TS、Ki-67及P53在结直肠癌原发灶及转移淋巴结中的表达及与5-FU化疗敏感性的关系

目的探讨结直肠癌原发灶及转移淋巴结中胸腺嘧啶核苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)、Ki-67和p53表达差异性,并探究其对预测5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)敏感性的价值。方法选取有淋巴结转移的结直肠腺癌患者33例,采用免疫组织化学方法检测结直肠癌淋巴结转移灶及原发灶中TS、Ki-67和P53的表达情况。结果TS高表达、p53和Ki-67在转移淋巴结的表达率显著高于原发灶;较好预后的即对5-FU化疗敏感的病例共7例,其中在转移淋巴结及原发癌中TS均为低表达率,p53、Ki-67为阴性表达。结论转移淋巴结中的p53、TS、Ki-67的表达情况同原发灶相比有异质性变化,转移淋巴结TS表达情况可以预测结直肠癌患者对5-FU化疗敏感性,p53的表达情况或许可预测结直肠癌患者对5-FU的化疗敏感性,Ki-67表达与5-FU化疗敏感性的关系仍需要进一步研究。

正源负源比较液质联用测定酶解液中脱氧核苷酸含量

目的:建立一种快速灵敏的同时测定DNA酶解液中5′-腺嘌呤脱氧核苷酸(dAMP)、5′-胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dT-MP)、5′-鸟嘌呤脱氧核苷酸(dGMP)、5′-胞嘧啶脱氧核苷酸(dCMP)的超高效液相色谱质谱(UPLC-MS)方法。方法:采用UPLC-MS色谱质谱系统,安捷伦ZORBAXSBAq-C18柱(4.6mm×250mm,5μm);以20mmol.L-1醋酸铵缓冲盐溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱(0～10min,B相从5%→10%;10～11min,B相从10%→90%;11～15min,B相为90%;15～16min,B相从90%→5%;16～18min,B相为5%),流速0.6mL·min-1;在电喷雾正离子模式下,采用多反应监测模式(MRM)选择性监测5′-腺嘌呤脱氧核苷酸(dAMP)(m/z332.1/81.1和332.1/136.2)、5′-胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTMP)(m/z323.1/81.1和323.1/207.2)、5′-鸟嘌呤脱氧核苷酸(dGMP)(m/z348.1/152.1348.1/313.3)和5′-胞嘧啶脱氧核苷酸(dCMP)(m/z308.1/81.1和308.1/112.1)。结果:5′-腺嘌呤脱氧核苷酸(dAMP)、5′-胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTMP)、5′-鸟嘌呤脱氧核苷酸(dGMP)和5′-胞嘧啶脱氧核苷酸(dCMP)的线性范围分别为34.8～1160.0ng.mL-1(r=0.9997),32.8～820.0ng.mL-1(r=0.9997),60.0～1200.0ng.mL-1(r=0.9990),37.6～940.0ng.mL-1(r=0.9998),检出限分别为9.4,8.48,11.43,10.35ng·mL-1;定量限分别为31.35,28.28,38.10,34.50ng·mL-1;样品加标回收率为71.1%～117.2%;日内、日间精密度试验的RSD为0.94%～4.99%。结论:该方法快捷,灵敏度高,专一性强,重复性好,可用于DNA酶解液中4种脱氧核苷酸的分析。

新型选择性肿瘤化疗药物──卡培他滨

卡培他滨是一种新型的口服氟嘧啶核苷类似物 ,在体内需经三个步骤最终酶解为 5 氟尿嘧啶 (5 FU)而发挥抑制肿瘤的作用。其活性与肿瘤内胸腺嘧啶脱氧核苷磷酸化酶 (dThdPase)的表达紧密相关 ,已证实dThdPase在多种肿瘤组织中表达水平升高 ,因此 ,卡培他滨可选择性地在肿瘤组织内被激活。本文综述了卡培他滨的药理学特性和治疗晚期结肠直肠癌、转移性乳腺癌等的临床试验 ,表明卡培他滨可替代静脉应用 5 FU作为有效的口服选择性肿瘤化疗药物。

绿舒筋对艾氏腹水癌细胞DNA、RNA及蛋白质合成代谢的影响

本文采用核素前体掺入法研究了绿舒筋对艾氏腹水癌(EAC)细胞DNA、RNA和蛋白质合成的影响。该药在0.1～5mg/ml范围内,不同程度地抑制~3H-TdR、~3H-UR和~3H-Leu掺入到EAC细胞的DNA、RNA和蛋白质中,呈浓度依赖性。去除绿舒筋后,~3H标记物掺入曲线呈递增型,与5-FUdR掺入曲线相似,提示绿舒筋是通过干扰癌细胞及蛋白质代谢发生抗癌作用的,而非损伤DNA模板药物。

基于化学成分差异的不同干燥方式熊胆粉镇痛作用研究

目的采用超高效液相-三重四极杆-线性离子阱质谱(UPLC-QTRAP-MS)方法鉴定常压及减压干燥熊胆粉的化学成分,明确其差异成分,并以网络药理学理念为指导,探索熊胆粉镇痛作用机制。方法基于UPLC-MS/MS检测平台、数据库以及多元统计分析相结合的手段研究熊胆粉的化学成分差异;借助PharmMapper、Uniprot、GeneCards数据库及文献,获取熊胆粉成分和病毒性肝炎、胆囊炎及冠心病的作用靶点,并采用动物试验对其药效进行验证;对疾病靶标-药物靶标集做拓扑分析获得核心靶标,并进行基因本体(GO)功能和基因与信号通路分析(KEGG)通路富集,通过Cytoscape3.8.2软件构建成分-靶标-通路网络图。结果常压干燥、减压干燥熊胆粉共有成分721个,差异成分8个(L-焦谷氨酸、鸟苷5′-单磷酸水合物、5,6-二氢胸腺嘧啶、7-甲基黄嘌呤、左旋甲状腺素、甲基间酪氨酸、大黄素8-葡萄糖苷、益母草碱),搜索得到差异成分潜在靶点共1605个;检索得到病毒性肝炎靶点7444个、胆囊炎靶点636个、冠心病靶点7563个;熊胆粉对病毒性肝炎、胆囊炎及冠心病的共同靶点有282个,GO功能富集分析得到GO条目759个(P<0.05),其中生物过程(BP)条目717个,细胞组成(CC)条目21个,分子功能(MF)条目21个;熊胆粉中的鸟苷5′-单磷酸水合物、甲基间酪氨酸、左旋甲状腺素及大黄素8-葡萄糖苷等成分可能通过二氢硫辛酸脱氢酶(dihydrolipoyl dehydrogenase,DLD)、过氧化氢酶(atalase,CATC)及一氧化氮合酶2(nitric oxide synthase 2,NOS2)等靶点,调节代谢通路和癌症通路等信号通路发挥其镇痛作用。药效试验结果表明常压、减压干燥熊胆粉均对热板及醋酸所致小鼠疼痛有抑制作用,且减压组镇痛作用强于常压组,有显著性差异(P<0.05)。结论干燥方式使得熊胆粉化学成分变异,从而导致其镇痛作用差异,初步探索了熊胆粉镇痛作用的机制,建议大生产中采用减压干燥制备熊胆粉,为熊胆粉合理应用提供了一定依据。