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离子交换色谱法分析ATP研究 被引量:2
1
作者 王龙耀 阮莉姣 +2 位作者 谢小瑜 童张法 雷爱祖 《药物生物技术》 CAS CSCD 2005年第4期239-241,共3页
文章针对ATP生产的现场检测过程,建立了一个以离子交换树脂为分离介质的色谱分析方法,并对其分析效果进行了试验研究。色谱条件为:D201树脂柱(Φ6 mm×500mm),流动相分别为pH值3.0的乙酸溶液和pH值9.0、1.5 mol/L的NaCl溶液,检测波... 文章针对ATP生产的现场检测过程,建立了一个以离子交换树脂为分离介质的色谱分析方法,并对其分析效果进行了试验研究。色谱条件为:D201树脂柱(Φ6 mm×500mm),流动相分别为pH值3.0的乙酸溶液和pH值9.0、1.5 mol/L的NaCl溶液,检测波长254 nm,流速10 ml/min,室温23±2℃。检测重复性较好, 在0.1-8 g/L范围内,ATP浓度与ATP峰面积呈较好线性关系,r=0.997 7;平均回收率为98.60%.整个色谱过程可在30min内完成。 展开更多
关键词 5’-三磷酸腺苷 色谱 分析方法
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化学位移估算研究ATP构象随溶液pH值的变化 被引量:3
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作者 姜凌 毛希安 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第9期796-801,共6页
利用Johnson和Bovey的理论和方法计算了不同扭曲角χ(O4'-C1'-N9-C4)的ATP(5'-三磷酸腺苷)分子中糖环质子H1'和H2'由于环流效应引起的化学位移.H1'的化学位移与扭曲角χ有较强的依赖关系,反映了ATP在溶液中细... 利用Johnson和Bovey的理论和方法计算了不同扭曲角χ(O4'-C1'-N9-C4)的ATP(5'-三磷酸腺苷)分子中糖环质子H1'和H2'由于环流效应引起的化学位移.H1'的化学位移与扭曲角χ有较强的依赖关系,反映了ATP在溶液中细微的构象变化.将计算结果与实验结果比较,证明在本文讨论的pH值范围(1~10)内,Mg2+加入后,ATP的扭曲角χ在230°~360°范围内变化.随溶液的pH值减小,ATP分子的构象由trans构象通过-gauche构象转变为cis构象.从而证明在酸性条件下,ATP倾向于以cis构象存在,而在碱性条件下trans构象更为稳定,从另一方面支持了在酸性条件下N1参与配位而在碱性条件下N7参与配位的结论.在讨论中也考虑了由pH变化所引起的环流强度的变化. 展开更多
关键词 构象 PH值 化学位移 atp 5'-三磷酸腺苷 金属离子 配位
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外源ATP对摄磷烟草悬浮细胞生长和活性氧代谢的影响
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作者 冯汉青 王娟娟 +2 位作者 达晓伟 杨德丽 庞海龙 《西北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第4期87-93,共7页
以BY-2烟草悬浮细胞为实验材料,探究了在缺磷及正常磷供应下外源ATP对烟草悬浮细胞生长和活性氧代谢的影响.结果表明,较之缺磷下生长的细胞,正常磷供应下细胞活力降低,细胞鲜重显著增加,H_(2)O_(2)含量上升而抗氧化酶活性有所下降,其中... 以BY-2烟草悬浮细胞为实验材料,探究了在缺磷及正常磷供应下外源ATP对烟草悬浮细胞生长和活性氧代谢的影响.结果表明,较之缺磷下生长的细胞,正常磷供应下细胞活力降低,细胞鲜重显著增加,H_(2)O_(2)含量上升而抗氧化酶活性有所下降,其中过氧化物酶(POD)活性的下降最为明显.对缺磷的细胞添加外源ATP使得细胞活性降低,细胞鲜重增加,H_(2)O_(2)含量上升,POD和超氧化物歧化酶(SOD)活性下降,过氧化氢酶(CAT)活性上升.对正常磷供应下的细胞添加外源ATP则导致细胞活性升高,细胞鲜重增加,H_(2)O_(2)含量降低,POD和CAT活性升高,SOD活性下降.上述结果表明,在缺磷及正常磷供应下胞外ATP对细胞的生长和活性氧代谢具有不同的调控作用. 展开更多
关键词 磷供应 胞外三磷酸腺甘(atp) 细胞活力 过氧化氢(H_(2)O_(2)) 抗氧化酶
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一步自溶法生产ATP的新工艺 被引量:1
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作者 平健坤 吕慧梅 《南京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1989年第2期361-364,共4页
新鲜白地霉菌体中核糖核酸(RNA)的含量为5%,白地霉菌体在一定条件下自溶‘菌体中的 RNA 则降解成为5′—核苷酸溶于溶液中,核苷酸收率按菌体中核酸含量计算为80%左右。5′—核苷酸经离交换柱层析法分离得到—磷酸腺苷(AMP)收率为18.5%。... 新鲜白地霉菌体中核糖核酸(RNA)的含量为5%,白地霉菌体在一定条件下自溶‘菌体中的 RNA 则降解成为5′—核苷酸溶于溶液中,核苷酸收率按菌体中核酸含量计算为80%左右。5′—核苷酸经离交换柱层析法分离得到—磷酸腺苷(AMP)收率为18.5%。由 AMP 制得三磷酸腺苷(AMP)的收率为110%,产品 ATP 含量最高达98.5%,平均在92%左右,经过三年生产实践证实本工艺是有效和切实可行的。 展开更多
关键词 白地霉 自溶 三磷酸腺苷 atp
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Changes in the Contents of ATP and Its Related Breakdown Compounds in Various Tissues of Oyster During Frozen Storage 被引量:13
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作者 WANG Qi XUE Changhu LI Zhaojie FU Xueyan XU Jie XUE Yong 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS 2007年第4期407-412,共6页
The changes in the contents of adenosine 5’-triphosphate (ATP) and its related breakdown compounds were investigated in the adductor muscle, mantle, gill and body trunk of oyster (Crassostrea gigas) during frozen sto... The changes in the contents of adenosine 5’-triphosphate (ATP) and its related breakdown compounds were investigated in the adductor muscle, mantle, gill and body trunk of oyster (Crassostrea gigas) during frozen storage at -20℃ and -30℃ and compared with that of the fresh oyster. The investigation was performed using an HPLC system. Different extents of ATP decomposi- tion were found in various tissues frozen at the two temperatures. The K, K’ and A.E.C values were calculated as the chemical fresh- ness indices. Considering the results of sensory evaluation, the A.E.C. value in body trunk at -20℃ and -30℃ could be used as the best freshness index for frozen oyster. 展开更多
关键词 牡蛎 腺苷5'-三磷酸盐 冰冻食品 新鲜度
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三磷酸腺苷的电喷雾质谱裂解规律研究 被引量:8
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作者 刘继红 曹书霞 +2 位作者 卢建莎 廖新成 赵玉芬 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期283-287,共5页
采用电喷雾离子阱质谱仪对正负离子模式下5′-三磷酸腺苷(adenosine 5′-triphosphate,ATP)的各种离子[ATP+H]+、[ATP-nH+(n+1)Na]+(n=0~4)、[ATP-H]-的裂解规律进行了系统研究,并提出可能的裂解过程。实验发现在裂解过程中,ATP脱去γ... 采用电喷雾离子阱质谱仪对正负离子模式下5′-三磷酸腺苷(adenosine 5′-triphosphate,ATP)的各种离子[ATP+H]+、[ATP-nH+(n+1)Na]+(n=0~4)、[ATP-H]-的裂解规律进行了系统研究,并提出可能的裂解过程。实验发现在裂解过程中,ATP脱去γ-磷酸时,不仅是P—O键断裂,还存在三磷酸链上β-P‖O中O先夺去碱基上的氨基或核糖环上的羟基中H、N或O再亲核进攻磷引发结构重排,脱去γ-磷酸得到一系列碎片离子。利用理论计算解释了2种重排途径的可能性与碎片离子的丰度差异。 展开更多
关键词 5'-三磷酸腺苷(atp) 电喷雾多级质谱 裂解规律 理论计算
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利用生物发光技术检测微量焦磷酸 被引量:1
7
作者 姚群峰 徐顺清 周宜开 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期45-47,共3页
利用生物发光技术建立了一种高灵敏度的检测微量焦磷酸 ( PPi)的新方法。其原理是首先利用 ATP硫酰化酶 ( ATP sulfurylase)将焦磷酸 ( PPi)定量转化成ATP,然后利用虫荧光素酶 ( Luciferase)系统发光检测 ATP的量 ,从而确定样品中PPi的... 利用生物发光技术建立了一种高灵敏度的检测微量焦磷酸 ( PPi)的新方法。其原理是首先利用 ATP硫酰化酶 ( ATP sulfurylase)将焦磷酸 ( PPi)定量转化成ATP,然后利用虫荧光素酶 ( Luciferase)系统发光检测 ATP的量 ,从而确定样品中PPi的含量。本法快速、灵敏 ,线性范围为 1× 1 0 - 9~ 5× 1 0 - 7mol/ L。方法用于 PCR扩增样品中 PPi的检测 。 展开更多
关键词 生物发光技术 检测 焦磷酸 三磷酸腺苷 微量分析 atp 能量代谢
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三磷酸腺苷生物发光法快速测定食品中细菌的含量 被引量:6
8
作者 林玲 陈惠 郭广生 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期26-30,共5页
建立了测定食品中细菌三磷酸腺苷(—帅)的生物发光分析方法。生物发光原理基于萤光素酶、虫萤光素、氧气、ATP和Mg^2+的催化氧化反应。产生的光信号强度与ATP含量成一定关系。考察了各种物理化学参数对反应的影响。反应体系最优化条... 建立了测定食品中细菌三磷酸腺苷(—帅)的生物发光分析方法。生物发光原理基于萤光素酶、虫萤光素、氧气、ATP和Mg^2+的催化氧化反应。产生的光信号强度与ATP含量成一定关系。考察了各种物理化学参数对反应的影响。反应体系最优化条件:pH7.4、牛血清白蛋白(BSA)浓度为1.0g/L和室温反应。方法检出限为1.0×10^12mol/L。线性范围1.0×10^-7-1.0×10^-11mol/L,分析时间30min,批内变异和批间变异分别小于4%和5%。研究了部分食品中细菌检测的样品前处理方法,应用于糕点和饮料样品中细菌的测定,加标回收率范围为82.1%~115%。检测结果与传统培养方法检测结果相关性良好。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷 生物发光 细菌 萤光素酶
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高效液相色谱法测定细胞内三磷酸腺苷及其代谢物的含量(英文) 被引量:7
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作者 朱会宇 吴丹妮 汪海林 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期54-58,共5页
研究了三磷酸腺苷(ATP)及其代谢物在细胞内的含量以及2-叔丁基-1,4-苯醌(TBBQ)对ATP及其代谢产物在细胞内含量的影响。建立了一种高效液相色谱法(HPLC)用于快速分离、检测细胞内ATP及其代谢产物(二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP))的含... 研究了三磷酸腺苷(ATP)及其代谢物在细胞内的含量以及2-叔丁基-1,4-苯醌(TBBQ)对ATP及其代谢产物在细胞内含量的影响。建立了一种高效液相色谱法(HPLC)用于快速分离、检测细胞内ATP及其代谢产物(二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP))的含量。使用岛津高效液相系统及艾杰尔Venusil MP C18柱,采用等度洗脱的方式。流动相A相为50 mmol/L磷酸氢二钠和15 mmol/L三甲胺(TEA),用醋酸(HAc)调节pH至7.88;流动相B相为甲醇。采用建立的高效液相色谱法得到了3种代谢物的工作曲线,相关系数高(R^2≥0.999 6),MRC-5细胞中3种代谢物的含量均在线性范围(0.1~100μmol/L)内。该方法检出限低。采用预冷的80%(体积分数)甲醇水溶液提取细胞内的代谢物。该研究建立的方法成功地应用于检测MRC-5细胞中的ATP、ADP和AMP的含量,结果表明,TBBQ会对ATP、ADP、AMP在细胞内的含量产生影响,但TBBQ浓度和ATP、ADP以及AMP在MRC-5细胞内浓度的关系比较复杂。 展开更多
关键词 高效液相色谱 三磷酸腺苷 醌类 代谢产物 细胞内
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Spectrofluorimetric Study on the Weak Interaction between ATP and Na-4-Tosyl-L-arginine Methyl Ester Hydrochloride 被引量:3
10
作者 马彦青 吕功煊 +2 位作者 李颖 刘书花 鲜亮 《Chinese Journal of Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2007年第9期1253-1258,共6页
In this paper, some new results on the selective weak interaction between Na-4-tosyl-L-arginine methyl ester hydrochloride (TAME) and adenosine-5'-triphosphate (ATP) have been reported. Fluorescence spectrophotom... In this paper, some new results on the selective weak interaction between Na-4-tosyl-L-arginine methyl ester hydrochloride (TAME) and adenosine-5'-triphosphate (ATP) have been reported. Fluorescence spectrophotometry and Fourier transform infrared (FT-IR) spectroscopy were used to investigate this kind of weak interaction. In fluorescence experiments, obvious fluorescence quenching phenomena were observed when TAME was added, which indicated the weak interactions between TAME and ATP. It has been identified by fluorescence titration experiments that TAME exhibited high selectivity to ATP over ADP and AMP. FT-IR spectral results showed that an ATP-TAME adduct was formed. The experimental results indicated that the interaction sites were the guanidinium group of TAME main-chain and the γ-phosphate group of ATP, and the interaction took place through hydrogen bonding and electrostatic force. In addition, the effects of metal ions on the weak interaction between ATP and TAME, or between ATP and analogues of L-arginine were studied. 展开更多
关键词 Na-4-tosyl-L-arginine methyl ester hydrochloride adenosine-5'-triphosphate atp binding site fluorescence quenching Fourier transform infrared (FT-IR) spectra
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Fluorescent probes for recognition of ATP
11
作者 Ying Wu Jia Wen +2 位作者 Hongjuan Li Shiguo Sun Yongqian Xu 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2017年第10期1916-1924,共9页
Adenosine 5'-triphosphate(ATP) not only participates in various physiological activities as the universal energy currency but also implicates in various pathological processes in living cells. Consequently,sensitiv... Adenosine 5'-triphosphate(ATP) not only participates in various physiological activities as the universal energy currency but also implicates in various pathological processes in living cells. Consequently,sensitive and selective detection ATP in live cells, tissues, as well as environmental samples, are urgently demanded. Due to the simple and convenient operation, economy cost, high selectivity for analyte, well biocompatibility and low cytotoxicity, fluorescent sensors for monitoring ATP have aroused great attention of researchers. In recent years, a large number of fluorescent sensors for detecting ATP have developed. This manuscript summarized most of these sensors and the interaction-mechanism between ATP and sensors, mainly including electrostatic interaction, p-p interaction, covalent bonding or hydrogen bond, or combinations of them, and the advantages of each strategy were also generalized.Here, a viewpoint of classification was shown where the sensors were divided into five typed ones according to the structure of probes used. 展开更多
关键词 Fluorescent probes adenosine 5'-triphosphate(atp Cell imaging Sensitive detection Multi-interactions Recognition mechanism
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基于生物发光及光学校准的致病菌检测系统
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作者 胡春华 杨中娟 《光电子.激光》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1759-1764,共6页
为提高食品中致病菌快速检测的准确性,设计了一种基于三磷酸腺苷(ATP,adenosine 5′-triphosphate)生物发光反应动力学数据拟合以及光学校准的食品致病菌检测系统。采用与ATP生物发光波长相同的LED模拟生物发光,对检测样品的光吸收及... 为提高食品中致病菌快速检测的准确性,设计了一种基于三磷酸腺苷(ATP,adenosine 5′-triphosphate)生物发光反应动力学数据拟合以及光学校准的食品致病菌检测系统。采用与ATP生物发光波长相同的LED模拟生物发光,对检测样品的光吸收及散射进行校准,从而减小食品颜色及浊度的干扰。采用光电倍增管(PMT)连续记录ATP生物发光强度数据,基于生物发光反应动力学方程自动对发光强度数据拟合,减小系统噪声并提高仪表的测量范围。研究了基于LED的光学校准算法,基于ATP生物发光动力学研究了数据拟合算法,进而设计实现了致病菌检测系统。对金黄色葡萄球菌样品的检测结果表明,本文系统与传统培养计数方法相关性达到0.98,检测致病菌范围为102~108 CFU/mL,对单一样品测量的精密度为5.05%。本文系统设计为生物发光在食品安全检测领域的实际应用提供了新的思路,具有重要实际意义。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷(atp)生物发光 致病菌检测 LED光学校准 反应动力学 数据拟合
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