左旋多巴及胞二磷胆碱对单眼形觉剥夺大鼠视皮质α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸-GluR2表达的影响、

背景研究表明α-氨基-3-羟基-5-甲基±异嗯唑丙酸（AMPA）．GluR2与弱视的发生发展有关，左旋多巴及胞二磷胆碱对改善弱视患者的视功能有一定的疗效，但其作用机制尚不完全明了。目的检测敏感期单眼形觉剥夺（MD）大鼠分别应用左旋多巴及胞二磷胆碱后视皮质中AMPA—GluR2的表达情况，探讨左旋多巴及胞二磷胆碱改善视功能的作用机制。方法2周龄健康SD大鼠60只行单侧眼睑缝合31d制作MD动物模型，造模成功后与年龄匹配的正常大鼠15只在自然光条件下一起饲养。将大鼠用随机数字表法随机分为正常对照组、MD组、左旋多巴组、胞二磷胆碱组和生理盐水组，每组15只大鼠。造模后第32天左旋多巴组大鼠给予溶于1ml生理盐水中的左旋多巴40mg／kg灌胃，每日1次；胞二磷胆碱组大鼠给予胞二磷胆碱80mg／kg肌内注射，每日1次；生理盐水组给予1ml生理盐水灌胃，均连续给药28d。分别采用免疫组织化学法、Westernblot法、实时荧光定量PCR法检测各组大鼠视皮质中AMPA—GluR2的表达情况。结果MD组大鼠视皮质中AMPA—GluR2蛋白及mRNA表达均低于正常对照组，差异有统计学意义（0．32±O．02VS．0．64±0．05，t=13．287，P〈0．05；0．30±0．01VS．0．8±t-O．03，t=38．184，P〈0．05）；左旋多巴组视皮质中AMPA—GluR2蛋白及mRNA表达均高于生理盐水组（0．59±0．04VS．0．33±0．03，t=11．628，P〈0．05；0．71±0．06VS．0．33±0．02，t=13．435，P〈0．05）；胞二磷胆碱组大鼠视皮质中AMPA—GluR2蛋白及mRNA表达均高于生理盐水组，差异有统计学意义（0．52±0．04VS．0．33±0．03，t=8．497，P〈0．05；0．48±0．04VS．0．33±0．02，t=7．500，P〈0．05）。结论AMPA-GluR2与视觉发育的可塑性有关，左旋多巴、胞二磷胆碱能够在一定程度上逆转MD引起的AMPA．GluR2表达下降。这一机制可能与其能够改善视功能的作用有关，其作用部位可能在视皮质。

水相中“一锅法”合成1-[(5-甲基异噁唑-3-氨基)-(苯基)]甲基-2-萘酚

在硫酸钠的存在下,以环境友好的水为溶剂,将苯甲醛、2-萘酚和5-甲基-3-氨基异噁唑通过"一锅法"制备得到了收率为92%的1-[(5-甲基异噁唑-3-氨基)-(苯基)]甲基-2-萘酚,并经过~1H NMR、^(13)C NMR和元素分析进行了表征.同时,对目标产物产率的影响因素进行了考察,得到了优化的合成条件.

5-氨基异噁唑的4-位芳基化

在温和、简单条件下实现了5-氨基异噁唑C4位芳基化的反应,以中等到优秀的产率(最高达99%)合成了一系列4-芳基-5-氨基异噁唑类衍生物,产物结构经核磁与高分辨质谱确证。

手性磷酸催化非环状N,N′-缩酮的不对称合成

手性N,N′-缩酮是药物分子和生物活性化合物最重要的核心结构之一,也是有机合成中重要的催化剂或配体。因此,不对称合成N,N′-缩酮具有重要意义。通过手性磷酸、溶剂、催化剂负载量和投料比的筛选,确定了最佳的反应条件:在手性磷酸的催化下,以1,4-二氧六环作为溶剂,5-氨基异噁唑与β,γ-炔基-α-酮亚胺酯在室温下发生区域选择性的氮杂-曼尼希反应,实现异噁唑的不对称N—H烷基化,以中等至良好的收率(46%~83% yield)和较好的对映选择性(82%~92%ee)合成非环状的N,N′-缩酮。所有产物结构由^(1)H NMR,^(13)C NMR和HR-MS(ESI)确证,绝对构型通过X-射线晶体结构分析确定。

新型含异噁唑环的喹唑啉衍生物的合成和抑蛋白酪氨酸酶α和ε活性研究

以2-氨基-4-硝基-苯甲酸和醋酸甲脒为原料,合成了7-硝基-喹唑啉酮(3),化合物3在SOCl2的作用下氯代得7-硝基-4-氯-喹唑啉(4);又以取代苯甲醛为起始原料,通过合成肟、1,3偶极环加成反应、甲磺酰化、叠氮化、Zn/NH4Cl还原得中间体3-(取代苯基)-异噁唑-5-甲胺衍生物5a～5e.4与5a～5e在碱性氧化铝作用下固相研磨合成了5种未见文献报道的新型的含异噁唑环的喹唑啉衍生物6a～6e.所合成的化合物通过IR,1HNMR,MS等分析方法进行了表征.体外抑蛋白酪氨酸酶α(PTPα)和蛋白酪氨酸酶ε(PTPε)活性测试结果表明测试样品浓度在20μg/mL下对PTPα和PTPε均无显著的抑制活性.

α-氨基-3羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体运输参与学习记忆机制的研究进展

背景 α-氨基-3羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸（α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionate receptor,AMPA）受体介导中枢神经系统大多数兴奋性突触传递,其在突触后膜的运输与学习记忆密切相关. 目的 对AMPA受体在突触后膜的运输与学习记忆的关系作用进行归纳和小结. 内容 介绍AMPA受体运输在学习记忆的重要细胞学基础-突触可塑性的两种主要形式长时程增强（long-term potentiation,LTP）和长时程抑制（long-term depression,LTD）中的改变及其可能机制,涉及多个蛋白的磷酸化和参与调节其改变的信号分子及通路,并说明AMPA受体运输参与相关的学习记忆行为. 趋向 为学习记忆受损相关神经退行性疾病的发生机制的探索提供思路.

CNQX对电刺激隐神经诱发大鼠扣带回前部神经元c-Fos基因表达的影响

目的阐明伤害性电刺激隐神经(saphenous nerve,SN)能否引起扣带回前部(anterior cingulategyrus,ACG)神经元c-Fos基因表达及其发生机制。方法用免疫组化方法研究伤害性电刺激SN后不同时间,ACG神经元c-Fos基因表达的变化,以及尾静脉注射α-氨基3-羟基5-甲基4-异恶唑丙酸/海人藻氨酸(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionic acid/kainate,AMPA/kainate)受体拮抗剂受体是谷氨酸受体之一,6-氰基-7-硝基喹喔啉-2,3-二酮(6-cyano-7-nitroquinoxaline-2,3-dike-tone,CNQX)对该变化的影响。结果伤害性电刺激SN后30 min ACG神经元Fos蛋白表达明显增加,60 min增加最明显,120 min后开始消退;并且尾静脉注射CNQX拮抗了伤害性电刺激SN引起的ACG神经元Fos蛋白表达的显著增加。结论伤害性电刺激SN能够引起ACG神经元Fos蛋白表达的显著增加,这种表达呈时间依赖性,提示ACG存有SN代表区,能够感受SN传入的伤害性信息;CNQX拮抗了伤害性电刺激SN引起的ACG神经元Fos蛋白表达的显著增加,提示AMPA/kainate受体参与此过程。

MK-801及CNQX对尾末端截断后小鼠血清褪黑素含量变化的影响

目的观察谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂5-甲基二氢丙环庚烯亚胺马来酸(MK-801)、α-氨基3-羟基5-甲基4-异恶唑丙酸/海人藻氨酸(AMPA/Kainate)受体拮抗剂6-氰基-7-硝基喹喔啉-2,3-二酮(CNQX)对尾末端截断后小鼠血清褪黑素(MLT)含量变化的影响,为进一步研究截肢后中枢的可塑性变化提供依据。方法用ELISA法测定尾末端2.5 cm截断后2 h小鼠血清MLT含量,并观察静脉注射MK-801、CNQX对断尾后小鼠血清MLT含量变化的影响。结果与对照组比较,断尾后2 h小鼠血清MLT含量降低;MK-801、CNQX分别拮抗断尾引起的小鼠血清MLT含量的降低。结论断尾后2 h小鼠血清MLT含量降低;NMDA受体、AMPA/Kainate受体参与断尾引起小鼠血清MLT含量降低的过程。

AMPA受体拮抗剂对新生鼠缺氧缺血性脑损伤自由基的影响

目的:探讨α-氨基-3-羟基-5-甲基异恶唑-4-丙酸(alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionicacid,AMPA)受体拮抗剂GYKI-52466对缺氧缺血新生鼠脑组织自由基的影响。方法:选用7日龄Wistar大鼠30只,随机分为3组,假手术组,缺氧缺血组和治疗组。治疗组在缺氧缺血后即刻开始予GYKI-5246610mg/kg腹腔注射,每小时注射1次,共4次。缺氧缺血组予等量生理盐水腹腔注射。于处置后24h检测脑组织中超氧化物歧化酶(superoxidedismutaseSOD)、谷胱甘肽、丙二醛水平。结果:缺氧缺血组脑组织SOD,GSH水平分别为(1.47±0.15)mkat、(75.03±5.22)mg/g,明显低于假手术组(2.51±0.16)mkat、(88.66±4.50)mg/g(t=3.237～15.573,P均<0.001);MDA含量为(8.03±0.64)pmol/g,较假手术组(5.12±0.57)pmol/g显著升高(t=6.253～15.373,P<0.001)。而治疗组脑组织SOD、谷胱甘肽水平分别为(2.73±0.21)mkat、(83.47±6.38)mg/g,明显高于缺氧缺血组(P<0.001;P<0.005);丙二醛含量为(6.07±0.68)pmol/g,较缺氧缺血组显著下降(P<0.001)。结论:AMPA拮抗剂可通过拮抗氧自由基发挥对缺氧缺血性脑损伤时脑的保护作用。

选择性AMPA受体拮抗药吡仑帕奈概述

全世界目前约有五千万癫痫患者,尽管目前临床上应用的抗癫痫药已有数十种,但仍有1/3左右的患者因为耐药而出现癫痫无法控制,亟需新作用机制抗癫痫药物予以治疗。

内源性大麻素对海马神经元AMPA受体GluR2的作用

目的探索内源性大麻素预处理对小鼠全脑缺血再灌注损伤后海马神经元α-氨基-3羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体2亚基(GluR2)表达的影响及机制。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、2-花生酰基甘油(2-AG)处理组、大麻素1型受体(CB1R)拮抗剂(AM251)+2-AG组和溶剂组。2-AG处理组腹腔注射2-AG 5 mg/kg;AM251+2-AG组腹腔注射AM251 1 mg/kg,30 min后腹腔给予2-AG 5 mg/kg;溶剂组腹腔给予0.1 ml二甲基亚砜(DMSO)。各组小鼠在预处理后30 min采用夹闭双侧颈总动脉20 min行再灌注的方法制备全脑缺血再灌注损伤模型。再灌注2 h取材行Western blot及免疫荧光检测。结果 GluR2高表达于正常小鼠海马CA1区锥体神经元;C57小鼠全脑缺血20 min,再灌后2 h海马组织GluR2表达明显下调(P<0.05);与模型组比较,2-AG处理组海马组织GluR2明显增高(P<0.05);与2-AG处理组比较,AM251+2-AG组海马组织GluR2明显下降(P<0.05)。结论内源性大麻素2-AG作用于神经元CB1R,逆转全脑缺血损伤导致的海马神经元GluR2表达下降。

基于液相色谱/四极杆飞行时间质谱的产ATPA的芽胞杆菌筛选

本文采用液相-四级杆飞行时间质谱的方法筛选产2-amino-3-(3-hydroxy-5-tert-butylisoxazol-4-yl)propanoic acid(ATPA)的芽胞杆菌菌株。通过分析50株芽胞杆菌菌株发酵液中胞外化合物成分,筛选出合成ATPA的2株芽胞杆菌,为嗜碱芽胞杆菌(Bacillus alcalophilus)FJAT-10014和栗褐芽胞杆菌(Bacillus plakortidis)FJAT-8757,该成分在发酵液中的相对含量分别为1.43%和1.28%,ATPA与色谱库检索得分(score)分别为93.41和95.01。

AMPA受体对大鼠坐骨神经损伤后神经再生的影响

目的:通过建立大鼠坐骨神经损伤神经再生室模型,观察局部应用α-氨基-3-羧基-5-甲基异唑-4-丙酸(alpha-amino-3-hydoxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate,AMPA)受体激动剂及其拮抗剂对周围神经再生的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为4组(AMPA组,CNQX组,细胞内液组以及正常对照组),每组10只,手术切断右侧6mm坐骨神经并用硅胶管套接,前3组分别向套管内注入10μmol/LAMPA,10μmol/L口恶CNQX,细胞内液5μL,术后两个月后观察坐骨神经功能指数、电生理、组织学及超微结构。结果:CNQX组坐骨神经功能指数犤(-33.79±3.91)%犦,神经肌肉动作电位犤(9.41±0.54)mV犦和运动神经传导速度犤(22.83±3.44)m/s犦,组织学检查有髓神经纤维数目(400.0±17.0)条、纤维直径为犤(406.7±21.1)nm犦,均优于细胞内液组犤(-45.09±6.23)%,(6.60±0.42)mV,(14.62±2.47)m/s,(337.0±8.03)条,(349.0±24.1)nm犦,P<0.01,超微结构观察有髓神经纤维的髓鞘厚度、成熟度优于细胞内液组;而AMPA组上述各指标犤(-52.13±5.73)%,(5.63±1.00)mV,(7.51±1.83)m/s,(247.0±39.0)条,(283.7±32.5)nm犦则较细胞内液组差(P<0.01或0.05)。结论:AMPA受体拮抗剂CNQX能有效促进神经再生及功能的恢复,而其激动剂AMPA则相反。

肌萎缩性侧索硬化症和兴奋性氨基酸

以α-氨基-3-羟基-4异恶唑-丙酸(AMPA)受体介导的Ca^(2+)通透性增加,Ca^(2+)流入比例增大而导致神经细胞死亡的理论已经明确。AMPA受体的谷氨酸受体2(GluR2)亚基的Q/R部位编辑率低下是散发性肌萎缩性侧索硬化(ALS)运动神经元死亡的主要原因。变异的铜-锌超氧化物歧化酶(SOD1)相关的家族性ALS(ALS1)是以AMPA受体含GluR2亚基的比例减少为基础;以延髓脊髓性肌萎缩症(SMBA)为代表运动神经元的死亡,不是AMPA受体所介导。ALS GluR2 Q/R部位核糖核酸(RNA)编辑的恢复可以考虑成为ALS治疗的特异方法,而AMPA受体拮抗剂可以防止ALS1运动神经元的变性。

芍药苷对血虚肝郁证模型大鼠海马谷氨酸及其不同类型受体mRNA表达的影响

目的:研究血虚肝郁证大鼠海马谷氨酸(Glu)及不同类型受体NR1、NR2A、NR2B、GluR1、mGluR5 mRNA的表达及芍药苷的干预作用。方法:正常组、模型组、20mg/kg芍药苷组、40mg/kg芍药苷组,造模第1天开始给药,正常组给等量超纯水,其余各组灌胃予以相应浓度药物,共造模21d。治疗结束后,取脑组织,剥离海马,采用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生HPLC荧光检测法测定Glu含量,采用实时荧光定量聚合酶链反应法(RTqPCR)检测NR1、NR2A、NR2B、GluR1、mGluR5等5种受体亚单位mRNA的表达。结果:血虚肝郁证候模型大鼠海马组织中Glu含量显著升高(P<0.05),且不同Glu受体亚基表达不同,其中NR2A和GluR1 mRNA的表达显著升高(P<0.01),NR1、NR2B mRNA表达有升高的趋势,而mGluR5表达无明显变化,给予芍药苷可使海马组织中Glu含量显著降低(P<0.05),可下调NR2A、GluR1、mGluR5 mRNA表达(P<0.01,P<0.05)。结论:血虚肝郁证模型大鼠脑内存在Glu能神经调节异常,白芍的养血柔肝作用,能够通过调节NO/cGMP信号通路上个的多个靶点发挥效果。

姜黄素对AMPA／KA受体介导大鼠海马神经元钙内流的影响

目的探讨姜黄素对α-氨基-3-羧基-5-甲基异恶唑-4-丙酸（AMPA）／海人酸（KA）受体介导大鼠海马神经元钙内流的影响。方法选用胚胎17d SD鼠分离海马，离体培养海马神经元，借助活体钙荧光染色和激光共聚焦钙成像技术观察100μmol／L KA刺激海马神经元内钙的变化，不同浓度（5、10、15、30、50μmol／L）姜黄素预孵育海马神经元30min对100μmol／L KA刺激下细胞内钙变化的影响，15μmol／L姜黄素对不同浓度（10、30、50、100、200、300μmol／L）KA刺激海马神经元内钙变化的影响。应用钴染色技术观察（30、100μmol／L KA）刺激后海马神经元钴阳性染色细胞变化，姜黄素预孵育30min对KA刺激导致钴阳性染色细胞变化的影响。结果不同浓度姜黄素预孵育30min均可以明显缓解100μmol／L或300μmol／L KA导致的细胞内钙升高程度，差异均有统计学意义（P〈0．05），其中15μmol／L姜黄素作用最为明显。30μmol／L或100μmol／L KA刺激均可以引起海马神经元钻染色阳性细胞增加，15μmol／L姜黄素预处理30min后明显减少钴染色阳性细胞，差异有统计学意义（P〈0．05），而其他浓度（5μmol／L或30μmol／L）姜黄素未见明显影响。结论一定浓度的姜黄素可以影响AMPA／KA受体介导大鼠海马神经元钙内流，这可能是姜黄素抗癫痫作用的一个机制。

糖皮质激素对记忆巩固的作用及其神经机制

背景糖皮质激素（glucocorticoid，GC）在机体的作用范围比较广泛，对学习记忆也能产生影响。目的近年来关于GC增强记忆巩固的神经机制有了进一步的发展，现就近年的进展予以综述。内容在人体和动物的众多研究均提示，去甲肾上腺系统的激活在GC影响记忆的机制中发挥重要的作用，谷氨酸及其受体、内源性大麻素也参与其中。GC对记忆巩固的调节主要通过基底外侧杏仁核（the basolateral complex of the amygdale，BLA）及BLA与其他脑区的相互作用而实现，且不同的麻醉药物对应激反应的影响也不相同。趋向深入研究GC对人体认知功能的影响，有助于揭示认知功能障碍的发生机制，有利于临床工作者制定有效的预防及治疗方案。

糖尿病脑病突触可塑性损伤的研究进展

糖尿病可引起认知障碍,形成糖尿病脑病(diabetic encephalopathy,DE)。大量研究提示,糖尿病脑病与海马突触可塑性的变化密切相关,包括突触结构和功能的可塑性损伤。结构方面表现为突触变性,功能方面主要体现在长时程增强(long-term potentiation,LTP)的损伤,包括N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDARs)、α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶口坐丙酸受体(AMPARs)和钾离子通道的构成及功能性病变。突触可塑性异常可能是糖尿病脑病的关键性病理机制,本文将对此进行综述。