UPLC-MS/MS法同时测定糖尿病模型大鼠血浆中沙格列汀及其代谢产物5-羟基沙格列汀浓度

目的:建立同时测定糖尿病模型大鼠体内沙格列汀及其代谢产物5-羟基沙格列汀血药浓度的方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法。色谱柱为Waters BEH Shield RP_(18),流动相为10 mmol/L乙酸铵-乙腈(70∶30,V/V),流速为0.3 m L/min,柱温为30℃,进样量为10μL;扫描模式为多反应监测,正离子模式,各离子对为m/z 316.2→180.2(沙格列汀)、m/z 332.3→196.2(5-羟基沙格列汀)、m/z 304.2→153.9(维格列汀,内标)。取6只SD大鼠,复制糖尿病模型后,ig沙格列汀0.53 mg/kg,于给药前及给药后0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2.0、4.0、6.0、8.0、12.0、24.0 h经眼眶取血0.25 m L,测定血浆中沙格列汀及其代谢物5-羟基沙格列汀的浓度,采用Win Nonlin 6.1软件计算药动学参数。结果:沙格列汀和5-羟基沙格列汀的质量浓度线性范围为0.1~100(r=0.997 2)、0.2~200 ng/m L(r=0.996 5),定量限分别为0.1、0.2 ng/m L,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于12%,准确度为94.1%~105.4%、91.0%~103.6%,提取回收率分别为72.4%~87.3%、107.0%~115.3%(RSD均小于13.6%,n=6),基质效应分别为105.9%~107.8%、83.5%~88.2%(RSD均小于10.3%,n=6),稳定性的RSD≤11.0%(n=5);药动学参数c_(max)分别为(49.97±11.14)、(16.87±7.35)ng/m L,t_(1/2)分别为(2.88±0.21)、(4.21±0.95)h,AUC_(0-24h)分别为(90.95±7.06)、(49.13±5.33)ng·h/m L(n=6)。结论:本方法简便、准确、专属性强,适用于沙格列汀及其代谢物5-羟基沙格列汀在大鼠体内的药动学研究。