控释GDNF对BrdU标记的骨髓MSCs源性前体神经细胞在体内分化的影响

目的评价BrdU标记骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)用于体内示踪的效果,及控释胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)干预对移植细胞分化的影响。方法应用免疫双重标记技术对前期关于治疗猴脊髓损伤实验研究的相关的石蜡标本进行回顾性研究。控释GDNF+细胞移植组4例,单纯细胞移植组织4例,分别进行BrdU-Nestin双重染色、BrdU-NF双重染色、BrdU-GFAP双重染色。结果猴脊髓组织石蜡标本内可以显示BrdU阳性细胞,并且可以同时呈NF或GFAP阳性表达,Nestin呈阴性表达;添加控释GDNF者BrdU阳性细胞数量多(P=0.10),并且NF阳性表达水平高(P<0.05),自体神经元保存数量较多(P<0.05)。结论 BrdU体外标记干细胞进行体内示踪研究是一种有效的方法;控释GD-NF可以增强移植细胞的存活、增强其向神经元分化的能力,并且可以更加有效的保护自体神经元,促进神经功的恢复。

银杏内酯B和鹿茸多肽对胆碱能前体细胞发生分化的研究

目的研究银杏内酯B和鹿茸多肽对胆碱能前体细胞发生、分化的影响,为胆碱能神经元退行性疾病的治疗探索和寻求新策略。方法实验在吉林大学白求恩医学院组织胚胎学系细胞培养室和免疫组化实验室完成。原代培养E14-15大鼠端脑细胞,分别在实验组培养液中加入银杏内酯B、鹿茸多肽及两者联合,培养细胞4d后进行乙酰胆碱转移酶(ChAT)、5-溴尿嘧啶核苷(BrdU)免疫细胞化学染色,分别计算各组ChAT和BrdU免疫反应阳性细胞数。结果银杏内酯B、鹿茸多肽及联合用药组分别与对照组相比,神经球较大,突起多而粗,且神经球周边细胞迁移数量多。ChAT免疫阳性反应细胞多分布于神经球边缘,神经球之间可见散在阳性细胞。药物实验组ChAT免疫反应阳性细胞数量较对照组有显著性增加,以联合用药组增加最为显著,其次为鹿茸多肽组;Brdu免疫反应阳性细胞与对照组相比,鹿茸多肽组增加最为显著。结论:银杏内酯B、鹿茸多肽可诱导端脑胆碱能前体细胞增殖和分化,联合用药作用效果更为显著。

低频电刺激改善脑梗死大鼠神经功能障碍的机制研究

目的探讨低频电刺激(LFS)对脑梗死大鼠神经功能和梗死侧脑组织神经干细胞(NSC)增殖、血管再生的影响。方法制作大鼠永久性大脑中动脉梗死模型(MCAO),随机分为假手术组、对照组和实验组,每组又分为7 d和14 d两个亚组,每个亚组12只。术后2 d开始进行LFS治疗。采用大鼠神经功能缺损评分(NSS)评估大鼠神经功能缺损程度,运用免疫荧光染色检测大鼠梗死侧大脑侧脑室的室管膜下层(SVZ)的5-溴尿嘧啶脱氧核糖核苷酸(BrdU),应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠梗死侧大脑的基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)含量。结果 LFS治疗后14 d,实验组大鼠NSS评分明显低于对照组和假手术组(P<0.01);LFS治疗后各时间点实验组大鼠梗死侧大脑的SDF-1、BrdU和VEGF水平均较对照组有不同程度的上调(P<0.01)。结论 LFS能改善脑梗死大鼠功能障碍,其可能机制是通过激活SDF-1/CXCR4轴,进而发挥促进NSC增殖和血管再生作用。