电针对腹泻型肠易激综合征患者结肠黏膜5-HT、5-HT3R表达的影响

目的:观察电针对腹泻型肠易激综合征患者结肠黏膜5-HT、5-HT3R表达的影响,探讨其作用机制。方法:分别选取给予电针治疗(选取中脘、天枢、气海等穴,针刺后加电刺激,4周为1个疗程)16例和西药治疗(口服地衣芽孢杆菌和黛力新片)15例的腹泻型IBS患者治疗前后的乙状结肠黏膜组织,采用免疫组化法观察两组患者结肠黏膜5-HT、5-HT3R表达情况。结果:电针组和西药组两组患者治疗前结肠黏膜5-HT、5-HT3R阳性面积和光密度(OD)表达均较正常人有显著性升高(P<0.01,P<0.01);两组患者治疗后均较治疗前有显著性降低(P<0.01,P<0.01),电针组治疗后结肠黏膜5-HT、5-HT3R阳性面积表达则较西药组明显降低,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05)。结论:电针可能通过显著降低腹泻型IBS患者结肠黏膜5-HT、5-HT3R表达,进而减弱神经介导的胃肠道运动与分泌,提高内脏痛阈,消除肠道过敏,由此改善胃肠道运动功能状态和内脏高敏感性而达到其治疗之目的。

丁郁柿蒂汤调控5-HT、5-HT3R干预急性CINV的机制研究

目的:从蛋白定量分析和基因表达水平探讨丁郁柿蒂汤治疗急性化疗性恶心呕吐(CINV)的作用机制,并通过观察大鼠症状并检测相关指标证明丁香配伍郁金治疗急性CINV的可行性。方法:采取慢性束缚法+顺铂注射法复制急性CINV大鼠异食癖模型;造模组分别用丁香柿蒂汤、郁金单方、丁郁柿蒂汤、昂丹司琼和蒸馏水干预;用ELISA法和RT-q PCR法观察5-HT和5-HT3R的表达情况。结果:急性CINV造模后23～24 h模型组大鼠的糖水偏爱度较低,急性CINV造模后12～24 h高岭土摄食量显著升高,血清和回肠组织中5-HT的合成显著升高,5-HT的代谢率显著降低,回肠和延髓组织中5-HT3R的基因表达显著升高。丁郁柿蒂汤可降低血清和回肠组织中5-HT的合成,升高5-HT的代谢率,降低回肠和延髓组织中5-HT3R的基因表达。结论:丁郁柿蒂汤能够通过降低血液和回肠组织中5-HT的合成,并加速其代谢来降低5-HT的含量。再通过抑制5-HT3R的表达,有效阻滞神经冲动的传导,在急性CINV时显著减少传入呕吐中枢的信号,起到良好的止呕效果。丁郁柿蒂汤中用丁香和郁金相伍,不仅能大大降低郁金在急性CINV时表现出来的毒性,而且能增加丁香柿蒂汤的药效,具有减毒增效的效果。

电针不同腧穴对功能性腹泻大鼠多组织5-HT3R、5-HT4R的影响

目的观察功能性腹泻(FDr)模型大鼠的下丘脑、脊髓、胃、肠中5-羟色胺3受体(HT3R)、5-羟色胺4受体(HT4R)mRNA的表达,探讨电针治疗FDr的作用机制,并分析经穴脏腑相关性。方法将48只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,足三里组,阴陵泉组,阴谷组、非经非穴组;每组8只。连续14 d用束缚、冷刺激、饮食失节等综合方法制备FDr模型。模型复制成功后,足三里组、阴陵泉组、阴谷组、非经非穴组给予电针干预20 min,1次/d,共7 d。测定大鼠胃内残留率与小肠推进率,并采取实时荧光定量PCR法检测下丘脑、脊髓、胃肠中5-HT3R、5-HT4R mRNA的表达。结果与正常组相比,造模后胃内残留率与小肠推进率均明显升高(P<0.05);模型组下丘脑、脊髓、胃肠中5-HT3R mRNA表达明显增加,5-HT4R mRNA表达明显减少(P<0.05)。电针后,足三里组和阴陵泉组与模型组相比,胃内残留率明显降低(P<0.05);下丘脑、脊髓、胃肠中5-HT3R mRNA表达明显减少,下丘脑、脊髓、胃窦中5-HT4R mRNA表达明显增加(P<0.05);与模型组相比,足三里组小肠推进率及结肠中5-HT4R mRNA表达明显升高(P<0.05)。与阴谷组、非经非穴组相比,足三里组胃内残留率、小肠推进率均明显降低(P<0.05);足三里组下丘脑、脊髓、胃、肠中5-HT3R mRNA表达明显减少,5-HT4R mRNA表达明显增加(P<0.05)。结论电针足三里穴和阴陵泉穴通过影响5-HT3R、5-HT4R mRNA表达对FDr起整体调节作用,提示经穴与脏腑之间存在特异性联系。

5-HT3R与CB1R对经前烦躁障碍的不同作用机制

探讨经前烦躁障碍[premenstrual dysphoric disorder,PMDD,重度经前期综合征(premenstrual syndrome,PMS)]肝气逆及肝气郁两证中5-羟色胺3受体(5-HT3R)与大麻黄受体1(CB1R)的含量,探索两证异常具有的同中存异特征,指出肝疏泄失常所致肝气逆证、肝气郁证为重度经前期综合征(PMS)主证,已知5-HT3R与CB1R共表达于情绪调控脑区γ-氨基丁酸(GABA)神经元,因此深入探索5-HT3R与CB1R对PMDD作用机制有可能揭示“肝主疏泄调畅情志”的本质。

山楂水提物对肠易激综合征大鼠结肠黏膜5-HT和5-HT3R表达的影响

目的:探讨山楂水提物对肠易激综合征(IBS)大鼠结肠黏膜5-HT和5-HT3R的影响,探讨其改善消化功能的作用机制。方法:采用乳鼠结肠PTCA球囊刺激法复制IBS大鼠模型。随机分为模型组、空白组、西沙必利组、山楂水提物高、中、低剂量组,给药2周后,应用免疫组化法检测大鼠结肠黏膜5-HT和5-HT3R表达变化。结果:与空白组比较,模型组大鼠结肠黏膜5-HT和5-HT3R水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);给药组大鼠5-HT和5-HT3R的表达明显降低(P<0.01;P<0.05)。结论:山楂水提物可抑制IBS模型大鼠结肠黏膜5-HT和5-HT3R的过分表达,从而改变肠道敏感度,达到改善肠道消化功能作用。

情绪调控脑区5-HT3R表达在经前烦躁障碍肝气逆证发病机制中的作用

目的:研究情绪调控脑区中5-HT3R基因的表达在经前烦躁障碍(premenstrual dysphoric disorder,PMDD)肝气逆证发病机制中的作用。方法:通过建立PMDD肝气逆证大鼠模型,将大鼠模型分为3组进行药物干预。模型组和对照组给予等量体积CMC-Na溶液灌胃(1 mL/100 g),同时腹腔注射0.2 mLDMSO;实验组腹腔注射1-phenylbiguanide(PBG),3.0 mg/(kg·d),用药3个动情周期之后,通过旷场实验(OFT)、高架十字迷宫(EPM)及居住入侵(RIT)检测评价用药后大鼠的行为表现;利用Western blotting检测情绪调控脑区(海马和前额叶皮质)5-HT3R蛋白的表达。结果:与模型组比较,应用1-phenylbiguanide能够有效改善大鼠的焦虑样行为,海马区5-HT3R基因的表达更显著。结论:5-HT3R有可能能够改善PMDD肝气逆证,还需要更进一步的研究证实。

术芍易激胶囊对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠黏膜5-HT和5-HT_3R表达的影响

目的观察术芍易激胶囊对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠结肠黏膜5-羟色胺(5-HT)和5-羟色胺3受体(5-HT3R)的表达的影响。方法将48只SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组、得舒特组和术芍易激胶囊高、中、低剂量组,分别予生理盐水、得舒特、术芍易激胶囊灌胃2周。取大鼠结肠黏膜一块,以免疫组化方法检测5-HT和5-HT3R的表达。结果与模型组比较,术芍易激胶囊各剂量组容量阈值增加(P<0.01),5-HT和5-HT3R的表达明显降低(P<0.01),尤以术芍易激胶囊高剂量组为优。结论术芍易激胶囊能抑制D-IBS模型大鼠结肠黏膜5-HT和5-HT3R的表达,可能通过进一步影响肠道动力学和肠道敏感性来实现其治疗作用。

5-HT_2和5-HT_3受体在外周初级感觉神经末梢痛反应和痛调制中的相互作用

目的:探讨5-HT2和5-HT3受体亚型在5-HT引起外周痛反应和痛调制中的相互作用及其机制;方法:在大鼠三叉神经节神经元标本上应用全细胞膜片钳技术记录5-羟色胺激活电流(I5-HT),并结合痛行为实验进行观察。结果:在大多数受检细胞(54/88,61.4%)特别是中、小型细胞外加5-HT可引起一快去敏感的内向电流,此内向电流能被5-HT3受体特异性激动剂2-甲基-5-羟色胺所模拟,被5-HT3受体拮抗剂ICS250-930可逆性阻断,而5-HT2受体激动剂α-甲基-5-羟色胺则有明显增强I5-HT的作用,5-HT1受体激动剂R-(+)-UH301无明显反应。在进一步的整体清醒动物的行为学试验中我们观察到,大鼠后肢掌底皮下注射5-HT(10-5,10-4和10-3mol/L)引起浓度依赖性的痛行为反应,而用5-HT2和5-HT3受体特异性拮抗剂Cyproheptadine和ICS250-930分别阻断相应受体亚型后,5-HT引起的痛行为反应的强度序列为:5-HT>5-HT+ICS>5-HT+Cyp。结论:本文结果提示:5-HT所引起的痛反应中,在初级感觉神经元水平5-HT3受体可能仅起着启始作用,而5-HT2受体则在伤害性信息的维持和调制过程中发挥更大的作用。

柴胡提取物对大鼠海马原代培养神经元5-HT_3受体介导离子通道的影响

目的 :探讨柴胡提取物(Radix Bupleuri Extract,RBE)含药血清对抑郁情绪模型大鼠原代培养的海马神经元5-羟色胺3受体(5-HT3R)通道电流的作用。方法:复制抑郁情绪大鼠模型,以柴胡提取物进行药物干预,采用旷场实验和糖水偏好实验评价模型,制备各组大鼠血清并灭活除菌,对原代培养的大鼠海马神经元干预24 h后,采用全细胞膜片钳技术检测各组神经元5-HT_3R通道电流。结果 :与正常组相比,模型组大鼠旷场实验总分显著性降低(P<0.01),糖水偏好系数显著降低(P<0.01),模型组大鼠血清孵育的海马神经元电流密度值明显增加(P<0.01);与模型组相比,柴胡提取物组和氟西汀组旷场实验总得分明显提高(P<0.05,P<0.01),糖水偏好系数均明显增加(P<0.05,P<0.05),柴胡提取物和氟西汀含药血清孵育的海马神经元电流密度值均明显减少(P<0.01,P<0.01)。结论:柴胡提取物能改善抑郁情绪模型大鼠异常的5-HT3R通道电流,这可能是其发挥抗抑郁情绪的中枢机制之一。

舒郁胶囊在大鼠脑内的化学成分鉴定及对5-HT;R通道功能的影响

目的:探究舒郁胶囊在大鼠大脑组织中的化学成分分布及对海马神经元原代细胞5-羟色氨3受体(5-HT;R)功能的影响。方法:正常大鼠灌胃给予舒郁胶囊内容物后,取大鼠海马、额叶、纹状体、下丘脑、小脑和脑干组织,采用HPLC-ESI-MS;法检测上述大脑核团中的化学成分;复制大鼠抑郁情绪模型,灌胃舒郁胶囊内容物并提取大鼠含药血清,利用Western blotting法检测经各组灭活血清干预后的海马神经元原代细胞5-HT;R蛋白表达,利用全细胞膜片钳技术记录经各组灭活血清干预后的5-HT;R介导的通道离子电流。结果:在大鼠海马和额叶核团检测到5个化学成分,其中2个为新代谢产物;与正常组血清所孵育的海马神经元比较,抑郁组大鼠5-HT;R蛋白表达量及5-HT;R电流密度值均明显升高(P<0.05);与抑郁组血清所孵育的海马神经元比较,舒郁组大鼠5-HT;R蛋白表达量及5-HT;R电流密度值均明显降低(P<0.05)。结论:芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷甲酯、去羟基去亚甲基芍药苷和柴胡皂苷元脱氧化物可能是舒郁胶囊调节5-HT;R通道功能发挥抗抑郁作用的主要化学成分。

长期服用普芦卡必利对慢传输型便秘雌性大鼠肠道组织及5-HT受体表达水平影响的研究

目的:探究长期口服普芦卡必利对慢传输型便秘雌性大鼠肠道组织及5-HT受体表达水平的影响,为该药在临床治疗中的规范应用提供理论支持。方法:选用成年雌性SD大鼠,将其随机分为正常组、模型组以及普芦卡必利(力洛)组,并进行为期2个月的干预。观察指标包括大鼠首次白便排出时间、粪便含水率、结肠含水量、肠道组织病理和黏液分泌情况,以及5-羟色胺(5-Hydroxytryptamine,5-HT)、5-羟色胺3受体(5-Hydroxytryptamine Receptor 3,5-HT3R)、5-羟色胺4受体(5-Hydroxytryptamine Receptor 4,5-HT4R)蛋白表达等变化。结果:长期服用普芦卡必利显著改善了慢传输型便秘大鼠的排便时间、结肠含水量和粪便含水率等指标(P<0.05)。结肠病理组织染色和黏液染色结果表明,该药物能够改善大鼠结肠组织的病理状态和结肠黏液分泌情况。酶联免疫吸附(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)和免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测显示,与模型组相比,力洛组的5-HT、5-HT3R、5-HT4R蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而与空白组相比,力洛组的蛋白表达水平无显著差异(P>0.05)。结论:长期服用普芦卡必利有助于改善慢传输型便秘模型大鼠的疾病状态、肠道组织病理状态和结肠黏液分泌情况,同时提高了5-HT受体的表达水平。

卵巢激素对大鼠结肠组织5-羟色胺受体3的影响

目的 研究不同卵巢激素水平对去卵巢大鼠动物模型结肠组织 5 羟色胺受体 3 (5 HT3 receptors ,5 HT3R )的影响。方法 2 4只成年♀SD大鼠 ,随机分为 3组 :假手术(Sham)组、去卵巢 (OVX )组、去卵巢加雌激素和孕激素(OVX +E2 +P)组 ,每组 8只。 4wk后观察 1h大鼠排便和玻璃小球排出情况 ;并采用RT PCR方法 ,检测 3组大鼠结肠组织 5 HT3RmRNA的表达。结果 OVX组大鼠较Sham组及OVX +E2 +P组排便量增加 ,玻璃小球排出时间缩短 (P <0 0 1) ;OVX组与Sham组及OVX +E2 +P组比较 ,5 HT3RmRNA的表达明显增加 (P <0 0 1) ;OVX +E2 +P组与Sham组比较 ,5 HT3RmRNA的表达减少 (P <0 0 1)。结论 卵巢激素对胃肠道 5

舒郁胶囊对原代大鼠海马神经元5-HT3A/3B受体表达的影响

目的:观察抑郁情绪模型组和模型治疗组大鼠血清对原代培养的大鼠海马神经元5-HT3A/3B受体(5-HT3A/3BR)蛋白水平表达的影响,探索复方舒郁胶囊治疗抑郁情绪的微观作用机制。方法:大鼠随机分为5组:正常组、模型组、舒郁胶囊治疗组(0.51 g.kg-1)、柴胡治疗组(0.4 g.kg-1)和氟西汀治疗组(0.002 g.kg-1),采用孤养结合28 d慢性温和刺激(CMS)制备抑郁情绪大鼠模型,治疗组造模的同时灌胃给药,收集各组大鼠血清灭活除菌,干预神经元24 h后利用蛋白印迹技术(Western blot)和细胞免疫荧光技术(immunofluorescence,IF)分别测定神经元胞内5-HT3A/3BR蛋白表达。结果:与正常血清组相比,模型组血清海马神经元5-HT3A/3BR表达水平均显著升高(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,治疗组均显著下调5-HT3AR的异常升高状态(P<0.01),但对5-HT3BR表达无明显改变。结论:大鼠海马神经元内5-HT3R表达与抑郁情绪关系密切,5-HT3A/3BR的表达变化可能是导致抑郁情绪的重要病因之一。舒郁胶囊及其君药柴胡含药血清对以上2种蛋白表达的调节趋势与氟西汀一致,对该病症的疗效显著,作用机制可能是调节海马神经元内5-HT3AR的异常表达。

人参调脾散对腹泻型肠易激综合征患者结肠黏膜5羟色胺3受体mRNA表达的影响

[目的]检测腹泻型肠易激综合征(IBS-D)患者结肠组织5羟色胺3受体mRNA(5-HT3R mRNA)的表达水平,探讨中药人参调脾散治疗IBS-D的作用机制。[方法]采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分析IBS-D患者治疗前后及正常人(对照组)乙状结肠黏膜5-HT3R mRNA表达水平的变化。[结果]IBS-D患者治疗前5-HT3R mRNA表达水平较对照组显著增高,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);经人参调脾散治疗后5-HT3R mRNA表达水平减低,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);IBS-D患者治疗前后5-HT3R mRNA表达水平自身比较差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]人参调脾散能通过下调IBS-D患者结肠黏膜5-HT3RmRNA表达,降低5-HT3R活性,达到治疗IBS-D的作用。

白芍提取物对大鼠海马原代培养神经元5-羟色胺3受体介导离子通道的影响

目的探讨白芍提取物含药血清对原代培养海马神经元5-羟色胺3受体(5-HT3R)介导离子通道的影响。方法采用孤养结合慢性温和刺激法复制抑郁情绪大鼠模型,并采用旷场实验和糖水偏好实验进行模型评价,以白芍提取物进行药物干预,制备大鼠含药血清,对原代培养的大鼠海马神经元干预24 h后,利用Western blotting法检测各组神经元细胞5-HT3AR、5-HT3BR蛋白表达,采用全细胞膜片钳技术检测各组神经元细胞5-HT3受体通道电流。结果与对照组相比,模型组大鼠旷场实验总路程、糖水偏好率均显著性降低(P<0.01);模型组大鼠血清孵育的海马神经元5-HT3AR、5-HT3BR蛋白表达量均显著性升高(P<0.05),模型组大鼠血清孵育的海马神经元电流密度值明显增加(P<0.05)。与模型组相比,白芍提取物组和氟西汀组旷场实验总得分明显提高(P<0.05),糖水偏好率均明显增加(P<0.01);白芍提取物组和氟西汀组大鼠含药血清孵育的海马神经元5-HT3AR、5-HT3BR蛋白表达量显著性降低(P<0.05、0.01、0.001);白芍提取物组和氟西汀组大鼠含药血清孵育的海马神经元电流密度值均明显减少(P<0.01)。结论白芍提取物能改善抑郁情绪模型大鼠异常升高的5-HT3R离子通道电流,这可能是白芍发挥其抗抑郁情绪的中枢作用机制之一。

白香丹胶囊对大鼠卵巢摘除所致的经前期焦虑症的改善作用

目的通过系列行为学测试,比较中药白香丹胶囊(BXD)、5-羟色胺3受体(5-HT3R)特异性激动剂及其拮抗剂、大麻素受体1(CB1R)特异性激动剂及其拮抗剂对经前期烦躁障碍(PMDD)焦虑症大鼠的干预效应。方法大鼠经卵巢摘除、激素诱导动情周期和居住入侵3种复合因子构建PMDD焦虑症动物模型。后续实验分两批进行:第1批大鼠分为对照组、模型组、5-HT3R激动剂(1-phenylbiguanide,PBG)组、CB1R激动剂(WIN55212-2,WIN)组、PBG+WIN组、BXD组;第2批大鼠分为对照组、模型组、5-HT3R拮抗剂(Granisetron,GRA)组、CB1R拮抗剂(Rimonabant,RIM)组、GRA+RIM组、BXD组。药物干预结束后,利用旷场行为测试(OFT)和高架十字迷宫行为测试(EPM)评价各组大鼠焦虑样行为。结果相较于对照组,模型组大鼠的居住入侵(RIT)混合攻击行为得分显著升高(P<0.01)、OFT中央区进入次数及停留时间显著降低(P<0.05)、EPM开放臂进入次数及停留时间百分比显著降低(P<0.05);相较于模型组,PBG组、RIM组、BXD组的RIT混合攻击行为得分显著降低(P<0.01)、OFT中央区进入次数及停留时间显著升高(P<0.05)、EPM开放臂进入次数及停留时间百分比显著升高(P<0.05)。结论中药BXD、5-HT3R特异性激动剂1-phenylbiguanide、CB1R特异性拮抗剂Rimonabant可有效纠正PMDD焦虑症模型大鼠的焦虑样行为。