5-羟色胺(5-HT)_(1A)受体配体的研究进展

5-羟色胺(5-HT)是重要的神经递质,5-HT受体(5-HTR)在认知、情感等众多神经活动中发挥着重要作用,是重要的药物靶标。5-HT1A受体(5-HT1AR)是众多5-HTR亚型中研究最为广泛和深入的一类受体,研究5-HT1A受体配体(5-HT1ARL)对于临床上治疗焦虑、抑郁、疼痛等疾病都具有重要的价值。该文主要从5-HT1ARL结构类型的角度综述5-HT1ARL的最新研究进展,并简要介绍定向多靶标配体的研究成果,展望5-HT1ARL药物的开发前景。

5-羟色胺受体及亚型的研究现状

5-羟色胺（5-hydroxytryptamine．5-HT），又名血清素（Serotonin）。5-羟色胺作为-种神经递质和血管活性物质，广泛分布于中枢神经系统和周围组织中，在痛觉调制、感觉运动、心血管功能以及呼吸、睡眠、食欲等多方面发挥重要作用。5-HT作为神经递质主要分布于松果体和下丘脑，可能参与痛觉、睡眠和体温’等生理功能的调节，中枢神经系统5-HT含量及功能异常可能与精神病和偏头痛等多种疾病的发病有关。

P2X3受体介导电针调节肠易激综合征内脏痛大鼠结肠5-HT、SERT的作用研究

目的探讨嘌呤能配体门控离子通路3(purinergicligand-gatedionchannel 3,P2X3)受体介导电针对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)内脏痛大鼠结肠5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、5-HT再摄取转运蛋白(serotonnin transporter,SERT)的调节作用。方法选取SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、电针组、P2X3受体激动剂组、P2X3受体激动剂+电针组,通过三硝基苯磺酸(trinitrobrnzen sulfonic acid,TNBS)灌肠液灌肠制备IBS内脏痛大鼠模型。模型制备3周后运用电针、髓鞘内注射、电针和髓鞘内注射相结合等方法进行干预。采用结肠组织病理染色、腹部回撤反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)评分观察IBS内脏痛模型是否制作成功,运用AWR评分、酶联免疫吸附法、蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR等方法检测IBS大鼠内脏痛敏的变化及IBS大鼠结肠5-HT、SERT的表达变化。结果(1)电针能降低IBS大鼠在40、80 mmHg压力结直肠扩张(colorectal distention,CRD)刺激下的AWR评分(P<0.05,P<0.01);(2)电针能够下调IBS大鼠结肠5-HT的表达(P<0.01),上调结肠SERT蛋白和mRNA的表达(P<0.01);(3)P2X3受体被激活后,电针能够下调IBS大鼠结肠5-HT的表达(P<0.05),上调结肠SERT蛋白和mRNA的表达(P>0.05)。结论P2X3受体介导电针调节IBS内脏痛大鼠结肠中5-HT、SERT蛋白及mRNA的异常表达,可能是电针缓解IBS大鼠内脏痛外周敏化的机制之一。

放射配体受体分析法对日本血吸虫体内5-HT受体的测定

采用放射配体-受体分析法(RLBA)测定了日本血吸虫体内5-羟色胺(5-HT)受体及螺环哌啶酮(spiroperidol)对5-HT受体与3H-5-HT结合反应的影响。结果证实:日本血吸虫体内存在5-HT受体,与配体5-HT可进行饱和的、特异的结合,其Scatchard图呈下凹曲线,表明5-HT受体的复杂性和不均一性。其最大结合容量(Bmax)为210.4fmol/mgprotein,解离常数(Kd)为0.585pmol/L,螺环哌啶酮对3H-5-HT与受体的结合无影响,计算Bmax为270.3fmol/mgprotein,Kd为0.327pmol/L,与前值比较,差异不显著(P>0.05)。

^(99)Tc^m标记5-HT_(1A)脑受体显像剂的研制及其生物分布

为了寻找 99Tcm 标记中枢神经系统 5 - HT1A协同受体显像药物 ,合成了单齿受体配基 1- (2 -甲氧基苯基 ) - 4 - (2 -巯基乙基 )哌嗪 (简称 MPMEP)、三齿配体 N,N-二 (2 -巯基乙基 ) - N',N'-二乙基乙二胺 (简称 BMPDEEDA)和 N,N-二 (2 -巯基乙基 )卞胺 (简称 BMPBA) ,其结构经 IR、NMR及元素分析表征 ;以“3+ 1”混合配体进行了 99Tcm标记 ,并确定了标记反应的最佳条件 :p H=6 .0～ 7.0 ,6 0～70℃下 ,反应 2 0～ 30 min,经 CH2 Cl2 萃取脂溶性部分后 ,99Tcm O(MPMEP) (BMPDEEDA)和 99Tcm O(MPMEP) (BMPBA)的标记率分别达到 95 %和 90 %以上。采用 HPL C对标记产物进行了分离和纯化 ,纯化后的标记物放化纯度均 >98%。小鼠体内的生物分布结果表明 99Tcm O(MPMEP)(BMPDEEDA)和 99Tcm O(MPMEP) (BMPBA)配合物可以通过血脑屏障 ,在脑中有一定的摄取和滞留 ;99Tcm O(MPMEP) (BMPBA)在血液中清除较快 ,静脉注射后 2、30、6 0 min时 ,脑与血摄取比分别为 0 .31、0 .33、0 .32 。

5-羟色胺受体在肝星状细胞上的表达及5-羟色胺对肝星状细胞生物学活性的影响

目的 探讨 5 羟色胺 ( 5 HT)受体在肝星状细胞 (HSC)的表达及 5 HT通过其受体的介导对HSC生物学活性的影响。 方法 采用肝脏离体胶原酶灌注消化及密度梯度离心的方法来分离培养HSC ;RT PCR方法检测HSC中 5 HT受体 1B、2A、2B、3等亚型的表达 ;Westernblot方法检测 5 HT及其 2A受体阻断剂酮色林、3型受体阻断剂恩丹西隆对HSC表达TGF β1和Smad4的影响。建立聚硅酮膜培养法 ,将HSC培养在聚硅酮膜上 ,研究 5 HT及酮色林、恩丹西隆对HSC收缩的影响。结果 HSC表达 5 HT的 1B、2A、2B等受体亚型 ,不表达 3亚型。5 HT明显促进HSC表达TGF β1和Smad4(P <0 0 5 ) ,酮色林能抑制TGF β1和Smad4的表达。恩丹西隆的作用不明显。 5 HT能促进HSC的收缩 ,并成量效依赖关系 ,这种收缩作用能被酮色林所阻断 ,不被恩丹西隆阻断。 结论 HSC表达 5 HT的多种受体亚型 ,5 HT通过其受体的介导对HSC的生物学活性发生影响 ,在肝硬化、门静脉高压症的发生发展中起了一定的作用。

疏肝调神针法对偏头痛大鼠受体活性修饰蛋白1、5-羟色胺1D受体表达的影响

目的:探讨疏肝调神针法对偏头痛大鼠三叉神经脊束核、中脑受体活性修饰蛋白1(RAMP1)、5-羟色胺1D受体(5-HT1DR)表达的影响,探讨本法治疗偏头痛的镇痛机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、疏肝调神组、普通针刺组,每组10只。疏肝调神组取"百会""风池""内关""太冲"、普通针刺组取"百会""风池"进行针刺,每次30min,每日1次,共8d。针刺干预结束后,于大鼠颈后皮下注射硝酸甘油复制偏头痛模型。采用荧光定量PCR法、Western blot法检测大鼠三叉神经脊束核、中脑RAMP1、5-HT1D R的mRNA和蛋白表达情况。结果:与对照组比较,模型组三叉神经脊束核、中脑中RAMP1的mRNA、蛋白表达均显著升高(P<0.05),5-HT1DR的mRNA、蛋白表达均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,疏肝调神组、普通针刺组三叉神经脊束核、中脑中RAMP1的mRNA、蛋白表达均明显降低(P<0.05),5-HT1DR的mRNA、蛋白表达均明显升高(P<0.05)。与普通针刺组比较,疏肝调神组三叉神经脊束核、中脑中RAMP1的mRNA、蛋白表达均明显降低(P<0.05),5-HT1DR的mRNA、蛋白表达均明显升高(P<0.05)。结论:疏肝调神针法对偏头痛的治疗作用可能与抑制中枢降钙素基因相关肽的表达、激活5-HT的表达有关。

基于5-羟色胺转运蛋白和sigma-1受体的苯基哌嗪烷胺类化合物的设计、合成及抗抑郁活性研究

目的以5-羟色胺转运蛋白和sigma-1受体为靶点,设计合成苯基哌嗪烷胺类化合物及其衍生物,研究其体内外生物活性。方法以间氰基苯胺和氰基取代吲哚类化合物为起始原料,经还原胺化、烷基化反应,再与相应的苯基哌嗪类衍生物进行缩合制备系列化合物。经5-羟色胺再摄取抑制实验和sigma-1受体结合实验进行体外活性筛选,采用小鼠强迫游泳实验和小鼠悬尾实验对其中化合物39和42进行体内抗抑郁活性研究。结果与结论共合成36个未见文献报道的新化合物,经质谱和核磁共振氢谱确证结构。体内外药理研究表明:化合物39和42具有较强的5-羟色胺再摄取抑制作用和sigma-1受体高亲和力,Ki值分别为5.77 nmol·L^(-1)/49.95 nmol·L^(-1)和3.48 nmol·L^(-1)/3.30 nmol·L^(-1)。39在两种抑郁模型上均显示出良好的抗抑郁活性,具有作为新型抗抑郁活性分子进行深入研究的价值。

早期恐惧声音应激对大鼠远期学习记忆能力及海马CA1区5-HT1AR-CREB-BDNF信号通路的影响

目的观察早期恐惧声音应激对大鼠远期学习记忆功能及海马CA1区5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法 40只出生后1 d的健康新生SD雄性大鼠随机分为对照组和应激组各20只。应激组以恐惧的声音为应激源,于每日上、下午各播放2 h,持续21 d,建立早期恐惧声音应激模型;对照组于正常环境下饲养。应激结束后5 w行Morris水迷宫实验检测学习记忆能力;水迷宫实验结束后断头取脑,苏木精-伊红(HE)染色观察海马区的病理情况,免疫荧光组织化学法和蛋白免疫印迹法检测大鼠海马CA1区5-HT1AR、CREB和BDNF蛋白表达。结果与对照组相比,应激组学习记忆能力明显下降(P<0.01);对照组海马CA1区的神经元结构整齐、排列紧密,而应激组海马CA1区的神经元排列疏松并且出现了神经元的丢失;与对照组相比,应激组海马CA1区的5-HT1AR、CREB和BDNF蛋白表达均明显降低(P<0.01)。结论早期恐惧声音应激可导致大鼠成年后学习记忆功能障碍,其机制可能与早期恐惧声音应激抑制5-HT1AR-CREB-BDNF信号通路有关。

硫酸锌对5－HT与［~3H］granistron竞争NG108－15细胞中5－HT_3受体的影响

本文用放射配体结合测定法观察了硫酸锌对５－ＨＴ３受体激动剂５－ＨＴ与［３Ｈ］ｇｒａｎｉｓｅｔｒｏｎ竞争ＮＧ１０８－１５细胞中５－ＨＴ３受体能力的影响。结果证实，硫酸锌（１ｍＭ）能使５－ＨＴ竞争受体的浓度──反应曲线左移，半数抑制结合浓度降低（Ｐ＜０．０５），对斜率无明显影响。提示锌离子可能也影响５－ＨＴ３受体功能，有增强５－ＨＴ与５－ＨＴ３受体结合的作用。

四逆散活性成分对慢性应激诱导的抑郁症模型大鼠大脑皮层与海马5-HT_(1A)受体mRNA表达的影响

目的 研究慢性应激所造成的抑郁症模型大鼠在四逆散活性成分治疗后皮层与海马 5 HT1A受体mRNA表达数量的变化。方法 采用原位杂交方法分析 5 HT1A 受体mRNA表达的数量 ,以探讨四逆散活性成分抗抑郁机制。结果 慢性应激所造成的抑郁症模型大鼠海马与皮层 5 HT1A受体mRNA表达数量明显下降 (P <0 0 1) ,四逆散活性成分能显著升高海马 5 HT1A 受体mRNA表达数量(P <0 0 1) ,对皮层的 5 HT1A 受体mRNA表达数量也有升高 (P <0 0 5 )。结论 调节 5 HT1A 受体mRNA的表达数量是四逆散活性成分的抗抑郁机制之一。

α-,β-和γ-倒捻子素药理研究进展

山竹子果壳是东南亚地区广泛用于消炎、抗溃疡、治腹泻和杀菌的传统药物。其中分离出的α,β-和γ倒捻子素是其主要生物活性的化合物,具有不同程度的消炎、杀菌、抗阿米巴痢疾和抗溃疡的活性。本文就国外近年来对α,β和γ倒捻子素抑制环氧化酶和神经鞘磷脂酶、拮抗组胺受体和5羟色胺受体、抗氧化、抗菌、植物雌激素样和促进细胞凋亡等药理作用以及它们的化学结构与药理活性作用关系的研究进展进行了综述。

枳实提取物对功能性消化不良大鼠的促消化作用研究

目的 探讨枳实提取物对功能性消化不良(FD)大鼠的促消化作用。方法 大鼠随机分为总黄酮高、中、低剂量组,生物碱高、中、低剂量组,阳性对照组,模型对照组和空白对照组。除空白对照组外,其余组均造成FD模型,连续给予7天受试物后,测定胃残留率和小肠推进率,分离血清测定胃动素(MTL)、胃泌素(Gas)、血管活性肠肽(VIP)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟色胺受体4(5-HTR4)含量。结果 给予总黄酮或高剂量生物碱后的FD大鼠小肠推进率均高于模型对照组(P<0.05);总黄酮组的胃残留率低于模型对照组(P<0.05)。给予总黄酮或高、中剂量生物碱后,FD大鼠VIP含量显著低于模型对照组(P<0.05);总黄酮组的MTL含量显著高于模型对照组(P<0.05)。另外,给予高、中剂量总黄酮后,FD大鼠的5-HT含量和5-HTR4含量均显著高于模型对照组(P<0.05)。结论 枳实生物碱能抑制FD大鼠的VIP分泌,从而促进小肠蠕动;而枳实总黄酮能够通过促进FD大鼠分泌MTL,抑制VIP分泌,改善FD大鼠的胃排空和小肠蠕动功能,还能促进5-HT分泌,加强其与小肠中的5-HTR4受体的结合来增强FD大鼠胃肠动力。

N-吲哚烷基哌啶类化合物及其类似物的合成和活性研究

目的以5-羟色胺转运体和5-HT2A受体为靶点,设计合成N-吲哚烷基哌啶类化合物及其类似物,研究它们的体内外生物活性。方法以苯并五元氮杂化合物为原料,经烷基化反应,再与相应的哌啶或哌嗪类化合物进行缩合制备系列化合物。经5-羟色胺再摄取抑制实验和5-HT2A受体结合实验进行体外筛选,采用小鼠醋酸扭体法和小鼠热板法对其中优选化合物10c、10e进行体内镇痛活性实验;通过阿片受体结合试验和小鼠急性毒性试验,考察目标化合物作为新型非阿片类镇痛剂的潜在开发价值。结果与结论共合成了18个未见文献报道的新化合物,经高分辨质谱及核磁共振氢谱确证结构。体内外药理研究表明:化合物10c和10e具有较强的5-羟色胺再摄取抑制作用,且与5-HT2A受体有较高亲和力;10c、10e在两种镇痛模型上均显示出很强的镇痛活性,与阿片μ、δ、κ受体无明显亲和力,毒性较小,具有作为非阿片类新型镇痛剂的开发价值。