5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸对人胃癌BGC823细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的研究5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(5-aminoimidazole-4-carboxamide ribonucleotide,AICAR)对人胃癌BGC823细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法分别将0.5、1、2和3mmol·L^(-1) AICAR作用于人胃癌BGC823细胞24、48和72h后,应用MTT法检测细胞增殖情况;Western blot法检测BGC823细胞内磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylated-Adenosine monophosphate activated protein kinase,p-AMPK)蛋白的表达。2mmol·L^(-1) AICAR作用24h后,应用划痕愈合实验、Transwell小室法分别检测细胞的迁移和侵袭能力;结果 MTT法检测结果显示,0.5、1、2和3mmol·L^(-1) AICAR分别作用24、48和72h后,人胃癌BGC823细胞的增殖能力均被抑制,随着AICAR作用浓度增加和作用时间的延长,对BGC823细胞抑制作用逐渐增强,呈时间和剂量依赖性(P均<0.01);与对照组相比,2mmol·L^(-1) AICAR作用后,BGC823细胞的迁移和侵袭能力均减弱(P均<0.01);随着AICAR作用浓度增加和作用时间延长,p-AMPK蛋白表达逐渐增加(P均<0.01)。结论 AICAR可抑制BGC823细胞的增殖、迁移和侵袭能力;AICAR通过上调BGC823细胞内p-AMPK蛋白表达而发挥肿瘤抑制作用。

5-氨基咪唑-4-甲酰胺盐酸盐的电位滴定法测定

5-氨基咪唑-4-甲酰胺盐酸盐(C4H6N4O·HCI,5-aminoimidazole-4-carboxamide hydrochloride,1),为治疗肝炎类药物阿卡明(aicamin)的组分,其含量测定多采用重氮化反应,以KI淀粉溶液为指示剂,该法不够灵敏.本文采用电位滴定法,准确度略高,能满足药物质控的要求.

5-氨基咪唑-4-甲酰胺核糖核苷酸联合干扰素对K562细胞的影响

目的:研究5-氨基咪唑-4-甲酰胺核糖核苷酸(AICAR)联合干扰素(IFN-ɑ-2b)对慢性粒细胞白血病K562细胞的增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用CCK-8法检测细胞增殖抑制情况;Wright-Giemsa方法染色,光学显微镜下观察细胞形态;FITC AnnexinV/PI双染法分析细胞凋亡率的变化;免疫细胞化学法检测野生型P53蛋白的阳性表达率。结果:不同浓度AICAR于不同作用时间24、48和72 h对K562细胞均有抑制作用,抑制程度呈时间、剂量依赖性(r=0.71,r=0.84)。AICAR与IFN-ɑ-2b联合应用后可以有效抑制K562细胞增殖,促进细胞凋亡,联合作用72 h时细胞的抑制率可达(45.26±2.54)%,联合作用48 h早期凋亡率达(33.72±0.23)%,与对照组及单用AICAR和单用IFN-ɑ-2b相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。AICAR与IFN-ɑ-2b联合作用促进野生型P53蛋白的表达。结论:AICAR和(或)IFN-ɑ-2b能抑制细胞增殖,促进K562细胞凋亡,2药联合具有协同抗瘤效应,其作用机制可能与促进野生型P53蛋白高表达有关。

4-氨基-1-甲基-3-丙基吡唑-5-甲酰胺的合成

以 2 -戊酮和草酸二乙酯为起始原料 ,经缩合、环合、甲基化、水解、硝化、氨解、还原等 7步反应合成了新型磷酸二酯酶 5型 (PDE5 )抑制剂西地那非的关键中间体—— 4-氨基 - 1-甲基 - 3-丙基吡唑 - 5 -甲酰胺。

2-甲基-4-氨基-5-甲酰胺甲基嘧啶的合成

以β-氨基丙腈为原料,合成2-甲基-4-氨基-5-甲酰胺甲基嘧啶(MD),并进行了结构鉴定。总收率74%,产品纯度97%以上。

水合肼还原法合成4-氨基-1-甲基-3-正丙基吡唑-5-甲酰胺

以 1 -甲基 - 4 -硝基 - 3 -正丙基吡唑 - 5 -甲酰胺为原料 ,采用水合肼 -三氯化铁 -活性炭体系 ,合成了 4 -氨基 - 1 -甲基 - 3 -正丙基吡唑 - 5 -甲酰胺。研究结果表明 ,水合肼还原具有操作简单 ,反应条件温和 ,成本低 ,收率高的特点 。

5-氨基咪唑4-氨甲酰核糖核苷对HL-60细胞周期的影响及作用机制

目的:研究5-氨基咪唑4-氨甲酰核糖核苷(AICAR)对人白血病HL-60细胞周期的影响及作用机制。方法:培养HL-60细胞,以CCK-8法行细胞增殖抑制实验,计算加入不同浓度AICAR(1 000μM、500μM、250μM、125μM)、不同时间点(24 h、48 h、72 h)对HL-60细胞增殖的抑制率,寻找最佳浓度和时间点,然后以流式细胞技术分析细胞周期,再以逆转录-PCR(RT-PCR)方法对细胞周期调控因子p21、p27、CDK2的表达进行半定量定性分析。结果:CCK-8实验显示AICAR浓度越大,HL-60细胞的增殖抑制率越高。流式细胞周期分析发现加入AICAR后细胞发生了S期停滞。RT-PCR结果显示,与对照组比较,加入AICAR后加药组HL-60细胞CDK-2的表达无明显变化,而p21、p27的表达明显增强。结论:AICAR可以通过上调细胞周期调控因子p21、p27的表达影响细胞周期,抑制HL-60细胞的增殖。

6-氨基-4-苯基-2-碳硫双键-1,2-二氢嘧啶-5-甲酰胺的合成条件优化

以氰基乙酰胺、硫脲、苯甲醛为原料,一锅煮法合成6-氨基-4-苯基-2-碳硫双键-1,2-二氢嘧啶-5-甲酰胺,并对反应温度、反应时间、原料的投料比、反应介质以及对收率影响进行考察,产物经核磁进行表征。结果:在催化剂四水乙酸镍催化下,以氰基乙酰胺、硫脲、苯甲醛为原料发生"一锅煮"的3组分反应得到目标物,在氮气保护下并确定反应温度在70℃下回流反应7h,以1.0∶1.2∶1.5mmol投料比在THF中进行反应。本方法简单、产率高,节约时间和环境友好。

新型5-氨基-2-(苄基硫代)噻唑-4-甲酰胺类化合物的设计、合成及抗肿瘤活性

为了寻找具有更好抗肿瘤活性的化合物,设计合成了一系列5-氨基-2-(苄基硫代)噻唑-4-甲酰胺衍生物。以2-氨基-2-氰基-乙酰胺为起始原料,合成了16个化合物DDO-5401~DDO-5416;目标化合物结构经IR、1H NMR和ESI-MS确证;采用MTT法对目标化合物进行5株肿瘤细胞(HCT116、Hep G2、A549、MDA-MB-231、MCF-7)体外抗肿瘤活性测定。合成的化合物对肿瘤细胞尤其是A549细胞表现出了良好的抑制活性;构效关系研究表明,苯环上连有给电子基团的化合物抑制活性要好于连有吸电子基团的化合物。化合物DDO-5413的抑制活性最强,对乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7抑制活性好于阳性对照药达沙替尼,值得进一步研究。

miR-330-5p调控Nox4对缺氧复氧大鼠胚胎心肌细胞损伤影响的实验研究

目的研究miR-330-5p调控烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4,Nox4)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)大鼠胚胎心肌细胞损伤的影响及可能机制。方法将大鼠胚胎心肌细胞H9C2分为对照组(Con)、模型组(H/R)、H/R+anti-miR-NC组、H/R+anti-miR-330-5p组、H/R+pcDNA3.1组、H/R+pcDNA3.1-Nox4组、H/R+anti-miR-330-5p+si-NC组和H/R+anti-miR-330-5p+si-Nox4组。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测miR-330-5p在H/R诱导心肌细胞中的表达;MTT法和流式细胞术检测心肌细胞增殖活力和细胞凋亡;Western blot检测Nox4蛋白及凋亡相关蛋白[细胞周期素D1(Cyclin D1)、B淋巴细胞瘤-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X,Bax)、P21]表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-330-5p和Nox4的靶向关系。结果与Con组比较,H/R组细胞中miR-330-5p表达(1.96±0.20 vs1.01±0.11),P21(0.89±0.07 vs 0.21±0.03)和Bax(0.80±0.05 vs 0.18±0.02)蛋白水平及细胞凋亡率(26.67%±2.68%vs 7.22%±0.68%)明显升高(t=7.029,12.591,12.790,12.102),而Cyclin D1(0.20±0.03 vs 0.78±0.06)和Bcl-2(0.11±0.02vs 0.71±0.06)蛋白水平及细胞增殖活性显著降低(t=13.671;11.047;11.333,11.485,12.511),差异具有统计学意义(均P<0.01)。Nox4是miR-330-5p的靶基因,miR-330-5p负调控Nox4表达。抑制miR-330-5p表达或过表达Nox4可促进Cyclin D1和Bcl-2蛋白表达(t=9.664,7.548),抑制P21和Bax蛋白表达(t=10.184,10.314),增强心肌细胞增殖活力(t=6.667~9.126)、抑制细胞凋亡(t=10.341),差异具有统计学意义(均P<0.01)。抑制Nox4表达能够逆转抑制miR-330-5p对H/R心肌细胞增殖(t=4.146~7.941)和凋亡(t=6.285~11.358)的影响(均P<0.01)。结论H/R诱导的大鼠心肌细胞中miR-330-5p表达上调,抑制miR-330-5p可能通过靶向Nox4抑制心肌细胞凋亡,对H/R大鼠心肌细胞损伤起到保护作用。

7β-(1-芳基-5-甲基-1,2,3-三唑-4-甲酰胺基)-3-(2-芳胺基-1,3,4-噻二唑-5-硫亚甲基)头孢菌素衍生物的半合成和抗菌活性

通过 2 -芳胺基 - 1,3,4 -噻二唑 - 5 -硫醇 1a,1b和头孢菌素母体 7- ACA的亲核取代反应 ,先制得头孢菌素新母体 1a,1b,用 1-芳基 - 5 -甲基 - 1,2 ,3-三唑 - 4 -甲酰氯 3a,3b与 2 a,2 b缩合 ,制得头孢菌素新衍生物 4 a,4 b.初步体外抗菌试验结果表明 ,所合成的头孢菌素衍生物 4 a,4 b对革兰氏阳性菌显示出中等程度的抑制活性 .

1-甲基-3-正丙基-4-硝基吡唑-5-甲酰胺的合成工艺改进

1-甲基 - 3-正丙基 - 4-硝基吡唑 - 5 -甲酰胺是合成磷酸二酯酶 V型 (PDE5 )抑制剂 Sildenafil Citrate的重要中间体 ,在文献基础上合成了标题化合物。经改进 ,将六步反应合并为四步进行 ,并相应改变反应条件。反应周期缩短 ,总收率自 15 %提高至 41% 。

N'-(2-羟基-5-溴苯甲酰胺基)-2-亚胺基-4-噻唑烷酮的合成及生物活性

以5-溴水杨酸为原料,将其与水合肼反应生成了5-溴水杨酰肼,再将硫氰酸钾与5-溴水杨酰肼反应合成了5-溴水杨酰基氨基硫脲,后者与溴代乙酸乙酯反应生成了终产物N'-(2-羟基-5-溴苯甲酰胺基)-2-亚胺基-4-噻唑烷酮.对化合物进行了熔点、IR、元素分析、1H NMR、13C NMR表征,并测试了其对生物体的抗炎活性和抗菌活性.结果表明:N'-(2-羟基-5-溴苯甲酰胺基)-2-亚胺基-4-噻唑烷酮具有较好的抗炎、抗菌活性.

2-氨基-4-甲基-5-苯甲酰胺噻唑合成研究

以乙酰乙酰苯胺和二氯化砜为原料,通过氯代反应生成α-氯代乙酰乙酰苯胺。以水为溶剂,在酸催化下α-氯代乙酰乙酰苯胺与硫脲发生缩合反应制得2-氨基-4-甲基-5-苯甲酰胺噻唑,缩合反应的较优合成工艺条件:α-氯代乙酰乙酰苯胺与硫脲的质量比为1∶1.2、反应温度90℃、反应时间3h、浓盐酸0.5mL、H_2O 35mL。实验表明,α-氯代乙酰乙酰苯胺收率达到91.4%,2-氨基-4-甲基-5-苯甲酰胺噻唑收率达到94.7%,总收率达到87%。经红外、高液相色谱、~1H NMR表征证明合成产物为目标化合物。该合成技术工艺过程简单、生产安全、反应条件温和、生产成本降低、环境友好、产品收率高。

4-氨基-1-甲基-3-正丙基吡唑-5-甲酰胺合成工艺研究

以 3 正丙基吡唑 5 羧酸乙酯为起始原料 ,经多步反应合成了 4 氨基 1 甲基 3 正丙基吡唑 5 甲酰胺 ,并对工艺进行了如下改进 :(1)将甲基化、水解两步反应合并为“一勺烩”工艺 ,中间产物不需硅胶柱分离、提纯 ,直接进行水解 ;(2 )硝化后处理增加了溶媒提取工序 ;(3)还原反应采用催化还原法 ,以价廉的甲酸铵代替氯化亚硒作还原剂。总收率达到 39 3% ,较原工艺提高了8 5 % ,具有操作简单 ,反应条件温和 ,宜于工业化生产 ,为合成 4 氨基 1 甲基 3 正丙基吡唑 5 甲酰胺提供了一个较好的方法。

2-甲基-4-氨基-5-甲酰胺甲基嘧啶的合成路线研究

针对维生素B1的关键中间体2-甲基-4-氨基-5-甲酰胺甲基嘧啶传统合成工艺中存在的问题进行优化,设计合成路线如下:以丙烯腈为原料,利用新型的功能离子液作催化剂,在室温下与氨高产率加成,再与甲醇钠生成烯醇钠盐,最后与盐酸乙脒在氯化锌催化下直接环合生成目标产物,总收率达70%.相比传统合成工艺,无需使用致癌物质及进行昂贵的衍生反应,步骤简单且条件温和.

N-(4-羟基苯乙基)-N-(2-溴-5-羟基-4-甲氧基苯甲基)甲酰胺的制备工艺研究

N-(4-羟基苯乙基)-N-(2-溴-5-羟基-4-甲氧基苯甲基)甲酰胺是合成氢溴酸加兰他敏重要的中间体。以6-溴异香草醛和对羟基苯乙胺原料,通过缩合,得到席夫碱化合物;进一步还原、甲酰化制得目标产物。考察了溶剂、原料配比以及反应温度等因素对收率的影响,反应总收率为81%。

3-((4-丙基-5-(嘧啶-4-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)甲胺基)-N-(2,6-二氟苯基)苯甲酰胺的合成及结构表征

以3-氨基苯甲酸甲酯为原料,经氨基的亲核取代、肼解、环合、亲核加成等一系列反应合成3-((4-丙基-5-(嘧啶-4-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)甲胺基)-N-(2,6-二氟苯基)苯甲酰胺。借助1H NMR和LC-MS等方法对所合成的中间体和目标产物的结构进行了表征。

4-氨基-5-氯-2-乙氧基-N-((3R,8aR)-六氢-1H-吡咯[2,1-c][1,4]噁嗪-3-基)甲基苯甲酰胺盐酸盐的合成

以D-脯氨醇、2-氯丙烯腈、4-氨基-5-氯-2-乙氧基苯甲酸为原料,经过加成、环合、还原、缩合反应,成功合成了一种新的活性化合物。产物经过核磁确认。

3-溴-N-(4-溴-2-乙基-6-[(甲氨基甲酰基)苯]-1-(3-氯吡唑-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺)的合成

以4-溴-2-乙基苯胺作原料合成中间体3-乙基-2-氨基-5-溴苯甲酸,再与中间体吡唑酸(3-溴-1-(3,5-二氯吡啶-2-基)-4,5-二氢-1H-吡唑-5-甲酸)反应合成3-溴-N-(4-溴-2-乙基-6-[(甲氨基甲酰基)苯]-1-(3-氯吡唑-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺),对各步反应条件进行摸索。参考以上各步反应条件,分别以4-溴苯胺、4-溴-2-甲基苯胺和4-氯-2-乙基苯胺为原料合成几个类似物具有指导作用,也为类似新药合成的合成提供参考。