血清5’-核苷酸酶及相关生化指标在肝炎诊断中的应用

目的 :探讨血清 5’ -NT及相关肝功能生化指标在肝炎诊断中的临床应用价值。方法 :应用全自动生化仪检测肝炎组 186例、健康对照组 38例血清 5’ -核苷酸酶及总胆汁酸 (TBA)、胆碱酯酶 (CHE)、白蛋白(ALB)、丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天冬氨酸氨基转移酶 (AST)、碱性磷酸酶 (ALP)、γ -谷氨酰氨转肽酶(GGT)等相关肝功能生化指标 ,对结果进行分析。结果 :在肝炎组病人血清 5’ -NT活性水平升高明显 ,特别是在急性黄疸性肝炎、慢性肝炎 (重度 )中的异常升高率分别达到 92 1%、 10 0 %。其它肝功能生化指标也有不同程度的升高或降低 ,从不同方面反映肝炎患者的肝脏病变。结论 :5’ -NT是各型肝炎诊断的一项较敏感的生化指标 ;多项生化项目联合分析 。

5’-核苷酸酶不同检测系统测量结果一致性探讨

目的5’-核苷酸酶通过理论k值赋值混合血清能否实现不同检测系统结果一致性。方法5’-NT比对实验按照ISO15189和GP29-A替代评估方案,各厂家试剂及配套校准品、Sigma 5’-NT纯品酶校准品、理论K值对新鲜混合血清赋值分别与日立7600-P组成6个不同检测系统,评价在不同检测系统5’-NT检测结果比对一致性及各试剂厂家生物参考区间验证。结果5’-NT在厂家配套校准与赋值血清校准模式下组成测量系统检测30份低、中、高实验样本,厂家配套校准模式样本均数离散较明显,经单因素方差分析组间存在差异,Dunnett's test以A组为对照组与C、D、E组做两两比较存在统计学差异,P<0.0001;理论K值赋值血清校准后各组样本均数趋于一致,经单因素方差分析组间差异无统计学意义,P>0.05;以A组为对照组经相关性分析,发现各组均有较好的相关性。结论国内5’-NT试剂厂家主要有三种量值溯源方式,作为终端用户应选择量值溯源以理论k值或赋值混合血清为校准品实验室间比对,才能保持临床样本检测结果一致性。

5’-核苷酸酶与冠状动脉病变的相关性研究

目的 探讨 5 核苷酸酶与冠心病发病之间的关系。方法 将 177例行冠状动脉造影者分为冠心病组和正常对照组 ,检测其血清 5 核苷酸酶浓度 ,分析血 5 核苷酸酶和冠心病两因素之间的相关性及 5 核苷酸酶与冠状动脉病变积分之间的相关性。结果 与对照组相比 ,冠心病组血清 5 核苷酸酶减低 (p <0 0 5 ) ,血清 5 核苷酸酶和冠心病及冠脉病变积分呈负相关。结论 血清 5 核苷酸酶可能在冠心病的发病中起到一定的保护作用。

不同量值溯源5’-核苷酸酶试剂性能验证及临床结果一致性研究

目的通过性能验证5’-核苷酸酶(5’-NT)试剂相关指标,采用理论k值或赋值血清能否实现多检测系统结果一致性。方法 5’-NT属制造商选定测量程序,比对实验按照ISO15189和GP29-A替代评估方案,利用厂家试剂、配套校准品、Sigma纯品酶校准品、理论K值赋值血清分别与日立7600-P组成6个不同检测系统,实验结果评价可能对选择的商品试剂产生不确定因素,故厂家用英文字母A^F代替,评价5’-NT在不同检测系统结果比对一致性,通过实验对试剂厂家产品主要性能指标进行验证。结果 5’-NT厂家配套与理论K值赋值血清两种校准模式检测30份高、中、低临床样本,厂家配套模式样本均数离散较明显,经One-way analysis方差分析组间差异具有统计学意义(P<0.05);Dunnett’s test以A厂家为对照组与C、D、E组作两两比较差异均具有统计学意义(P<0.05);而理论K值赋值血清校准各组间样本均数趋于一致,经单因素方差分析组间差异无统计学意义(P>0.05);各厂家试剂性能指标精密度、线性、稀释度、相关性比对均达到产品要求,其中D厂家不符合生物参考区间验证程序;抗坏血酸浓度达4.0 mg/dL时,B、C、D出现严重负干扰;血红蛋白浓度达2.0 g/L时除A厂家外其余厂家均有不同程度负干扰;6个厂家甘油三酯达25.3 mmol/L均无干扰现象。结论 5’-NT试剂厂家量值溯源方式不同,终端用户采用理论k值或赋值血清为校准品实验室间进行比对,才能实现多检测系统结果一致性;检测原理过氧化物酶法必须对抗坏血酸和血红蛋白抗干扰验证,以评估临床样本结果可接受。

脑脊液腺苷脱氨酶与血清5’-核苷酸酶在结核性脑膜炎诊断中的价值

目的探讨脑脊液腺苷脱氨酶(CSF-ADA)与血清5’-核苷酸酶(5’-NT)在结核性脑膜炎诊断与鉴别诊断中的价值。方法回顾性分析40例结核性脑膜炎患者(病例组)与36例病毒性脑膜炎患者(对照组)的一般资料、脑脊液、血液学及影像学检查结果,重点探讨CSF-ADA与血清5’-NT在结核性脑膜炎中的诊断价值。结果病例组CSF-ADA和血清5’-NT水平显著高于对照组(P<0.001)。根据CSF-ADA与血清5’-NT的接收者操作特性曲线(ROC),CSF-ADA>4.40 U/L或血清5’-NT>4.85 U/L被认为是诊断的阳性结果,显示出高的敏感性与特异性,CSF-ADA的敏感度为92.5%,特异度为89%;血清5’-NT的敏感度为95%,特异度为70%。当联合CSF-ADA与血清5’-NT诊断结核性脑膜炎,即CSF-ADA>4.40 U/L或(和)血清5’-NT>4.85 U/L,其敏感性最高,其灵敏度为97.5%,特异度为73.5%,阳性似然比(PLR)为3.68,阴性似然比(NLR)为0.03。结论在结核性脑膜炎的诊断中,CSF-ADA与血清5’-NT可以起到快速、简单、相对准确的诊断作用。当CSF-ADA或(和)血清5’-NT明显升高时,可尽早怀疑结核性脑膜炎,同时结合临床表现、其他脑脊液、血液学及影像学结果综合诊断。

5’-核苷酸酶等4项血清酶学指标联合检测对肝胆疾病的诊断价值

目的探讨联合检测血清5’-核苷酸酶（5＇-NT）、亮氨酸氨基肽酶（LAP）、γ-谷氨酰转移酶（GGT）和碱性磷酸酶（ALP）在肝胆疾病诊断中的价值。方法应用全自动生化分析仪检测238例肝胆疾病患者和93例健康成人血清5＇-NT、LAP、GGT和ALP活性，并对检测结果进行统计分析。结果各肝胆疾病组患者4项血清酶学指标均明显高于正常对照组；血清5＇-NT活性以淤胆性肝炎和原发性肝癌组升幅最大；血清LAP、ALP活性以淤胆性肝炎组升幅尤为显著；血清GGT活性以原发性肝癌组升幅尤为显著。结论联合检测血清5’-NT、LAP、GGT和ALP活性对提高肝胆疾病尤其是胆汁淤积的诊断效率和明确鉴别诊断有重要意义。

术前血清5’-核苷酸酶水平在尿路上皮癌恶性程度和定位中的诊断价值

目的探讨术前血清5’-核苷酸酶(5’-NT)水平在尿路上皮癌(urothelium carcinoma,UC)恶性程度及定位中的诊断价值。方法对2017年1月至2022年1月在山东大学齐鲁医院住院的397例经病理证实为UC的患者的临床数据进行回顾性研究。收集了患者术前血清5’-NT水平与其他的临床病理特征并进行相关性分析。接受者操作特征(receiveroperating characteristic,ROC)曲线被用来确定约登指数的最佳诊断临界值,而后通过单因素和多因素logistic回归模型来进一步确定5’-NT最佳临界值在预测UC恶性程度及定位中的独立相关性。结果血清5’-NT水平在UC患者的肿瘤复发、侵袭性和病理分级不同组间均无统计学差异。5’-NT水平在上尿路UC的定位中存在统计学差异。单因素与多因素logistic回归模型证实5’-NT(<4.5U/L)是上尿路尿路上皮癌中肾盂UC定位的独立预测因素(输尿管vs.肾盂:HR=3.121,P=0.023;膀胱vs.肾盂:HR=3.233,P=0.008)。结论术前血清5’-NT水平不能作为UC恶性程度的可靠预测因子,但是可以作为上尿路UC定位的独立生物标志物。当5’-NT<4.5U/L的UC时,应高度怀疑肾盂恶性肿瘤。

5’-核苷酸酶测定及其在肝胆疾病中的诊断价值

目的采集研究对象血液分别测定5’-核苷酸酶(5’-NT)和碱性磷酸酶(ALP),对5’-NT在临床诊断肝胆系统疾病中的符合度等方面进行探讨研究。方法使用北京万泰德瑞诊断技术有限公司的5’-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)对所选择的665例健康人,191例肝胆患者,以及25例骨病患者进行测定;并测定全部患者ALP的水平。结果 5’-NT的测定结果不会受到性别因素、年龄因素的影响;各类肝胆疾病组5’-NT水平显著高于健康人对照组与骨病组,具有显著性差异(P<0.05)。结论 5’-NT对肝胆系统疾病的诊断具有较高的特异性,与ALP联合检测可以鉴别肝胆疾病与骨病,提高测定的准确性。

自制5’-核苷酸酶试剂在生化检验中的应用

目的：评价自主研发的5’-核苷酸酶试剂（速率法）在自动化检测血清或血浆中5’-核苷酸酶活性的应用。方法：采用奥林巴斯AU680全自动生化分析仪，通过重复性、线性试验、测定血清或血浆中5’-核苷酸酶活性，进行方法学评价并与美国Diazyme 5’-核苷酸酶试剂（速率法）比较。结果：两个水平质控中酶活性的变异系数（CV）分别为2.83%和1.96%，在5～200 U/L酶活范围内，线性良好。两种试剂测定血清5’-核苷酸酶活性的相关系数较好，相关系数r为0.995。结论：自主研发的5’-核苷酸酶试剂盒操作简便、快速、准确、稳定，结果准确，可满足大批量临床样本的常规和自动化分析，是一种值得推广的方法。

颗粒蛋白前体、5’-核苷酸酶、单胺氧化酶、总胆汁酸、甘胆酸联合检测在肝脏疾病诊断中价值探究

探讨联合检测颗粒蛋白前体(Progranulin, PRGN)、5’-核苷酸酶(5’-nucleotidas, 5’-NT)、单胺氧化酶(Monoamine Oxidase, MAO)、总胆汁酸(Total Bile Acids,TBA)和甘胆酸(Glycholic Acids, GA)在肝脏疾病中诊断价值。方法 选取上海交通大学附属仁济医院宝山分院2019年8月~2021年5月109例住院肝病患者为肝病组,同期80例健康体检者为对照组,比较两组血清中这五项的表达水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析各指标单独与联合检测对肝病的诊断价值,确定曲线下面积(AUC) 、最佳界值与相应的灵敏度、特异度。以临床诊断为金标准,经Kappa检验分析五项指标联合诊断肝病与临床诊断的一致性,并分析灵敏度、特异度、符合率、阳性预测值和阴性预测值。结果 与对照组相比,18例急性肝炎,23例慢性肝炎,31例肝硬化,重型肝12例炎,25例肝脏肿瘤患者血清中这五项数值均明显升高,且升高有统计学意义(P<0.05)。血清颗粒蛋白前体、5’-核苷酸酶、单胺氧化酶、总胆汁酸、甘胆酸诊断常见肝病的AUC分别为0.788、0.784、0.760、0.816和0.802,联合检测的AUC为0.991。以血清颗粒蛋白前体>23.3µg/L、5’-核苷酸酶>13.25 U/L、单胺氧化酶> 12.4 U/L、总胆汁酸>18.0 μmol/L、甘胆酸> 4.2 μg/mL时,发生肝病的风险越高。指标联合诊断肝病的灵敏度为92.8%,特异度为92.3%,符合率为92.6%,阳性预测值为94.5%,阴性预测值为90.0%,经 Kappa检验其与临床诊断一致性为0.848(高度一致性)。结论 5’-核苷酸酶、单胺氧化酶、总胆汁酸、甘胆酸在肝病患者中表达明显升高。

微域环境及外源物质对苹果果实5'-核苷酸酶活性的影响

果实所处的微域环境对果皮组织中5-核苷酸酶活性有很大影响。无论套袋与否,均以树冠西南方位果实的酶活性最高。由于套袋提高了微域环境温度,果实5-核苷酸酶活性均显著高于不套袋处理。不同类型果袋所形成的微域环境不同,对果实5-核苷酸酶活性影响的效应有异。在一定范围内,缓慢持续升温或起伏升温都有利于果实5-核苷酸酶活性的提高,但如果升温时间太短,或温差变化太大,则不利于酶活性的提高。果实在35℃、40℃或48℃处理温度下,高湿状态均有利于果实5-核苷酸酶活性的提高。4种外源活性氧处理均使果实5-核苷酸酶活性显著下降,而外源CaCl2处理果实酶活性比对照提高了55.39%。

长期传代后HL-60细胞内5'-核苷酸酶-Ⅱ基因表达与阿糖胞苷耐药性的关系

目的观察白血病细胞株(HL-60)及其耐药细胞株(HL-60/R)胞浆5'-核苷酸酶-Ⅱ(CN-Ⅱ)基因表达,以及长期传代后的变化规律,探索CN-Ⅱ与Ara-C疗效及耐药机制的相关性。方法采用RT-PCR方法测定HL-60和HL-60/R的细胞内CN-ⅡmRNA表达,并通过体外培养传代,检测长期传代(5、10、20、30、40、50代)后CN-ⅡmRNA表达变化。结果培养初期结果显示,HL-60和HL-60/R的CN-ⅡmRNA表达水平分别为0.23±0.04和0.47±0.05,HL-60/R的CN-ⅡmRNA表达水平明显高于HL-60(P<0.05)。经长期培养传代至10、20、30、40和50代,各传代检测节点的HL-60和HL-60/R细胞内CN-ⅡmRNA表达水平均无明显变化(P均>0.05)。上述各传代检测节点,HL-60/R的CN-ⅡmRNA表达水平均明显高于HL-60(P均<0.05)。结论 HL-60、HL-60/R细胞中CN-ⅡmRNA表达差异有统计学意义。经长期传代后,上述差异持续存在,提示CN-Ⅱ表达与Ara-C的疗效相关,但在长期传代后,变化并不明显,可能与Ara-C耐药现象的发生无关。

红细胞嘧啶5’-核苷酸酶缺乏症9例并文献复习

目的:探讨红细胞嘧啶5’-核苷酸酶(P5’N)缺乏症患者的临床特征、实验室检查特点、治疗方法。方法:回顾性分析9例P5’N缺乏症患者的临床资料和实验室检查特点并复习相关文献。结果:9例患者均有不同程度贫血,其他症状包括:脾大7例,黄疸6例,胆石症2例,肝大1例。2例患者并发β-地中海贫血,1例并发丙酮酸激酶(PK)缺乏。4例可分析病例中2例患者的母亲同时存在P5’N缺乏。4例患者需要输血治疗。结论:遗传性P5’N缺乏症特点是红细胞P5’N活性下降,外周血可见嗜碱性点彩红细胞。获得性P5’N缺乏症可见于β-地中海贫血等疾病。

血清5'-核苷酸酶在消化道恶性肿瘤的诊断价值

目的探讨血清5'-核苷酸酶(5'-NT)在消化道恶性肿瘤患者中的诊断价值。方法采用日立公司7170A全自动动生化分析仪测定60例健康人对照、42例肝癌患者、13例结肠癌患者及22例胃癌患者的5'-NT水平。结果表明肝癌及结肠癌等患者5'-NT显著高于健康人平均水平,P<0.01及P<0.05,而胃癌患者5'-NT显著低于健康人的水平(P<0.05)。结论测定血清5'-NT的活性对消化道恶性肿瘤的诊治有重要意义。

血清5'-核苷酸酶酶法测定的实验研究

目的 对血清5'-核苷酸酶(5'-NT)酶法测定的原理及自动化分析法之精密性、准确性等内容进行较深入的探讨,为其临床应用提供方法学支持。方法 使用浙江东瓯公司5'-NT酶法试剂盒在SYNCHRON CX9全自动生化分析仪上建立自动化分析程序,并对其检测时间、精密性、准确性、线性等内容进行测定。结果 本法λmax=510nm,开始检测时间定为419s(739s-320s),结束检测时间定为515s(835s-320s)。批内和批间CV(％)分别为1.98-2.52和4.53-4.92,线性范围达0-250 U／L,回收率(％)为98.7-102.3,正常参考范围(x±2s)为3.66-10.5 U／L。结论 酶法测定5'-NT简便快捷、结果准确可靠,是目前5'-NT测定较为理想的方法。

胞外5'-核苷酸酶在鳞状细胞癌、恶性黑素瘤中的作用及意义

研究胞外5'-核苷酸酶(CD73)在恶性肿瘤中的作用,为抗肿瘤的治疗提供新的思路;本文简述了CD73的结构与基本功能,CD73在肿瘤新生血管、鳞状细胞癌、恶性黑素瘤等恶性肿瘤生长、侵袭、转移过程中的作用,总结CD73在恶性肿瘤治疗过程中的意义。

采用ROC曲线评价a-L-岩藻糖苷酶,5-核苷酸酶,甲胎蛋白在肝癌诊断、预后预测中的价值

目的探讨a-L-岩藻糖苷酶(AFU)、5-核苷酸酶(5’-NT)、甲胎蛋白(AFP)检测对原发性肝癌(PHC)的诊断价值。方法肝癌患者(肝癌组)40例,手术后6个月,根据肝癌是否复发,分为复发组和非复发组。另入选健康体检者(对照组)60例,测定3组AFU、5’-NT、AFP水平,应用受试者工作曲线(ROC)评估三者对肝癌的诊断和预测价值。结果 AFU、5’-NT和AFP在肝癌组和对照组间比较差异均有统计学意义。AFU、5’-NT和AFP 3种指标单独检测时,ROC曲线下面积分别为0.904,0.870,0.866。手术前以及手术后复发组AFU浓度均高于非复发组。手术前以及手术后复发组5’-NT浓度与非复发组相比差异无统计学意义。手术后复发组AFP血清浓度高于非复发组,手术前复发组AFP血清浓度与非复发组相比差异无统计学意义。结论通过ROC曲线评价,检测AFU和5’-NT两种指标可用于对PHC的诊断,AFU可以用于肝癌预后的预测。

α-地中海贫血伴嘧啶5’-核苷酸酶缺乏患者的基因检测及其红细胞内酶活性变化

目的探讨α-地中海贫血患者基因检测的临床意义，及其红细胞内嘧啶5’-核苷酸酶（P5’N）、丙酮酸激酶（PK）及葡萄糖α-磷酸脱氢酶（G-6-PD）活性的变化。方法选取就诊于我院的3例α-地中海贫血患者，用PCR-反向点杂交法和跨跃断裂位点PCR（gap—PCR）法进行基因分析，检测260、280nm处吸光度（A）值，分析P5’N活性；用荧光斑点法检测PK和G-6-PD活性。结果3例患者红细胞均呈小细胞低色素性，外周血涂片易见靶形红细胞及嗜碱性点彩红细胞。2例患者出现中度贫血，伴脾脏中度肿大、高胆红素血症及LDH升高，血红蛋白电泳可见一条快速带，血红蛋白醋酸纤维素薄膜电泳HbH含量明显升高；1例无症状患者未见上述异常。3例α-地中海贫血患者的基因型分别为（-α-/--SEA）、（ααQS／__SEA）和（--SEA），均存在P5’N活性降低，PK及G-6-PD活性未见异常。结论α-地中海贫血可伴P5’N活性降低，基因检测对理-地中海贫血患者的诊断及其家系筛查具有重要临床价值。

基于RNA-Seq的5’-核苷酸酶基因挖掘及真核表达分析

为进一步阐明5’-核苷酸酶(5’-NT)在菌类中药虫草素生物合成中的作用机理,本研究依据已经建立好的中华被毛孢RNA-Seq数据信息,设计目的基因引物,从中成功克隆到1个5’-NT基因,并在毕赤酵母中实现了异源表达。测序结果证实该基因全长1968 bp,共编码656个氨基酸残基。BLAST分析表明其与NCBI中5’-核苷酸酶的最高同源性达98%;ProtProm分析表明相对分子质量为72.989 kD,等电点为5.83;利用Predict Protein预测了二级结构,α螺旋结构占21.04%,延伸链结构占21.49%,无规则卷曲结构占57.47%。本研究为人工调控虫草素的生物合成提供更充分的科学依据和新思路。

5′-核苷酸酶测定的临床应用分析

目的:比较不同系统疾病5′-核苷酸酶(5′-NT)水平,分析其临床意义及价值。方法:采用5′-IMP(次黄嘌呤)速率法测定5′-NT,统计分析各组疾病的5′-NT水平及酶活力升高者所占百分比,并与碱性磷酸酶(AKP)进行比较。结果:肿瘤组27.8%病例5′-NT活力升高;肝胆疾病5′-NT与碱性磷酸酶相平行;在甲亢、成骨细胞活性升高时,AKP升高而5′-NT不升高。结论:5′-NT适用于肝胆疾病检查,弥补AKP的不足,对部分肿瘤有辅助诊断价值。