高效液相色谱法测定化妆品中8-甲氧基补骨脂素、5-甲氧基补骨脂素、欧前胡内酯和三甲沙林的不确定度评定

对8-甲氧基补骨脂素、5-甲氧基补骨脂素、欧前胡内酯和三甲沙林高效液相色谱法含量测定进行不确定度评定,建立了数学模型,分析了检测过程中的不确定度的来源并给出了量化结果,计算出标准不确定度和扩展不确定度。结果表明,当取置信概率为95%,包含因子k=2,被测化妆品中8-甲氧基补骨脂素、5-甲氧基补骨脂素、欧前胡内酯和三甲沙林含量分别为19.68、19.39、20.25和21.38μg/g时,其相应的扩展不确定度为0.33、0.33、0.32和0.34μg/g,并针对测量不确定度的主要来源提出了改进建议。

HPLC同时测定都梁滴丸中的阿魏酸、5-甲氧基补骨脂素、欧前胡素、异欧前胡素

目的:建立一种同时测定都梁滴丸中的阿魏酸、5-甲氧基补骨脂素、欧前胡素、异欧前胡素含量的方法。方法:都梁滴丸以75%甲醇超声提取30 min后取上清液,采用Agilent Zorbax SB C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1;检测波长分别为254,320,330 nm。结果:4种成分的方法最低定量限为3～15 mg.kg-1,线性范围0.5～50 mg.L-1,相关系数(r2)≥0.999 5。高、中、低3个添加水平的平均加样回收率(n=5)为96.6%～102.5%,RSD 0.16%～2.07%。结论:该方法简便、快速适用于都梁滴丸中阿魏酸、5-甲氧基补骨脂素、欧前胡素和异欧前胡素的含量测定。

化妆品中甲氧基补骨脂素同分异构体的液相色谱法分离和测定

建立了用高效液相色谱（HPLC）-二极管阵列检测器（DAD）测定化妆品中两种呋喃香豆素同分异构体-8-甲氧基补骨脂素（8-MOP）和5-甲氧基补骨脂素（5-MOP）的简便方法。样品用甲醇超声提取，高速冷冻离心，经0．45μm滤膜过滤，注入高效液相色谱，用DAD进行扫描检测，并在301nm波长进行分析。用保留时间结合紫外光谱图定性，外标法定量，并且采用液质联用（LC／MS／MS）确证。测试结果对8-MOP的回收率为87．0％-105．0％，RSD为0．41％～5．3％．检出限为5．0mg／kg；5-MOP的回收率为88．0％～105．0％，RSD为0．33％～4．1％，检出限为5．0mg／kg。本文用DAD同时分离和检测了化妆品中的8-MOP和5-MOP，方法可用于化妆品安全性监控。

UPLC-HRMS法定量分析小鼠组织中的6-氧-甲基鸟嘌呤

为评价4-(N-甲基-N-亚硝氨基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)的器官致癌性,建立了一种定量分析C57BL/6小鼠组织中DNA甲基化加合物6-氧-甲基鸟嘌呤(6-O-MeG)的超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)方法,并分别对NNK染毒后生理盐水对照组、吡唑处理组和5-甲氧基补骨脂素(5-MOP)处理组小鼠肝脏和肺中6-O-MeG的含量进行了测定。用试剂盒提取组织样品DNA,提取物在80℃下酸解后加入内标6-氧-甲基-d3-鸟嘌呤([CD_3]6-O-MeG),经过HLB固相萃取柱净化后进行UPLC-HRMS分析。结果表明:(1)6-O-MeG在0.05~10.00 ng/mL内线性良好(R^2=0.999 8),检出限0.011ng/mL,回收率92.1%~102.2%,日内和日间精密度分别为1.10%~4.34%和1.89%~6.58%。(2)给药4 h后,吡唑处理组小鼠肝脏和肺中6-O-MeG的含量分别为对照组的2.09和1.87倍,5-MOP处理组则分别为对照组的0.32和0.67倍,表明小鼠体内的CYP2A5在NNK的代谢活化过程中起到重要作用。该方法样品前处理简单、选择性好、灵敏度高,适用于小鼠组织中6-O-MeG的测定。

高效液相色谱法测定小鼠肝组织中两种甲氧基补骨脂素

建立小鼠肝组织中8-甲氧基补骨脂素(8-MOP)与5-甲氧基补骨脂素(5-MOP)的高效液相色谱测定方法。采用正交试验设计对样品的前处理方法进行优化,Waters Symmetry C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,流动相为甲醇-水(55:45,V/V),流速为1.0 m L/min,荧光检测器激发与发射波长分别为334 nm与484 nm。小鼠肝组织中8-MOP与5-MOP在0.10~25μg/m L范围内线性良好,r值分别为0.9998与0.9994;8-MOP与5-MOP的定量限分别为4.0 ng/g和1.0 ng/g;8-MOP与5-MOP的加标回收率分别为101.1%~102.0%与94.2%~103.2%;提取回收率分别为96.6%~98.6%与92.6%~98.4%;基质效应分别为95.6%~98.2%与91.4%~99.6%;日内精密度分别为2.7%~3.3%与5.2%~5.5%;日间精密度分别为1.4%~2.4%与0.3%~1.6%。给药后小鼠肝组织中8-MOP含量为23.1~48.7 ng/g。方法适用于小鼠肝组织中8-MOP与5-MOP的同时测定。

RP-HPLC测定川明参药材中香豆素含量

目的建立测定川明参药材中2种香豆素成分欧前胡素及5-异戊烯基-8-甲氧基补骨脂素含量的RP-HPLC测定方法。方法色谱柱:Kromasil-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(65∶35),流速为1ml/min,柱温为30℃,检测波长为246nm.结果欧前胡素在0.16～0.97μg(r=0.9998),5-异戊烯基-8-甲氧基补骨脂素在0.13～0.76μg(r=0.9996)范围内与色谱峰面积线性关系良好,欧前胡素和5-异戊烯基-8-甲氧基补骨脂素的平均回收率分别为98.79%、98.11%,RSD分别为1.65%、1.73%.结论该测定方法准确、简便、重复性好。研究结果为建立完善川明参药材质量标准奠定了基础。

柑橘精油中呋喃香豆素的超高效液相色谱分析

建立了柑橘类精油中4种呋喃香豆素（异补骨脂素、补骨脂素、5-甲氧基补骨脂素和欧前胡素）的超高效液相色谱（UPLC）分析方法。样品经甲醇稀释定容,高速离心分离后,取上清液进样分析。采用Agilent Zorbax Eclipse Plus C18色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.8μm）分离,以水-乙腈二元流动相梯度洗脱,流速0.3 m L·min^-1,检测波长300 nm。4种呋喃香豆素在0.5～100 mg·L^-1范围内呈良好线性,相关系数均达到0.999,检出限为1.5～3.0 mg·kg^-1,平均回收率为97.5%～105.6%,相对标准偏差为0.4%～2.9%（n=3）。采用已建立的方法对25批柑橘类精油样品进行测定,发现1个批次的甜圆柚油中含有5-甲氧基补骨脂素,质量分数为60.5 mg·kg^-1。

珍稀药用植物明党参呋喃香豆素成分累积分布研究

采用HPLC法测定明党参不同器官、不同生长期中珊瑚菜内酯、5-羟基-8-甲氧基补骨脂素的含量。结果表明,明党参根、茎叶、花葶及果实均含有2种呋喃香豆素,2种呋喃香豆素总量,根中以6月为最高,为163.8467μg/g;茎叶以1月为最高,为606.1023μg/g;花葶以6月上旬(生长发育接近成熟时)为最高,为117.1185μg/g;果实以成熟期为最高,达1070.6326μg/g。提示明党参药用器官(根)和非药用器官(茎叶、花葶、果实)为天然呋喃香豆素优质药用植物资源,具有广泛开发利用的前景。

白芷酪氨酸酶抑制成分研究

目的:热处理白芷Angelica dahurica,并寻找其中的酪氨酸酶抑制成分。方法:采用生物活性-高效液相色谱跟踪方法,以及硅胶柱色谱法,分离、鉴定热处理白芷中酪氨酸酶抑制成分。结果:热处理白芷提取物比原药显示出更强的酪氨酸酶抑制作用,并从其有效部位中分离得到8-羟基-5-甲氧基补骨脂素(IC50=0.0086 mmol.L-1),比阳性对照曲酸(kojic acid)(IC50=0.0907 mmol.L-1)对酪氨酸酶抑制活性更强。结论:热处理明显提高了白芷酪氨酸酶抑制活性,8-羟基-5-甲氧基补骨脂素为活性成分。