、47.7%;低于阴性组的80.0%、60.0%、52.0%、52.0%,但差异无显著性(χ2=0.177,P=0.674)。[结论]术前脱氧氟尿苷口服化疗可降低胃癌组织中PD-ECGF表达率。PD-ECGF阳性表达患者的肿瘤细胞凋亡指数低于阴性组,倾向预后不良。

术前服去氧氟尿苷对胃癌细胞凋亡和增殖影响

目的 观察术前口服去氧氟尿苷对胃癌细胞凋亡和增殖的影响。方法 采用DNA转移酶dUTP缺口末端标记法 (TUNEL)和增殖细胞核抗原 (PCNA)免疫组织化学染色法 ,观察胃癌患者 (术前化疗实验组和末化疗对照组 ,各n =30 )术后标本的凋亡指数及增殖指数的差异。结果 实验组肿瘤细胞凋亡指数 (3 .68± 1 .2 3) % ,对照组 (1 .1 4± 0 .45) % ,差异具有显著性 (P <0 .0 1 ) ;实验组肿瘤细胞增殖指数 (38.1 3± 8.53) % ,对照组 (47.88± 8.2 8) % ,差异具有显著性 (P <0 .0 1 )。结论 术前口服去氧氟尿苷可以诱导胃癌细胞凋亡 ,有利于胃癌的治疗。

胶滴肿瘤药敏检测技术评价卡培他滨对胃癌体外药敏实验的条件探索

目的采用胶滴肿瘤药敏检测技术(CD-DST)研究在胃癌术后辅助化疗中卡培他滨(CAP)药敏检测的实验条件。方法由于CAP在体外无法由肿瘤细胞直接代谢,本研究采用其代谢产物5'-脱氧-5-氟尿苷(5'-DFUR)评价CAP的药敏检测条件,对5'-DFUR的CD-DST实验条件进行探索。将31例实验组新鲜胃癌组织标本进行CD-DST检测,以未用药物处理组作为对照,分别以1μg/ml奥沙利铂(L-OHP)、0.03μg/ml伊立替康(CPT-11)和5'-DFUR(浓度为3、5、10μg/ml)进行处理,评价其体外有效率(IVS)与临床有效率的一致性,另将34例验证组新鲜胃癌组织标本进行验证。结果5μg/ml的5'-DFUR处理组的高敏感IVS为31%,与研究报道的CAP临床有效率约为30%一致。采用5μg/ml的5'-DFUR对另外34例胃癌标本进行验证,验证组中5'-DFUR(5μg/ml)处理组高敏感IVS为30%,与实验组IVS结果一致。结论在胃癌辅助化疗中,5μg/ml的5'-DFUR为CD-DST法评价CAP药物敏感性的实验条件,其检测结果IVS与临床有效率一致,为临床胃癌患者术后采用CDDST法进行CAP体外药敏实验提供指导。

术前口服氟尿苷对胃癌细胞增殖及微血管密度的影响

目的观察术前口服氟尿苷对胃癌细胞增殖与微血管密度(MVD)的影响。方法采用增殖细胞核抗原(PCNA)及Ⅷ因子抗体作病理切片的免疫组化染色,观察60例胃癌患者(分为术前化疗实验组和未化疗对照组,n=30)术后标本的增殖指数及MVD的差异。结果实验组肿瘤细胞增殖指数(38.13±8.53)%,对照组(47.88±8.28)%,差异具有显著性(P<0.01);实验组MVD34.74±7.98,对照组MVD39.92±7.75,差异具有显著性(P<0.05)。结论术前口服氟尿苷可抑制胃癌细胞增殖,降低微血管密度,有利于胃癌的治疗。

类巨噬细胞增强5'-脱氧氟尿苷抗结直肠癌细胞活性

目的探讨类巨噬细胞表达的胸苷磷酸化酶(dThdPase)能否增强细胞内激活抗癌药物5'-脱氧氟尿苷(5'-DFUR)抗结直肠癌细胞作用。方法应用ELISA法分别检测结直肠癌细胞系LS174T、CloneA、Colo320、CX-1、LOVO、MIP101和类巨噬细胞系THP-1、U937的dThdPase蛋白含量。采用MTT分析,分别测定出氟尿嘧啶(5-FU)和5'-DFUR在6株结直肠癌细胞的半数有效浓度(IC50)。把5-FU或5'-DFUR同THP-1或U937细胞一起培养24h,其上清液2倍稀释后加入结直肠癌细胞中行MTT分析,测定IC50有无改变。并在培养THP-1或U937的培养基中加入定量5'-DFUR后检测5-FU的生成量。结果6株结直肠癌细胞中仅LS174T检出0.5U/mg、LOVO检出8.9U/mg的dThdPase蛋白,其他4株未检出。而THP-1和U937的dThdPase蛋白含量则分别为18.2U/mg和19.3U/mg。5'-DFUR对全部癌细胞的IC50高于5-FU的14.5～94.4倍(P<0.01)。5-FU和5'-DFUR同THP-1(或U937)细胞一起培养24h后,5-FU对6种癌细胞的IC50无明显改变(P>0.05),而5'-DFUR的IC50则分别下降到原来的5.4%～41.8%(P<0.001)。并从加入400μmol5'-DFUR的THP-1和U937的培养液中分别检出40.2μmol和32.9μmol的5-FU。结论6株结直肠癌细胞基本无dThdPase活性,不能在细胞内转化5'-DFUR为5-FU。类巨噬细胞表达的dThdPase可以转化5'

单核细胞增强5′-脱氧氟尿苷抗结直肠癌细胞活性

目的 探讨巨噬细胞在结直肠癌化疗中的调控作用。方法 应用ELISA法分别检测结直肠癌细胞系LS174T、Clone A、Colo320、MIP101的胸苷磷酸化酶(dThdPase)蛋白含量。采用MTT分析,分别测定出氟尿嘧啶(5-FU)和5’-脱氧氟尿苷(5’-DFUR)对上述4种癌细胞的半数有效浓度(IC50)。然后把5’-DFUR加入培养基中同人血单核细胞一起培养24 h,其培养上清液2倍稀释后加入结直肠癌细胞中行MTT分析测定其IC50有无改变。同时测定单核细胞在不同浓度5’-DFUR中的存活率。结果 4种结直肠癌细胞仅LS174T检出0.5 U/mg的dThdPase蛋白,其它3种未检出。4种癌细胞对5-DFUR的IC50均明显高于5-FU(P<0.01)。同人血单核细胞一起培养后,5’-DFUR对4种癌细胞的IC50明显下降,仅相当于处理前的11.6％～34.3％(P<0.05),同时发现5’-DFUR对人血单核细胞无明显生长抑制作用。结论 被检结直肠癌细胞因缺乏dThdPase活性,不能在细胞内转化抗癌药物5’-DFUR为5-FU发挥细胞毒作用;同人血单核细胞一起培养后,5’-DFUR在单核细胞内dThdPase的催化下,可转化成5-FU并释放到培养基中发挥抗癌作用。

术前化疗诱导乳腺癌生理凋亡的研究

目的探讨化疗对乳腺癌生理调亡的诱导机制。方法以初发乳腺癌患者为研究对象，24名患者分为2组。化疗组技与5-氟脱氧尿嘧啶（5－DFUR）800mg／天，连续14天，共14例，非化疗组10例，利用末端标记法来检测两组手术前后生理凋亡情况。结果发现经化疗后乳腺癌的生理调亡增加，同化疗前比较有统计学意义（P＜0.05）。结论化学药物可以诱导乳腺癌的生理凋亡，并且对肿瘤治疗的途径做了进一步探讨。

晚期胃癌不同化学治疗方案的疗效比较

目的观察泰素+氟尿嘧啶(TF)方案和草酸铂+四氢叶酸钙+脱氧氟尿苷(OLD)方案治疗晚期胃癌的近期疗效。方法将经病理检查证实为晚期胃癌的患者117例随机分为TF组(51例)和OLD组(66例)。28d为1个化疗周期,至少接受2个化疗周期。结果TF组初治病例有效率为62.5%,复治病例有效率为59.3%,总有效率为60.8%;OLD组分别为54.8%,31.4%,42.4%。两组初治病例有效率比较差异无显著性(P>0.05),复治病例有效率及总有效率比较差异均有显著性(均为P<0.05)。TF组中位无进展时间8.7个月、中位生存时间19个月;OLD组分别为7.6个月和17.8个月;两组比较差异均无显著性(均为P>0.05)。毒副反应以骨髓抑制和周围神经炎为主,TF组的发生率显著高于OLD组(P<0.05)。结论TF方案和OLD方案治疗晚期胃癌均有较好的近期疗效,患者耐受性好,而后者的毒副反应更轻,临床应用更安全。