提高酵母抽提物5'-GMP含量的研究

对新鲜麦芽根中5-磷酸二酯酶的提取及酶解条件进行了研究,并利用所得5-磷酸二酯酶应用于酵母抽提物的生产中以提高5-GMP的含量。

双核Pt(Ⅳ)配合物与Guanosine-5′-Monophosphate和Glutathione反应的核磁共振光谱研究(英文)

合成了一个新型的双核Pt(Ⅳ)配合物｛[cis-Pt(NH3)2Cl(OH)2]2(4,4′-methylenedianiline)｝(NO3)2(化合物1)及相应的15N标记化合物｛[cis-Pt(15NH3)2Cl(OH)2]2(4,4′-methylenedianiline)｝(NO3)2(化合物15N-1)。利用1HNMR和ESMS进行了结构表征,化合物15N-1的2D[1H,15N]HSQCNMR发现,该化合物在水溶液中存在同分异构体。2D[1H,15N]HSQCNMR技术跟踪了化合物15N-1与Guanosine-5′-Monophosphate(5′-GMP)和Glutathione(GSH)的反应。结果显示,5′-GMP能在0.5h内将化合物1还原,而GSH在6h以后才能够部分的将化合物1还原。化合物1所表现出来的反应性能将有利于提高其治疗效果和降低毒副作用。

一种新型Au(Ⅲ)-吡啶酰胺配合物的合成,表征及其与5'-单磷酸鸟苷的反应研究

利用四氯合金酸和N-4-甲基苯基2-吡啶甲酰胺(HL)反应,合成得到了一种新的Au?配合物:二氯(N-4-甲基苯基2-吡啶甲酰胺合金?犤Au(L-N,N')Cl2犦。并通过元素分析、红外光谱、核磁共振谱、质谱及X-射线单晶衍射对其进行了表征。结构分析表明,Au?由二个氮原子和二个氯原子配位,呈平面四方形结构。质谱研究发现,该化合物与5'-单磷酸鸟苷(5'-GMP)反应生成犤Au(L-N,N')(5'-GMP)2犦。

5′-鸟苷酸的晶体结构预测

采用Cerius2软件中的Polymorph模块,预测5′-鸟苷酸的晶体结构。采用蒙特卡罗模拟退火方法在晶格能超曲面上搜索晶体可能的堆垛方式;基于堆垛相似性,有选择性的将这些可能的结构划分成各个特征组;在所有自由度上对每一特征结构进行优化;对优化后的各个结构再次分组排除重复;根据晶格能对最后得到的结构进行排序,得到5′-鸟苷酸最可能的空间群为P212121。

高效液相法测定调味品中5’-鸟苷酸二钠和5’-肌苷酸二钠

采用Inertsil ODS-3色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);以0.02moL/L磷酸二氢钾溶液(pH4.5)为流动相,流速1.0mL/min,柱温25℃,检测波长250nm,同时分离了样品中5'-鸟苷酸二钠和5'-肌苷酸二钠。结果显示:在选定色谱条件下5'-鸟苷酸二钠和5'-肌苷酸二钠线性关系良好,加样平均回收率为98.6%～100.3%;相对标准偏差0.77%～1.67%。该方法精密度好,结果准确可靠,适合于调味品中5'-鸟苷酸二钠和5'-肌苷酸二钠的定量分析。

鱼腥蓝细菌PCC7120 alr3504基因缺失突变体的构建及表型分析

c-di-GMP是新发现的真细菌所特有的第二信使,其合成和降解由双鸟苷酸环化酶和磷酸二酯酶分别完成。经生物信息学分析,鱼腥蓝细菌PCC7120基因alr3504可能编码含有保守GGDEF结构域的双鸟苷酸环化酶。【目的】为了鉴定该基因的功能,【方法】采用标记置换方法将alr3504缺失。【结果】敲除该基因后,发现缺失突变体的形态、生长速度及异形胞发育与野生型无明显差异,但在盐胁迫条件下,突变体比野生型对钠盐更敏感。【结论】可见alr3504虽不直接影响异形胞发育,但参与了其它信号途径,研究结果为阐明蓝细菌丰富而复杂的信号转导机制奠定了基础。

采用高效液相色谱法测定猪肉中的呈味核苷酸

本文建立了猪肉中呈味核苷酸肌苷酸和乌苷酸的高效液相色谱检测方法。以甲醇．0．05mol／L磷酸二氢钠水溶液为流动相，用ZOBAX-NH2色谱柱分离，二极管阵列检测器检测，检测波长为260nm。该方法线性范围为1．00～100mg／mL，变异系数为0．5%-3％，加标平均回收率为85％以上，方法准确可靠，精密度较高。

脉冲电磁场促进大鼠成骨细胞成熟与矿化依赖于NO/cGMP信号途径

脉冲电磁场(pulse electromagnetic fields,PEMFs)能够促进大鼠成骨细胞(rat osteoblast cells,ROB)成熟矿化,但是其作用机制并不明确。本实验主要研究PEMFs促进大鼠成骨细胞成熟矿化与NO/c GMP信号途径的关系,进而阐明PEMFs促进成骨细胞成熟矿化的机理。首先,将成骨细胞经50 Hz、0.6 m T脉冲电磁场作用不同时间后,检测细胞培养液中一氧化氮(nitric oxide,NO)和细胞内3'-5'-环鸟苷一磷酸(3'-5'-cyclic-GMP,c GMP)的含量,以探明电磁场是否影响NO和c GMP的合成;其次,应用蛋白质印迹,检测细胞内e NOS、i NOS和PKG-1的蛋白表达量;最后,利用NOS的阻断剂L-NAME抑制NO信号通路后,检测成骨性相关指标,包括碱性磷酸酶(ALP)活性、钙化结节数量、成骨性基因Bmp-2、Collagen-1、Osterix及破骨细胞调节因子Rankl基因的表达量。结果发现,经PEMFs处理后,NO含量及c GMP含量均有明显升高;细胞内e NOS、i NOS和PKG-1蛋白表达量较空白对照组均有显著升高,说明PEMFs能够激活NO/c GMP信号途径。且经PEMFs处理的成骨细胞,ALP活性升高,BMP-2、Collagen-1和Osterix基因表达量显著增加,Rankl基因表达量下降,成骨细胞形成钙化结节的能力增强。当加入L-NAME,PEMFs引起的ALP活性增加、成骨性基因表达升高和钙化结节形成能力增强的趋势均被显著抑制。上述结果表明,经PEMFs处理成骨细胞成熟矿化过程中,NO/c GMP信号通路被激活;如该通路被抑制,则电磁场促成骨作用被抵消,说明脉冲电磁场促进成骨细胞成熟矿化依赖于NO/c GMP信号通路。

紫外光度法测定增鲜味精中呈味核苷酸二钠的含量

5′-肌苷酸二钠(Ionosine-5′-monophosphate,简称IMP)和5′-鸟苷酸二钠(Guanosine-5′-onophosphate,简称GMP)在250nm处有较强吸收,运用紫外分光光度法测定增鲜味精中呈味核苷酸二钠(I+G)的含量。当HCl浓度在1mol/L以下,样品浓度为0·01～0·25g/L时,标准曲线在250nm处的相关系数达到0·999,平均回收率为97·4%,RSD为3·59%。结果表明,该法是一种简单、方便、快捷的测定方法。

外源性C-di-GMP对变形链球菌产酸、耐酸能力的影响

目的:初步探讨外源性c-di-GMP对变形链球菌产酸、耐酸能力的影响。方法:外源性c-di-GMP与生理盐水分别加入至含变形链球菌UA159菌液的BHI培养基中,比较两组对变形链球菌产酸、耐酸能力的影响。结果:c-di-GMP处理组与生理盐水组相比,产酸、耐酸能力明显下降,差异有统计学意义,经t检验,P<0.05。结论:c-di-GMP可以抑制变形链球菌的产酸、耐酸能力,可以单独也可以与其它的抗龋制剂联合应用控制龋病。

毛冬青甲素对小鼠血浆及兔血小板内环磷酸腺苷水平的影响

毛冬青甲素对冠心病等疾病有明显的疗效,且对血小板的凝集有抑制作用,为了进一步探讨其抑制作用的机理。本实验从毛冬青甲素对血浆 cAMP 及血小板内 cAMP 含量的变化进行了研究。实验结果表明,血浆 cAMP 的含量给药组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。而血小板内 cAMP 的含量是给药组高于对照组(P<0.025)。提示毛冬青甲素对血小板的抑制作用是通过增加血小板内 cAMP的含量来实现的。说明其药理作用机理之一与增加血小板内 cAMP 水平有关。这一研究结果有可能为用活血化瘀法则防治冠心病等疾病提供分子药理学的依据。

呈味核苷酸及其在食品调味中的应用

以5'—肌苷酸和5'—鸟苷酸为代表的5'—核苷酸及其一些衍生物,已逐渐应用于食物的调味中.本文综述了5'—核苷酸及其一些衍生物呈鲜味特点、呈味性质与化学结构的关系以及在食物调味中的运用情况,以便为进一步开发和利用5'—核苷酸类鲜味调味剂提供资料.

呈味核苷酸及其生产应用的研究

以5′ 肌苷酸和5′ 鸟苷酸为代表的5′ 核苷酸作为一种新型的添加剂,已逐渐应用于食品的调味中,本文讨论了5′ 核苷酸的结构、性质和呈味特点,介绍了四种呈味核苷酸的生产方法,并就呈味核苷酸的应用和发展进行了阐述。

硝普钠与异丙肾上腺素松弛犬气管平滑肌的协同作用

目的：研究硝普钠（ＳＮＰ）与异丙肾上腺素（ＩＳＯ）对犬气管平滑肌松弛作用是否存在协同关系，并分析协同的机制。方法：采用放射免疫分析法测定犬气管平滑肌环核苷酸量，并用磷酸二酯酶（ＰＤＥ）同工酶抑制剂为工具分析ＳＮＰ与ＩＳＯ相互作用的机制。结果：ＳＮＰ（１～１００μｍｏｌ·Ｌ－１）增强ＩＳＯ（３０μｍｏｌ·Ｌ－１）对３μｍｏｌ·Ｌ－１乙酰甲胆碱预收缩的犬气管平滑肌的松弛作用。ＳＮＰ（１００μｍｏｌ·Ｌ－１）与ＩＳＯ（３０μｍｏｌ·Ｌ－１）对犬气管平滑肌松弛的协同作用伴有气管平滑肌中ｃＡＭＰ积聚比ＳＮＰ与ＩＳＯ单独时分别增加１．２倍与０．４倍。ＰＤＥⅤ抑制剂扎普司特（３μｍｏｌ·Ｌ－１）使ＳＮＰ的气管平滑肌ｃＧＭＰ积聚由２．４倍增加到４．６倍，可进一步增加气管松弛作用１．２倍。合并ＰＤＥⅢ抑制剂氰胍哒嗪（３０μｍｏｌ·Ｌ－１）和ＰＤＥⅣ抑制剂咯利普兰（３０μｍｏｌ·Ｌ－１）或合并ＳＮＰ（１００μｍｏｌ·Ｌ－１）和咯利普兰（３０μｍｏｌ·Ｌ－１）均能进一步增强ＩＳＯ的气管ｃＡＭＰ积聚与松弛作用。结论：ＳＮＰ是通过气管平滑肌ｃＧＭＰ含量增加而抑制ＰＤＥⅢ，导致ＳＮＰ与ＩＳＯ对气管松弛的协同作用。

应用HPLC反相色谱快速测定增鲜味精中的鸟苷酸和肌苷酸

本文描述了一种快速测定增鲜味精中的５’－鸟苷酸（５’－ＧＭＰ）和５’－肌苷酸（５’－ＩＷＰ）的方法。样品经过简单的前处理溶解、衍生并由ＯＤＳＣ－１８反相柱分离。流动相为０．５％ＫＨ_２ＰＯ_４缓冲液（ｐＨ４．５～５．０）。ＵＶ（紫外）－检测器波长为２５４ｎｍ。增鲜味精中的５００μｇ／１００ｇ５’－ＧＭＰ和５００μｇ／１００ｇ５’－ＩＭＰ能全部分离并定量测定。相关系数分别为０．９９８９（５’－ＧＭＰ）和０．９９９６（５’－ＩＭＰ）。回收率达分别达１０２．２％（５’－ＧＭＰ）和１０１．９％／（５’－ＩＭＰ）。变异系数分别为４．７％（５’－ＧＭＰ）和２．６％（５’－ＩＭＰ）。

高效液相色谱法测定酱油中呈味核苷酸

利用高效液相色谱法测定酱油中呈味核苷酸二钠盐的含量。以醋酸—醋酸钠缓冲液(pH4.5)配制流动相,等梯度洗脱,254nm波长,Hypersil-ODS反相色谱柱,在20min内分离测定酱油中呈味核苷酸二钠盐的含量。结果表明:肌苷酸二钠和鸟苷酸二钠的保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为4.0%￣4.6%,峰面积与进样量之间的线性关系数分别为0.9999,标准加入回收率平均为100.06%。

双波长分光光度法测定呈味核苷酸二钠混合物含量

在 2 0 0～ 3 0 0nm波长范围内扫描 5’ 肌苷酸二钠 (IMP)和 5’ 鸟苷酸二钠 (GMP)溶液 ,根据双波长分光光度法波长选择原理 ,确定 2个波长分别为λ1=2 5 0nm与λ2 =2 80nm。分别配制一定浓度的IMP、GMP溶液 ,并在 2波长处测定其吸光值 ,由比耳定律推算出常数εΙΜΡλ2 50 ,εGΜΡλ2 50 ,εΙΜΡλ2 80 ,εGΜΡλ2 80 的数值 ,根据加和性原理推导出IMP、GMP和呈味核苷酸二钠 (I+G)的测定公式。结果表明 ,此测定方法稳定性好 ,重复性高 ,专属性高 ,可代替液相色谱法 (HPLC)测定I+G的含量。

添加呈味核苷酸对断乳仔猪采食量的影响

剌激断乳仔猪的食欲,提高采食量,才能最大限度地发挥断乳仔猪的生长性能。选择36头平均体重为7.36kg、30日龄的杜长大杂交断乳仔猪,按体重、公母等平均原则,随机分为对照组和试验组,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮基础上添加含5'-肌苷酸二钠(IMP)、5'-鸟苷酸二钠(GMP)的呈味核苷酸400mg/kg,试验期30d。结果显示:试验组各重复头均日采食量、头均日增重分别比对照组提高18.96%、13.61%。由此可知,添加含5'-肌苷酸二钠(IMP)、5'-鸟苷酸二钠(GMP)的呈味核苷酸能提高断乳仔猪的食欲及采食量,并改善断乳仔猪的生长性能。

试论将18.9L桶装饮用纯净水风险降至最低的方法

从HACCP的角度来说,18.9L的桶装饮用纯净水是一种不安全的产品,因为它封口的这一个关键步骤无法象小瓶水一样可以用一个具体的关键限值来控制。但根椐我国的基本国情,必须设法将此种包装产品的风险降至最低。根椐HACCP质量管理体系的基本原理,强调了HACCP的前提工作GMP和SSOP的重要性。