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金属有机框架Cu@Sc-MOF纳米酶对5'-三磷酸腺苷的比色/荧光检测
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作者 柴小静 赵瑞瑞 +2 位作者 张羱 董川 双少敏 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期728-738,共11页
通过溶剂热法制备了一种铜/钪金属有机框架(Cu@Sc-MOF)纳米酶,在H2O2存在下,Cu@Sc-MOF可催化氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)得到蓝色氧化产物oxTMB,并在652 nm处产生特征吸收峰。同样,Cu@Sc-MOF也可氧化邻苯二胺(OPD)生成2-氨基吩嗪... 通过溶剂热法制备了一种铜/钪金属有机框架(Cu@Sc-MOF)纳米酶,在H2O2存在下,Cu@Sc-MOF可催化氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)得到蓝色氧化产物oxTMB,并在652 nm处产生特征吸收峰。同样,Cu@Sc-MOF也可氧化邻苯二胺(OPD)生成2-氨基吩嗪(DAP),并在570 nm产生特征荧光发射峰(激发波长为390 nm)。由于5’-三磷酸腺苷(ATP)与Cu2+络合,抑制了Cu@Sc-MOF的催化活性,使得652 nm处的吸光度和570 nm处的荧光强度减弱,基于Cu@Sc-MOF的类过氧化物酶活性,构建了一种用于检测ATP的比色/荧光双模式光谱法。比色和荧光分析法的线性范围分别为2.50~40.00μmol/L和1.00~22.50μmol/L,检出限(LOD)分别为0.60和0.27μmol/L。将上述比色/荧光双模式分析法用于肝癌细胞HepG2细胞裂解液中ATP的检测,加标回收率分别为92.0%~101%和93.2%~97.9%,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 Cu@Sc-MOF 纳米酶 类过氧化物酶活性 比色/荧光 5-磷酸
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5′-磷酸腺苷(5′-AMP)体外抗氧化作用的研究 被引量:2
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作者 钱佳 施用晖 +1 位作者 马立芹 乐国伟 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2008年第1期89-92,共4页
目的:研究5′-磷酸胞苷(5′-AMP)清除活性氧自由基能力及对体外氧化损伤脾细胞的损伤修复能力;方法:采用化学比色法测定5′-AMP清除羟自由基和DPPH自由基的能力,建立H2O2氧化损伤体外培养脾细胞模型,用MTT法检测5′-AMP的修复作用,以评... 目的:研究5′-磷酸胞苷(5′-AMP)清除活性氧自由基能力及对体外氧化损伤脾细胞的损伤修复能力;方法:采用化学比色法测定5′-AMP清除羟自由基和DPPH自由基的能力,建立H2O2氧化损伤体外培养脾细胞模型,用MTT法检测5′-AMP的修复作用,以评价5′-磷酸腺苷(5′-AMP)的体外抗氧化能力;结果:5′-磷酸腺苷具有剂量依赖性的清除羟自由基和修复脾细胞氧化损伤的能力,但是5′-AMP的DPPH清除能力比较弱。20mmol/L5′-AMP的羟自由基清除能力高达53.009%,而DPPH清除率为17.190%;10mmol/L5′-AMP清除羟自由基和DPPH自由基的能力分别相当于7.5mmol/LVC和0.02mmol/LVC;与对照组相比,添加0.5,1,5,10mmol/L5′-AMP均能极显著(P<0.01)地修复H2O2诱导的脾细胞氧化损伤,其中10mmol/L5′-AMP作用最强;结论:5′-磷酸腺苷具有显著的抗氧化作用。 展开更多
关键词 5'-磷酸(5-amp) 抗氧化剂 自由基 细胞培养
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5-羟色胺和环磷酸腺苷对睡眠的影响 被引量:41
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作者 朱国庆 钟明奎 +4 位作者 张景行 越乐章 柯道平 王敏 施蕾 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期141-143,共3页
目的研究杏仁核中5羟色胺(5HT)和环磷酸腺苷(cAMP)对大鼠睡眠的影响。方法多导睡眠描记和杏仁核微量注射。结果5HT前体5羟色氨酸(5HTP)引起慢波睡眠、快波睡眠和总睡眠时间增多,入睡潜伏期缩短;5... 目的研究杏仁核中5羟色胺(5HT)和环磷酸腺苷(cAMP)对大鼠睡眠的影响。方法多导睡眠描记和杏仁核微量注射。结果5HT前体5羟色氨酸(5HTP)引起慢波睡眠、快波睡眠和总睡眠时间增多,入睡潜伏期缩短;5羟色胺受体阻断剂二甲麦角新碱(MS)对睡眠无直接影响,但可完全阻断5HTP的促睡眠效应;cAMP可引起慢波睡眠和总睡眠时间延长,入睡潜伏期缩短。结论杏仁核参与睡眠觉醒调节,杏仁核中5HT和cAMP有明显的促睡眠效应。 展开更多
关键词 5-羟色胺 磷酸 睡眠 杏仁核
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5'-磷酸腺苷对小鼠脾细胞氧化应激损伤的保护作用 被引量:2
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作者 钱佳 施用晖 +1 位作者 马立芹 乐国伟 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期238-241,共4页
目的研究5'-磷酸腺苷(5'-AMP)体外抗氧化和对体外氧化损伤脾细胞的损伤修复能力。方法用化学比色法测定5'-AMP体外清除二苯代苦味酰基自由基(DPPH自由基)的能力;建立过氧化氢(H2O2)氧化损伤体外培养小鼠脾细胞模型,用MTT法... 目的研究5'-磷酸腺苷(5'-AMP)体外抗氧化和对体外氧化损伤脾细胞的损伤修复能力。方法用化学比色法测定5'-AMP体外清除二苯代苦味酰基自由基(DPPH自由基)的能力;建立过氧化氢(H2O2)氧化损伤体外培养小鼠脾细胞模型,用MTT法检测5'-AMP修复受损伤脾细胞的作用,并分析其对细胞抗氧化体系及抗氧化能力的影响。结果5'-AMP具有剂量依赖性的体外抗氧化和清除活性氧能力,添加0·5mmol/L、1mmol/L、5mmol/L和10mmol/L5'-AMP均能显著修复H2O2诱导的脾细胞氧化损伤(P<0·05),总抗氧化能力和抗氧化酶类活力(P<0·01),5'-AMP添加量大于1mmol/L时,可显著降低丙二醛(MDA)含量(P<0·01)。其细胞培养液的氧自由基(ROS)水平逐渐降低,5'-AMP添加量为10mmol/L时,ROS水平接近对照组水平。结论5'-磷酸腺苷能显著修复氧化损伤,具有显著的抗氧化作用。 展开更多
关键词 5′-磷酸(5′-amp) 抗氧化剂 自由基 细胞培养
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5’-单磷酸腺苷在水和乙醇/水体系中的溶解度模型 被引量:2
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作者 马骏 张磊 +3 位作者 史隽 吴永宏 应汉杰 肖明芳 《生物加工过程》 CAS CSCD 2007年第2期61-66,共6页
以固-液平衡理论溶解度模型、适用于非理想体系的λh方程为理论基础,结合本实验结晶条件,采用静态法测定了5’-单磷酸核苷(5’-AMP)在纯水以及不同配比乙醇/水体系中的溶解度,建立了5’-AMP水和乙醇/水体系的结晶热力学模型。显示该体... 以固-液平衡理论溶解度模型、适用于非理想体系的λh方程为理论基础,结合本实验结晶条件,采用静态法测定了5’-单磷酸核苷(5’-AMP)在纯水以及不同配比乙醇/水体系中的溶解度,建立了5’-AMP水和乙醇/水体系的结晶热力学模型。显示该体系属于缔合引起的非理想溶液,并计算水及乙醇/水体系的溶解热和结晶热,为5’-单磷酸腺苷的工业结晶生产提供了热力学数据。 展开更多
关键词 5-磷酸 溶解度 结晶热力学
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多酶催化合成3’-磷酸腺苷-5’-磷酰硫酸反应体系的构建及优化 被引量:1
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作者 李晓燕 蔡谨 +2 位作者 杭宝建 黄磊 徐志南 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第1期119-125,共7页
3’-磷酸腺苷-5’-磷酰硫酸(PAPS)是目前发现的唯一的"活性"硫酸基团供体,在生物肝素酶法硫磺化反应中起到重要作用,但化学合成的成本高。如何大量低成本制备PAPS是实现酶法合成肝素工业化的关键因素。本文克隆表达了酶法合成... 3’-磷酸腺苷-5’-磷酰硫酸(PAPS)是目前发现的唯一的"活性"硫酸基团供体,在生物肝素酶法硫磺化反应中起到重要作用,但化学合成的成本高。如何大量低成本制备PAPS是实现酶法合成肝素工业化的关键因素。本文克隆表达了酶法合成PAPS的两个酶:三磷酸腺苷(ATP)硫化酶和5’-腺苷磷酰硫酸(APS)激酶。构建了一条体外合成PAPS的途径。首先利用ATP硫化酶将ATP转化生成APS,同时产生副产物无机焦磷酸(PPi),APS再在APS激酶作用下转化生成PAPS。研究了Mg2+浓度、缓冲体系和p H、温度以及无机焦磷酸水解酶(PPase)的添加对该酶反应的影响。通过添加无机焦磷酸水解酶(PPase),极大提高了PAPS的转化率。在最优条件下考察不同ATP浓度下PAPS随时间的积累量变化,发现反应过程中存在底物抑制作用;ATP浓度为50 mmol?L?1时,反应25 h,PAPS的积累量为18.87 mmol?L?1。反应过程中分批补料ATP,能极大提高催化效率。反应11.5 h,PAPS积累量可达20.36 mmol?L?1(10.32 g·L?1),转化率为81.4%。 展开更多
关键词 3’-磷酸-5-磷酰硫酸 ATP硫化酶 APS激酶 分批补料
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微小RNA-218-5p靶向三磷酸腺苷结合盒超家族G家族第2个成员基因对人口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:1
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作者 魏薇 唐祎 +1 位作者 代婧 陈胡杰 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第10期984-988,共5页
目的:研究微小RNA(microRNA,miR)-218-5p靶向调控三磷酸腺苷结合盒超家族G家族第2个成员(ATP-binding cassette sub-family G member 2,ABCG2)基因对Tca-8113细胞的增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制。方法:运用实时荧光定量聚合酶... 目的:研究微小RNA(microRNA,miR)-218-5p靶向调控三磷酸腺苷结合盒超家族G家族第2个成员(ATP-binding cassette sub-family G member 2,ABCG2)基因对Tca-8113细胞的增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制。方法:运用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)与Western blot检测Tca-8113细胞和NOK细胞中miR-218-5p和ABCG2的表达。通过双荧光素酶报告基因实验检测miR-218-5p和ABCG2靶向关系。用脂质体法将miR-218-5p mimic、ABCG2小干扰RNA(interfering RNA,siRNA)、miR-218-5p mimic+pcDNA-ABCG2分别转染至Tca-8113细胞中,噻唑蓝(methyl thiazol tetrazolium,MTT)法、Transwell法检测Tca-8113细胞的增殖、迁移和侵袭。结果:与NOK细胞比较,Tca-8113细胞miR-218-5p呈显著低表达,ABCG2呈显著高表达(P<0.05)。过表达miR-218-5p、抑制ABCG2均可抑制Tca-8113细胞的增殖和迁移(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-218-5p与ABCG2的靶向结合关系。过表达ABCG2可逆转上调miR-218-5p对Tca-8113细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:上调miR-218-5p的表达可靶向调控ABCG2,抑制Tca-8113细胞的增殖、迁移和侵袭,将可为口腔鳞状细胞癌的治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 微小RNA-218-5p 磷酸结合盒超家族G家族第2个成员 增殖 迁移侵袭
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N^6-(6-氨基己基)-5′-磷酸腺苷的合成(英文) 被引量:1
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作者 周乐 史远刚 +1 位作者 李键 王建辰 《西北农业大学学报》 CSCD 1996年第2期17-20,共4页
由肌苷开始经五步合成出N6-(6-氮基己基)-5’-磷酸腺苷。对6-氯-9β-D-呋喃核糖嘌呤的合成进行了改进。1,6-己二胺同6-氯-9β-D呋喃核糖嘌呤-5’-磷酸发生取代反应,合成出N6-(6-氮基己基)-5′... 由肌苷开始经五步合成出N6-(6-氮基己基)-5’-磷酸腺苷。对6-氯-9β-D-呋喃核糖嘌呤的合成进行了改进。1,6-己二胺同6-氯-9β-D呋喃核糖嘌呤-5’-磷酸发生取代反应,合成出N6-(6-氮基己基)-5′-磷酸腺苷,基于核苷的总产率约70%。 展开更多
关键词 5′-磷酸 酶免疫测定 亲和层析
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环磷腺苷中5′-磷酸腺苷的纸色谱鉴别 被引量:1
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作者 陈华 陈波 《广东药学院学报》 CAS 2003年第4期329-329,共1页
目的 :改进环磷腺苷中 5′ 磷酸腺苷的纸色谱鉴别方法。方法 :采用 ψ( 4 %醋酸铵溶液 ∶ 75 %乙醇 ) =2 ∶5为展开剂 ,调节供试品溶液 pH值与对照品溶液一致。结果 :5′ 磷酸腺苷Rf值增大 。
关键词 环磷 5-磷酸 纸色谱
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苦瓜蛋白MD28对Caco-2细胞胆固醇转运及三磷酸腺苷结合盒转运体5和8表达的影响
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作者 王佐 宋砚明 张晓蕾 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期597-597,共1页
关键词 苦瓜蛋白MD28 Caeo-2细胞 磷酸结合盒转运体G5 磷酸结合盒转运体G8 胆固醇转运
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腺苷脱氨酶、5′-核苷酸酶及谷胱甘肽还原酶联合检测在评估乙型肝炎患者肝损伤中的临床价值
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作者 黄倩 郭守俊 《延边大学医学学报》 CAS 2024年第2期152-154,共3页
[目的]探讨腺苷脱氨酶(ADA)、5′-核苷酸酶(5′-NT)及谷胱甘肽还原酶(GR)联合检测在评估乙型肝炎(CHB)患者肝损伤中的临床价值.[方法]选择2020年1月—2024年6月间就诊的72例CHB患者列入实验组,按照肝损伤不同程度分为轻度组(n=39)、中度... [目的]探讨腺苷脱氨酶(ADA)、5′-核苷酸酶(5′-NT)及谷胱甘肽还原酶(GR)联合检测在评估乙型肝炎(CHB)患者肝损伤中的临床价值.[方法]选择2020年1月—2024年6月间就诊的72例CHB患者列入实验组,按照肝损伤不同程度分为轻度组(n=39)、中度组(n=25)、重度组(n=8),另选择同期健康体格检查的72例健康者列入对照组.采集所有研究对象血液样本,检测并比较各组血清ADA、5′-NT、GR水平.[结果]实验组血清ADA、5′-NT、GR水平均明显高于对照组(P<0.05);肝损伤重度组患者的血清ADA、5′-NT、GR水平明显高于中度组、轻度组,中度组血清ADA、5′-NT、GR水平明显高于轻度组,相比较差异均有统计学意义(P<0.05).[结论]血清ADA、5′-NT、GR联合检测可应用于CHB临床辅助诊断及肝损伤程度评估中,为临床诊断与治疗方案制定提供依据. 展开更多
关键词 乙型肝炎 肝损伤 脱氨酶 5′-酸酶 谷胱甘肽还原酶
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运动激活骨骼肌5′-一磷酸腺苷激活的蛋白激酶的分子机制
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作者 张国华 曾凡星 《中国体育科技》 CSSCI 北大核心 2007年第2期87-90,126,共5页
运动导致骨骼肌细胞内的能量平衡状态被破坏,因此,机体恢复与维持能量状态的平衡对运动能力有重要影响,5′-一磷酸腺苷激活的蛋白激酶(5′-AMP activated protein kinase,AMPK)作为细胞内的能量监控器具有这种作用。AMPK在一次性运动中... 运动导致骨骼肌细胞内的能量平衡状态被破坏,因此,机体恢复与维持能量状态的平衡对运动能力有重要影响,5′-一磷酸腺苷激活的蛋白激酶(5′-AMP activated protein kinase,AMPK)作为细胞内的能量监控器具有这种作用。AMPK在一次性运动中能以强度和时间依赖性方式激活,其机制主要与运动中AMP/ATP比值改变有关,AMP通过3条途径激活AMPK:直接别构激活;使AMPK成为上游激酶的更适底物;阻遏蛋白磷酸酶对AMPK的抑制,ATP与AMP的作用相拮抗。其他能量状态的变化如磷酸肌酸、肌酸、葡萄糖和肌糖原也对AMPK的激活产生影响。阐明运动激活AMPK的分子机制对理解骨骼肌在运动中的能量代谢具有一定意义。 展开更多
关键词 5-磷酸激活的蛋白激酶 AMP/ATP比值 磷酸肌酸 骨骼肌 运动
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5-磷酸腺苷诱导低温对大鼠内毒素血症的影响 被引量:1
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作者 杜娜 卢恕来 +3 位作者 潘新亭 苗志敏 江涛 王云龙 《青岛大学医学院学报》 CAS 2013年第3期213-215,218,共4页
目的探讨5-磷酸腺苷(5′-AMP)诱导的低温对大鼠内毒素血症的影响。方法选用健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为空白对照组、脂多糖(LPS)炎症组、5′-AMP低温治疗组、5′-AMP低温预防组。LPS炎症组采用腹腔注射LPS来制备内毒素血症模型;5′... 目的探讨5-磷酸腺苷(5′-AMP)诱导的低温对大鼠内毒素血症的影响。方法选用健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为空白对照组、脂多糖(LPS)炎症组、5′-AMP低温治疗组、5′-AMP低温预防组。LPS炎症组采用腹腔注射LPS来制备内毒素血症模型;5′-AMP低温治疗组是在LPS腹腔给药后,大鼠体温升高0.5℃时给予5′-AMP进行低温干预;5′-AMP低温预防组是先注射5′-AMP制备低温动物模型,然后给予LPS进行炎症诱导。应用ELISA法测定LPS注射后3、6和12h大鼠血清中炎症因子的浓度,用苏木精-伊红染色法对大鼠肺组织进行病理分析。结果与LPS炎症组比较,5′-AMP诱导的低温能明显降低血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6水平,显著提高血清中抗炎症因子IL-10水平,差异有统计学意义(F=2.50~26.73,q=6.36~214.85,P<0.05)。病理分析显示,5′-AMP诱导的低温能明显抑制LPS诱导的急性肺损伤。结论 5′-AMP诱导的低温对LPS所致大鼠内毒素血症和急性肺损伤有显著的治疗和预防作用。 展开更多
关键词 脂多糖类 内毒素血症 5磷酸 低温 大鼠
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一磷酸腺苷活化蛋白激酶对环氧合酶-2表达与5氟-尿嘧啶治疗结肠癌敏感性的关系 被引量:1
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作者 陈琦 梁后杰 +1 位作者 邹岚 朱江 《实用医院临床杂志》 2008年第3期56-58,共3页
目的探讨一磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)对环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达及结肠癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗敏感性的影响。方法选用HT-29结肠癌细胞株,按照HT-29细胞的培养液不同,分为空白对照组(常规培养)、5-Fu培养组、5-氨基咪唑-4-甲酰胺核... 目的探讨一磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)对环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达及结肠癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗敏感性的影响。方法选用HT-29结肠癌细胞株,按照HT-29细胞的培养液不同,分为空白对照组(常规培养)、5-Fu培养组、5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(AICAR)培养组、5-Fu+AICAR培养组。用western blot法测定各组中P-ACC和COX-2的表达,并分别于培养6、12、24小时分析5-Fu培养组和5-Fu+AICAR培养组中P-ACC和COX-2的表达水平的变化;用MTT法检测12、24、48小时各组细胞的存活率。结果5-Fu组作用后COX-2蛋白上调,AICAR致P-ACC表达后,可下调COX-2蛋白的表达;5-Fu联合AICAR可降低细胞存活率。结论AMPK的激活可能下调COX-2表达,并可能提高以5-Fu治疗为基础的结肠癌化疗敏感性。 展开更多
关键词 磷酸活化蛋白激酶 环氧合酶-2 5-氟尿嘧啶 结肠癌 化疗敏感性
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多酶一锅法合成硫酸基供体3′-磷酸腺苷-5′-磷酸硫酸(PAPS)
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作者 岳继恒 储梦萍 +1 位作者 储建林 何冰芳 《生物加工过程》 CAS 2023年第6期632-641,共10页
以腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)等为原料,来源于乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的ATP硫酸化酶(ATPS)和来源于产黄青霉菌(Penicillium chrysogenum)的APS激酶(APSK)构建的多酶催化体系可合成3′-磷酸腺苷-5′-磷酸硫酸(PAPS)。同时,在... 以腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)等为原料,来源于乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的ATP硫酸化酶(ATPS)和来源于产黄青霉菌(Penicillium chrysogenum)的APS激酶(APSK)构建的多酶催化体系可合成3′-磷酸腺苷-5′-磷酸硫酸(PAPS)。同时,在酶法合成PAPS的反应体系中引入铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)来源的无机焦磷酸水解酶(PPase),消耗反应过程中的副产物PPi,使得反应向生成PAPS的方向进行,大幅提高多酶法合成PAPS的产率。本研究构建了重组质粒pET-28a-sumo-ATPS、pET-28a-APSK和pET-28a-PPase,并在大肠杆菌中表达了重组酶,研究酶学性质和优化多酶催化反应合成PAPS的反应条件,以提高PAPS的产量水平,最终PAPS的累积量为14.47 g/L。该工艺可大幅降低PAPS的制备成本。 展开更多
关键词 3′-磷酸-5′-磷酸硫酸 ATP硫酸化酶 APS激酶 无机焦磷酸水解酶
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环状RNA-胞裂蛋白2/miR-150-5p/聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1分子轴在重症急性胰腺炎中的作用及机制研究
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作者 罗玉龙 朱秋平 +3 位作者 范琳 欧阳灿晖 黄利兴 谢军 《当代医学》 2023年第36期1-6,共6页
目的探讨环状RNA(circRNA)-胞裂蛋白2(SEPT2)/miR-150-5p/聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)分子轴在重症急性胰腺炎(SAP)中的作用及机制。方法选取2019年12月至2021年12月赣南医学院第一附属医院收治的46例SAP患者作为重症组;并选取本... 目的探讨环状RNA(circRNA)-胞裂蛋白2(SEPT2)/miR-150-5p/聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)分子轴在重症急性胰腺炎(SAP)中的作用及机制。方法选取2019年12月至2021年12月赣南医学院第一附属医院收治的46例SAP患者作为重症组;并选取本院同期收治的41例轻症急性胰腺炎(MAP)患者作为轻症组;另选取本院同期35名健康体检者作为对照组。3组均采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定血清circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1基因表达量,采用急性生理和慢性健康评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评估病情严重程度;采用重组慢病毒包装合成有效感染序列sh-SEPT2(干扰组)与过表达序列oe-SEPT2(过表达组)建立动物模型,采用酶联免疫吸附试验测定大鼠生化指标[白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、D乳酸及二胺氧化酶(DAO)],采用RT-PCR及Western blot法检测大鼠circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1及细胞凋亡相关基因半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9 mRNA表达。比较3组circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1基因表达量及APACHEⅡ评分,采用Pearson相关性分析SAP患者PARP-1与circRNA-SEPT2、miR-150-5p及APACHEⅡ评分的相关性;比较干扰组与过表达组大鼠苏木精-伊红染色法(HE)结果、肠黏膜损伤评分、炎症因子水平及cir-cRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1和Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达量。结果重症组circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1基因表达量及APACHEⅡ评分均高于轻症组和对照组,且轻症组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性结果显示,SAP患者PARP-1与circRNA-SEPT2、miR-150-5p及APACHEⅡ评分均呈正相关(r>0,P<0.05)。干扰组HE染色下胰岛细胞界限清晰,胰岛丰富,胞浆丰富,形态完整;过表达组大鼠胰岛细胞界限不清,胰岛数量较少,细胞形态不规则,细胞体积较大,边缘不齐;干扰组胰腺损伤评分为(2.58±0.16)分,低于过表达组的(3.95±0.53)分,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰组IL-1β、IL-18、TNF-α、D乳酸及DAO水平均低于过表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰组大鼠circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1 mRNA表达及细胞凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达量均低于过表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PARP-1通过靶向作用于circRNA-SEPT2/miR-150-5p参与SAP的发生与发展,抑制circRNA-SEPT2表达,可减轻SAP肠黏膜屏障损伤,能为SAP治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 环状RNA-胞裂蛋白2 miR-150-5p 磷酸核糖聚合酶-1 重症急性胰 作用机制
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新型苦味屏蔽剂5’-腺苷单磷酸钠的合成 被引量:2
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作者 王三永 李春荣 +1 位作者 庄俊钰 谢志桥 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期149-149,156,共2页
以次黄嘌呤为原料,经氯代、缩合、氨解、磷酸化、中和五步反应制备新型苦味屏蔽剂5’-腺苷单磷酸钠,总收率达37.0%。
关键词 5'-磷酸 次黄嘌呤 合成 苦味屏蔽剂
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乙醇和锌离子对爪蟾卵母细胞表达的5′-三磷酸腺苷门控P2X3受体的影响
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作者 徐珍 张玉芹 韩书清 《实用临床医药杂志》 CAS 2021年第21期15-20,共6页
目的探讨乙醇和锌离子(Zn^(2+))对爪蟾卵母细胞表达的重组P2X3受体的影响。方法使用双极电压钳技术检测乙醇和Zn^(2+)对爪蟾卵母细胞表达的P2X3受体介导的5′-三磷酸腺苷(ATP)门控电流的影响。实验共分3组,第1组研究不同浓度乙醇对爪蟾... 目的探讨乙醇和锌离子(Zn^(2+))对爪蟾卵母细胞表达的重组P2X3受体的影响。方法使用双极电压钳技术检测乙醇和Zn^(2+)对爪蟾卵母细胞表达的P2X3受体介导的5′-三磷酸腺苷(ATP)门控电流的影响。实验共分3组,第1组研究不同浓度乙醇对爪蟾卵母细胞表达的P2X3受体介导的ATP电流的影响,存在或不存在乙醇的情况下,P2X3受体的ATP量-效曲线;第2组研究不同浓度Zn^(2+)对爪蟾卵母细胞表达的P2X3受体介导的ATP电流的影响,存在或不存在Zn^(2+)的情况下,P2X3受体的ATP量-效曲线;第3组研究乙醇和Zn^(2+)共同作用于爪蟾卵母细胞表达的ATP门控P2X3受体的影响。结果乙醇(5~200 mmol/L)可逆性地增强了爪蟾卵母细胞中表达的P2X3受体的ATP门控功能,乙醇以变构的方式增强ATP效应,乙醇不会改变Hill系数或ATP最大效应(E_(max))。Zn^(2+)(1~300μmol/L)可逆性地增强了爪蟾卵母细胞中表达的P2X3受体的ATP门控功能,乙醇和Zn^(2+)联合应用导致协同作用。乙醇增强了Zn^(2+)对P2X3受体介导的ATP门控电流的最大效应,这表明乙醇和Zn^(2+)作用于不同的位点。结论乙醇和Zn^(2+)可能作用于P2X3受体上的不同位点,但乙醇在P2X受体上起作用的机制和位点尚未明确,后续研究可以使用嵌合方法和定点突变来识别和分析P2X受体中乙醇潜在的作用位点。 展开更多
关键词 P2X受体 电压钳 爪蟾卵母细胞 离子通道 5′-磷酸
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腺苷-3’,5’-环磷酸-氧蒽酮希夫碱的合成及其与LC3B的绑定结合
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作者 周超群 汤石鹏 +2 位作者 钱亮亮 甄政安 程如梅 《温州医科大学学报》 2021年第7期570-573,共4页
目的:设计合成具有LC3B绑定功能的腺苷-3’,5’-环磷酸-氧蒽酮希夫碱(S1),研究其对LC3B的作用机制。方法:以紫外-可见光谱表征S1和LC3B的分子结合动力学,运用一级反应动力学进行数据拟合,采用荧光光谱测定二者的结合常数和热力学常数,... 目的:设计合成具有LC3B绑定功能的腺苷-3’,5’-环磷酸-氧蒽酮希夫碱(S1),研究其对LC3B的作用机制。方法:以紫外-可见光谱表征S1和LC3B的分子结合动力学,运用一级反应动力学进行数据拟合,采用荧光光谱测定二者的结合常数和热力学常数,推导出分子结合机制。结果:S1在160 s快速结合LC3B,结合过程满足一级反应动力学方程和药物的定比转运规律,热力学研究发现S1与LC3B结合的吉布斯自由能变化小于零,为自发结合过程,焓变小于0进一步表明S1和LC3B通过静电吸引结合,导致S1的荧光猝灭,S1通过希夫碱的C=N官能团与LC3B发生相互作用。结论:S1可以自发地通过静电作用绑定细胞自噬标志物LC3B。 展开更多
关键词 自噬 LC3B -3’ 5-磷酸 氧蒽酮 相互作用
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稀土元素对5′-腺苷酸和5′-鸟苷酸的催化水解作用 被引量:4
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作者 康玉专 沈鹤柏 +2 位作者 胡岗 罗衍庆 章宗穰 《上海师范大学学报(自然科学版)》 1999年第4期65-71,共7页
用HPLC法研究了稀土金属离子RE3+ (如La3+ ,Ce3+ ,Nd3+ ,Sm 3+ ,Eu3+ )对5′-腺苷一磷酸(5′-AMP)和5′-鸟苷一磷酸(5′-GMP)的催化水解断裂作用. 结果表明:在温和条件下,稀土... 用HPLC法研究了稀土金属离子RE3+ (如La3+ ,Ce3+ ,Nd3+ ,Sm 3+ ,Eu3+ )对5′-腺苷一磷酸(5′-AMP)和5′-鸟苷一磷酸(5′-GMP)的催化水解断裂作用. 结果表明:在温和条件下,稀土金属离子对5′-AMP无明显的断裂作用,而Ce3+ 对5′-GMP有较好的断裂作用,当浓度降至0.05m m ol/L时,Eu3+ 对5′-GMP也有一定的断裂作用;H2O2 能促进稀土金属离子对5′-AMP的水解断裂作用;pH 对稀土金属离子水解切断5′-AMP有影响. 展开更多
关键词 稀土金属离子 5′-磷酸 5′-磷酸 水解断裂作用
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