高磷饮食对5/6肾切除大鼠继发性甲状旁腺功能亢进及肾脏纤维化的影响及金雀异黄素干预作用

目的观察高磷饮食对5/6肾切除大鼠继发性甲状旁腺功能亢进、肾脏纤维化的影响及金雀异黄素的干预作用。方法 8～10周龄雄性Sprague-Dawley大鼠24只,体重200 250 g,随机分为4组,每组6只:假手术正常磷饮食组(Sham十NP组),5/6肾切除正常磷饮食组(STNx+NP组),5/6肾切除高磷饮食组(STNx+HP组),5/6肾切除高磷饮食+金雀异黄素灌胃组(STNx+HP+Gen组)。高磷饮食配方:磷1.2%,钙1.6%,维生素D 1 U/kg。正常磷饮食配方:磷0.6%,钙0.6%,维生素D 1 U/kg。5/6肾脏切除分两步进行。造模术后第4、8、12、16周,检测血清肌酐(SCr)、磷、钙、1,25(OH)_2D_3、全段甲状旁腺激素(iPTH)水平。特定饮食结束时,处死大鼠,取肾脏组织,石蜡切片行苏木精-伊红(H-E)染色,进行病理积分。结果 Sham+NP组各项指标在实验过程中均无明显变化(P值均>0.05)。STNx+NP组、STNx+HP组、STNx+HP+Gen组SCr、磷、iPTH的水平均随着特定饮食喂养时间的延长逐渐升高。16周时与4周时的差异均有统计学意义(P值均<0.01)。16周时,STNx+HP组、STNx+HP+Gen组的SCr、磷、iPTH与STNx+NP组的差异均有统计学意义(P值均<0.01)。而4组不同时间钙、1,25(OH)_2D_3的水平均无明显改变(P值均>0.05)。Sham+NP组、STNx+NP组、STNx+HP组和STNx+HP+Gen组的肾小球硬化指数分别为0、1.01±0.02、1.83±0.03、1.51±0.03,STNx+HP组和STNx+HP+Gen组显著高于STNx+NP组(P值均<0.01),STNx+HP组显著高于STNx+HP+Gen组(P<0.01)。结论高磷饮食可促进5/6肾大部切除大鼠甲状旁腺功能亢进的发生,并加剧其肾功能恶化,金雀异黄素可部分减轻其肾脏毒性作用,改善甲状旁腺功能亢进。

5/6肾切除联合ISO制备心肾综合征大鼠模型方法初探

[目的]查阅已有的心肾综合征大鼠模型文献报道,将“5/6肾切除术制备心肾综合征大鼠模型”方法适当改进,评价其方案造模效果,探讨简捷高效的心肾综合征造模方法。[方法]将20只雄性SD大鼠随机分为两组,即空白组与手术组,空白组大鼠不做处理,手术组大鼠均按“两次手术法”行5/6肾切除,手术1周后连续2 d(间隔24 h)皮下注射异丙肾上腺素(2.5、1.5 mg/kg)制备心肾综合征模型。分别检测两组大鼠造模后的血肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)、脑钠肽(BNP)水平,比较造模前、造模后、造模6周大鼠体质量,并在造模6周后处杀两组大鼠,称取心脏质量,计算心脏质量指数(心脏质量/大鼠体质量),观察两组大鼠心、肾病理组织变化。[结果]大鼠经5/6肾切除联合异丙肾皮下注射方法造模后,空白组与手术组BNP、Cr水平差异有统计学意义(P<0.05),手术组大鼠活动后喘息明显、耳廓苍白、被毛稀疏干枯且生长缓慢,体质量较空白组明显降低(P<0.05),心、肾组织病理均较空白组有明显改变。[结论]5/6肾切除联合ISO皮下注射制备心肾综合征大鼠模型方法有效,是一种简捷高效的心肾综合征造模方法,可以为心肾综合征动物实验提供模型基础。但该法由于不完全模拟慢性肾功能衰竭导致心力衰竭的自然病程,可能不适用于研究该病早期发展变化规律,而对于心肾综合征的药物治疗评价及机制研究较为合适。

复方何首乌饮对5/6肾切除大鼠肾保护作用的研究

目的探讨复方何首乌饮对5/6肾切除大鼠慢性肾衰竭模型的肾脏保护作用及其可能的机制。方法大鼠行5/6肾切除术制造动物模型,造模成功后给药,于给药前及给药后4、8、12周采集样本,测定24 h尿蛋白、血尿素氮、血清肌酐的量及转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA在肾的表达。结果复方何首乌饮能显著性地降低24 h尿蛋白排泄量(P<0.05),降低血尿素氮、血清肌酐含量(P<0.05),同时抑制大鼠肾TGF-β1 mRNA的表达(P<0.05)。结论复方何首乌饮对5/6肾切除大鼠肾具有保护作用,其可能的机制为抑制TGF-β1 mRNA的表达。

高磷饮食+5/6肾切除制备慢性肾衰竭继发甲状旁腺功能亢进大鼠模型

目的：构建慢性肾衰竭继发甲状旁腺功能亢进大鼠模型，为研究肾性甲旁亢的发病机制及治疗奠定基础。方法：36只8～10周龄健康雄性SD大鼠，体质量200-250g，随机分为6组（n=6）：5／6肾切除高磷饲料组（STNx＋HP）；5／6肾切除低磷饲料组（STNx＋LP）；5／6肾切除正常磷饲料组（STNx＋NP）；假手术高磷饲料组（Sham＋HP）；假手术低磷饲料组（Sham＋LP）；假手术正常磷饲料组（Sham＋NP）。肾切除组大鼠分两步进行肾脏切除，术前1周及2次手术后7、14、21、28d在大鼠眼内眦静脉取血，分别检测大鼠血清中血磷（P）、全段甲状旁腺素（iPTH）水平。术后4周取大鼠残余肾脏及甲状腺与甲状旁腺的复合体，进行病理组织学检查。结果：STNx＋NP组、STNx＋LP组和STNx＋HP组术后存活大鼠数分别为5只、4只和4只；假手术各组大鼠未见死亡。肾切除组术后各时段血清iPTH水平均高于术前和各自假手术组（P〈0．05）；STNx＋HP组血清iPTH水平明显高于STNx＋NP组和STNx＋LP组（P〈0．05）。STNx＋HP组术后各时段血清P水平高于术前和Sham＋HP组（P〈0．05）；而STNx＋NP组、STNx＋LP组与各自假手术组无显著差异，且均低于STNx＋HP组（P〈0．05）。STNx＋HP组大鼠术后28d组织病理学观察可见肾小球纤维化及硬化；甲状旁腺组织观察可见腺体增大，腺体中主要见主细胞及甲状旁腺嗜酸性细胞。结论：高磷饮食合并5／6肾切除可建立大鼠慢性肾功能衰竭继发甲状旁腺功能亢进模型，具有动物成本低，操作方法简便，实验周期短，动物死亡率低等优点。

黑地黄丸对5/6肾切除大鼠肾衰模型血液流变学的影响

目的通过观察黑地黄丸对5/6肾切除大鼠肾衰模型血液流变学的影响,探讨该方对肾脏的保护机制。方法随机将70只Wistar大鼠分为空白组,模型组,尿毒清组、洛丁新组,黑地黄丸高、中、低剂量组7组,除空白组外其他各组大鼠行5/6肾切除术,建立肾衰大鼠模型,分别连续给药12周后测定全血高切黏度(HS)、全血低切黏度(LS)、血浆黏度(PV)、纤维蛋白原(FIB)、红细胞压积(PCV)、红细胞沉降率(ESR)。结果与尿毒清组和洛丁新组比较,黑地黄丸高剂量组大鼠HS(P<0.01)、LS(P<0.01)、PCV(P<0.01)明显升高,大鼠FIB(P<0.01)、ESR(P<0.05)明显降低。结论黑地黄丸高剂量组通过调节HS、LS、PVC水平,下调PV,抑制FIB合成,降低ESR含量,改善肾衰大鼠的血液流变学达到保护肾功能的作用。

抗纤灵冲剂对5/6肾切除大鼠尿微量蛋白干预作用

目的:探讨5/6肾切除大鼠尿微量蛋白的改变以及抗纤灵冲剂干预作用。方法:将40只SD大鼠中30只行5/6肾切除,造模成功后分为正常组、模型组、抗纤灵组、氯沙坦组。药物干预12周后分批处死,留取血液及24小时尿液,检测肾功能(尿素氮、肌酐)以及尿转铁蛋白(TRF)、α1微球蛋白(α1-MG)、β2微球蛋白(β2-MG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)以及24小时尿蛋白定量。结果:抗纤灵组及氯沙坦组较模型组肌酐、尿素氮有所下降,降低α1-MG、β2-MG、NAG、TRF。结论:抗纤灵冲剂可明显改善5/6肾切除大鼠的肾功能,在降低尿微量蛋白方面与氯沙坦等效,可能是抗纤灵冲剂通过改善肾小球通透性,加强肾小管的重吸收来降低各种蛋白尿。

SD大鼠与C57小鼠5/6肾切除慢性肾功能衰竭模型的比较

目的：比较SD大鼠、C57小鼠建立5／6肾切除（5／6 nephrectomy，5／6NX）慢性肾功能衰竭动物模型的异同，选择合适的实验动物以供慢性肾功能衰竭的防治研究。方法将60只SD大鼠和60只C57小鼠分别随机、平均分成5／6肾切除组和假手术组，分别于术后4周、8周、12周三个时间点处死各组老鼠，收集血清和肾组织供肾功能、α－SMA检测分析。结果大、小鼠模型组成活率不存在差异（P＞0．05），大鼠5／6NX组血清肌酐及尿素氮值于8～12周出现稳定状态，异于小鼠5／6NX组。结论 C57小鼠5／6肾切除慢性肾衰模型建立成功。5／6NX大、小鼠组均于术后出现进行性肾功能减退的表现，然其疾病进程不尽相同，临床应根据监测周期长短选择合适的实验动物以准确地反应疾病状态。

胶原抗体联合LPS建立C57BL/6小鼠关节炎模型

胶原抗体诱导性关节炎(CAIA)是一种新颖的关节炎小鼠模型,与胶原诱导性关节炎(CIA)模型相比,CAIA不需要7周以上才出现关节炎表型,对于CIA模型不敏感的品系也有较好的诱导效果。然而,使用的高剂量诱导剂,一方面给小鼠带来严重的不良反应,甚至出现死亡现象,另一方面也导致5-克隆胶原抗体混合物的不必要浪费。降低5-克隆胶原抗体混合物和脂多糖(LPS)的使用剂量,在避免模型小鼠死亡,节约5-克隆胶原抗体混合物的同时,成功高效诱发C57BL/6小鼠关节炎模型,为类风湿关节炎(RA)发病机制的研究提供了有效方法。

慢性肾功能衰竭并肌肉减少症大鼠模型的实验研究

目的探究5/6肾切除法是否能建立慢性肾功能衰竭并肌肉减少症大鼠模型。方法大鼠随机分为对照组、假手术组和5/6肾切除模型组,进一步验证慢性肾功能衰竭及肌肉减少症。结果与假手术组相比:①模型组的尿蛋白定性、血肌酐、血尿素氮、血尿酸水平升高(P<0.05);②模型组的肾脏纤维化程度、凋亡率升高(P<0.05);③模型组的肌肉力量和功能降低(P<0.05);④模型组肌肉组织的纤维化程度明显(P<0.05)。结论通过5/6肾切除法可以构建慢性肾功能衰竭并肌肉减少症动物模型,为进一步防治该疾病提供了实验依据。

温阳活血方延缓5/6肾切除大鼠肾功能衰竭的实验研究

目的:探讨温阳活血方对5/6肾切除大鼠肾功能衰竭的干预作用。方法:选用120只SD雄性大鼠,建立5/6肾切除大鼠模型。随机分为5组:假手术组、模型组、温阳活血方组、科素亚组、温阳活血方+科素亚组。分别在给药后4、8、12周,每组随机选取8只大鼠处死,观察肾组织病理变化,检测肾功能指标。结果:肾脏病理显示,模型组肾小球硬化,肾小管萎缩或消失,肾间质伴有一定程度的纤维化。3个治疗组病理改变有不同程度的好转,温阳活血方组和温阳活血方+科素亚组肾小球硬化程度轻于科素亚组。与假手术组比较,模型组尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、血清胱抑素C(Cys-C)和24h尿蛋白、尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(尿NAG)明显均明显升高(P<0.01,P<0.05);3个治疗组BUN、Scr、Cys-C和24h尿蛋白、尿NAG明显低于模型组(P<0.01)。结论:温阳活血方对慢性肾衰竭大鼠肾功能有一定的保护作用,能降低慢性肾功能衰竭大鼠的Scr、BUN、Cys-C和24h尿蛋白、尿NAG水平。

两种造模方法致大鼠慢性肾衰竭模型的效果比较

目的观察两种造模方法对大鼠慢性肾衰竭模型肾脏损伤的影响,为不同类型慢性肾衰竭动物模型的选择建立提供参考。方法两种方法建立慢性肾衰竭大鼠模型:(1)大鼠5/6肾切除(A组);(2)单侧肾切除联合尾静脉重复注射阿霉素(B组)。分别测定各组大鼠肾功能(尿素氮、肌酐)、血清白蛋白、C反应蛋白(CRP)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,光镜下观察各组大鼠肾脏病理改变,并与正常大鼠(N组)作比较。结果 A组和B组大鼠均有血生化指标和肾脏病理改变,4、8、12周末时,两组大鼠血肌酐、尿素氮、CRP、MDA与N组相比显著增高(P<0.05,P<0.01),白蛋白、SOD与N组相比有显著降低(P<0.05);8周末时A、B组间MDA、SOD差异有统计学意义(P<0.05)。光镜下A、B组大鼠均有肾脏病理改变,肾小球及肾小管、肾间质均有损伤。8周末时,B组较A组肾间质炎症病理改变的程度和范围更加明显。结论单侧肾切除联合尾静脉重复注射阿霉素诱导的慢性肾衰竭模型与5/6肾切除诱导的慢性肾衰竭模型相比,微炎症状态及氧化应激失衡出现更早,肾间质更早出现炎症病理改变。

排毒双调综合疗法对大鼠CRF细胞免疫影响的实验研究

目的:观察排毒双调综合疗法对大鼠慢性肾功能衰竭的治疗作用及其可能的作用机理。方法:采用大鼠5/6肾切除动物模型,分为正常组、病理组、灌胃组、灌胃加灌肠及综合疗法组,观察各组大鼠治疗前后一般状况、血红蛋白(HGb)、肾功能(BUN、Scr)、外周血白细胞CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞的百分比及CD4+/CD8+的比值的变化。结果:综合疗法组较病理组、灌胃组、灌胃加灌肠组外周血白细胞中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD4+/CD8+比例均明显升高(P<0.05),BUN、Scr亦较前述三组明显改善(P<0.01或P<0.05),一般状况及贫血改善情况等也好于前述三组。结论:排毒双调综合疗法能减轻并延缓慢性肾衰竭的病理进展,且较单纯灌胃、灌胃加灌肠疗效为佳,其作用机理可能与改善细胞免疫功能有关。

羟乙基淀粉130/0.4改善大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的:观察羟乙基淀粉(HES)130/0.4(万汶)对缺血再灌注(I/R)损伤心肌的干预作用,探讨其可能的作用机制。方法:24只SD大鼠随机均分为4组(n=6):假手术(S)组、缺血再灌注(IR)组、白蛋白-缺血再灌注(A-IR)组、HES-缺血再灌注(H-IR)组。后3组建立在体大鼠心肌I/R模型,分别在缺血25min时股静脉持续泵入生理盐水、5%白蛋白或HES130/0.4,假手术组行开胸手术但不结扎左冠状动脉前降支。再灌注180min处死大鼠,取心肌组织观察病理学改变;处死前颈动脉采血ELISA法测定TNF-α、IL-1β浓度;测定心肌组织NF-κB活性。结果:H-IR组心肌组织损伤病理学改变较IR组、A-IR组减轻。IR组、A-IR组、H-IR组血清TNF-α、IL-1β水平和心肌NF-κB活性明显高于S组(P<0.05),但其中H-IR组血清TNF-α、IL-1β水平及心肌NF-κB活性上升程度不及IR组、A-IR组(P<0.05)。结论:羟乙基淀粉130/0.4能减轻缺血再灌注所致心肌病理损伤,可能与其抑制NF-κB的活性、减少促炎细胞因子的释放有关。

大鼠慢性肾衰竭模型的建立及体会

目的观察应用大鼠制备慢性肾衰竭模型的效果。方法采用5/6肾切除方法制备慢性肾衰竭模型,分别于术后3周和8周后观察肾功能以及肾脏病理变化。结果造模成功率均达83%以上。手术组3周后出现肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)升高,8周后血清钙降低,血清磷、肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平明显升高,与对照组比较均有统计学意义;手术组镜下出现典型肾小球、肾小管-间质损伤的表现,系膜/肾小球面积比值、肾小管-间质损伤指数与对照组比较有统计学意义。结论应用5/6肾切除可制备稳定的慢性肾衰竭动物模型。