PCB118暴露对青春期雄性ICR小鼠精子发生的影响及机制

目的观察青春期雄性ICR小鼠暴露PCB118对精子发生的损害作用,探究其与睾酮合成过程相关的作用机制。方法36只4周龄雄性ICR小鼠随机分为3组,每组12只,每日ig给予PCB118(50和500μg·kg^(-1))或溶媒(玉米油),连续4周。给药结束后计算脏器系数;HE染色观察睾丸组织病理变化,统计曲细精管直径、生精上皮厚度和精原细胞相对数目;检测附睾精子数目、精子活力和精子畸形率;用放射免疫法检测血清睾酮水平;RT-qPCR法检测睾丸中与睾酮合成相关的酶和雄激素受体(Ar)mRNA水平;Western印迹法和免疫组织化学法检测AR蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达。结果与溶媒对照组相比,PCB118500μg·kg^(-1)组肝系数明显下降(P<0.01),PCB1182个剂量组睾丸、附睾、肾和脾系数均无显著变化。PCB1182个剂量组睾丸组织中出现精原细胞缺失、曲细精管空泡化,曲细精管直径、生精上皮厚度和精原细胞相对数目均显著下降(P<0.05,P<0.01);附睾中精子数量显著减少,畸形率显著增加(P<0.05),但精子活力无显著变化;血清睾酮水平显著下降(P<0.05);睾丸中Ar及与睾酮合成相关的酶类固醇合成急性调节酶、胆固醇侧链裂解酶、3β-羟基类固醇脱氢酶、17-20裂解酶和17β-羟基类固醇脱氢酶的mRNA表达水平显著下降(P<0.05);AR和PCNA蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论PCB118导致生精细胞增殖抑制,精子质量下降,该作用与其降低血清睾酮水平、下调睾酮合成相关酶mRNA水平、降低AR蛋白和mRNA表达以及降低PCNA蛋白表达有关。

原代培养大鼠睾丸支持细胞PCB153暴露后超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量的时间变化特征

目的探讨PCB153染毒后原代培养大鼠睾丸支持细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的时间变化特征。方法原代培养18～20日龄清洁级雄性SD大鼠的睾丸支持细胞。分别加入0(溶剂对照,0.5%DMSO)、10、20、30、40、50μmol/L PCB153染毒24、48 h,同时,设立无细胞的空白对照,检测细胞存活率。分别加入0(溶剂对照,0.3%DMSO)、10、20、30μmol/L的PCB153溶液染毒6、12、24、36、48 h,测定MDA含量和SOD活力。结果 CCK-8试验结果表明,10、20、30μmol/L PCB153为测定原代培养大鼠睾丸支持细胞SOD活力和MDA含量的合适染毒剂量。与溶剂对照组比较,20、30μmol/L PCB153染毒24 h大鼠睾丸支持细胞中SOD活力下降(P<0.05),MDA含量升高(P<0.05),出现明显的剂量-效应关系。与同一剂量PCB153染毒组前一时间点比较,30μmol/L PCB153染毒12 h和20μmol/L PCB153染毒24 h睾丸支持细胞中SOD活力均升高,10、20μmol/L PCB153染毒36 h睾丸支持细胞中SOD活力均下降(P<0.05);30μmol/L PCB153染毒24 h和20μmol/LPCB153染毒36 h睾丸支持细胞中MDA含量均升高,20μmol/L PCB153染毒48 h睾丸支持细胞中MDA含量下降(P<0.05);两者在12、24、36 h时间点出现明显的时间-效应关系。结论 PCB153染毒后原代培养大鼠睾丸支持细胞中,SOD活力随染毒时间的延长呈先上升后下降,随染毒剂量的升高而降低;MDA含量随染毒时间的延长和染毒剂量的升高而升高;两者均在24 h出现明显的剂量-效应和时间-效应关系。