海马5-羟色胺受体4及let-7a在双重应激诱发大鼠抑郁中的作用

目的研究双重应激对大鼠行为及其海马内5-羟色胺受体4（HTR4）及microRNAlet-7a水平的影响，探索海马内HTR4及let-7a的基因表达异常是否参与双重应激诱发抑郁的过程，及let-7a是否参与海马内HTR4基因表达的调控。方法将新生sD雄性大鼠，按窝别随机分为双重应激组（DS组，n=6）和正常对照组（C组，n=6）。DS组大鼠于出生后即接受两周母爱剥夺应激处理，至10周龄时再接受3周慢性不可预知性应激处理，C组大鼠不接受任何实验性处理；待大鼠13周龄时，采用旷场试验、强迫游泳及糖水偏爱实验评定两组大鼠的抑郁水平，并采用实时定量RT-PCR法检测大鼠海马内let-7a水平，采用WesternBlot法检测大鼠海马内HTR4的蛋白水平。结果与c组相比，Ds组大鼠在旷场试验中的直立次数较少[分别为（19．00±5．73）次及（7．50±2．35）次]（P〈0．05），DS组大鼠在强迫游泳实验中的静止漂浮时间较长[分别为（70．33±1．16）S及（110．17±1．72）s]（P〈0．05），DS组大鼠在糖水偏爱实验中的糖水偏爱率较低[分别为0．80±0．73及0．52±0．26]（P〈0．05），DS组大鼠海马内HTR4蛋白水平降低[分别为（1．44±0．38）及（0．46±0．29）]（P〈0．01），let-7a水平较高[分别为（0．04±0．01）及（1．58±0．27）]（P〈0．01）；皮尔逊相关分析显示，大鼠糖水偏爱率与其海马内let-7a表达量呈负相关（r=-0．653，P〈0．05），与其海马内HTR4蛋白表达量呈正相关（r=0．774，P〈0．01），大鼠海马内let-7a与HTR4蛋白表达量呈负相关（r=-0．803，P〈0．01）。结论DS可诱发大鼠抑郁样表型，影响大鼠海马内HTR4及let-7a的基因表达；大鼠海马内HTR4及let-7a可能参与调节其快感体验能力；let-7a可能参与海马内HTR4基因表达的调控。

5-羟色胺受体4基因多态性与汉族人群慢性阻塞性肺疾病的关联性研究

目的 研究5-羟色胺受体4（HTR4）基因多态性与汉族人群慢性阻塞性肺疾病（COPD）及肺功能指标的相关性.方法 采用病例对照的研究方法,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法对126例COPD患者及110例健康对照者的单核苷酸多态性（SNP）位点rs3995090进行基因分型,并分析该SNP位点与COPD、第1秒用力呼气容积（FEV1）及FEV1/用力肺活量（FVC）相关性.结果 SNP位点rs3995090基因型频率均符合Hardy-Weinberg平衡定律（P＞0.05）.rs3995090在COPD患者中最小等位基因频率A为34％,在健康人群中为25％,组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）.在COPD患者及健康对照者中,rs3995090基因型与FEV1值之间均存在相关性（P均＜0.05）.结论 HTR4基因多态性可能与汉族人群COPD的发病及肺功能指标FEV1值之间存在关联性.

眼针疗法对肠易激综合征模型大鼠结肠组织5-羟色胺4受体表达的影响

目的研究肠易激综合征(IBS)模型大鼠远端结肠组织5-羟色胺4受体(5-HT4R)的表达以及眼针干预的影响。方法实验动物分成正常对照组、IBS模型组、眼针组,采用束缚刺激与应激刺激相结合的方法建立IBS动物模型并进行眼针干预。采用Western-Blot法、RT-PCR法检测各组大鼠远端结肠组织中5-HT4R的蛋白和mRNA表达。结果与正常对照组比较,IBS模型组5-HT4R的蛋白和mRNA表达均下调;而与IBS模型组比较,眼针组5-HT4R表达明显上调。结论 IBS模型大鼠结肠组织5-HT4R水平下调,提示5-HT4R可能是IBS分子生物学基础之一,为IBS的治疗提供了分子靶点。眼针干预可有效改善IBS大鼠5-HT4R表达水平。

5-羟色胺4受体调节剂对肝部分切除大鼠胃肠5-羟色胺分泌和肝再生的影响

目的探讨5-羟色胺4(5-HT4)受体调节剂(激动剂和抑制剂)对肝部分切除(PH)后大鼠胃肠道5-羟色胺(5-HT)和肝再生的影响。方法 60只成年SD大鼠PH后分为对照组、西沙必利(激动剂)组和GR113808(抑制剂)组3组;西沙必利组PH后每12h按10mg/kg体重的西沙必利灌胃,GR113808组PH后每12h按3mg/kg体重的GR113808腹腔注射;分别于PH后0h、24h、48h、72h计算肝/体重比,并取血液、胃、小肠和肝组织;用免疫组织化学技术显示胃肠中5-HT免疫阳性(5-HTIR)细胞,用图像分析系统测定胃肠5-HTIR细胞平均灰度,用酶联免疫吸附法(ELESA)检测血液中的5-HT,用银染技术显示肝细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)。结果与对照组比,1.西沙必利组胃肠中5-HTIR细胞数于PH后48～72h显著下降(P<0.05)、细胞的灰度于PH后24～72h显著上升(P<0.05),血中5-HT的含量于PH后24～72h显著上升(P<0.05),肝/体重比和肝组织AgNORs颗粒数在PH后48～72h显著增加(P<0.05);2.GR113808组在PH后24～72h期间,5-HTIR细胞数较对照组无显著性差异,但细胞的灰度显著下降(P<0.05或P<0.01),血中5-HT的含量显著下降(P<0.05或P<0.01),肝/体重比于48～72h显著下降(P<0.05或P<0.01),肝中AgNORs颗粒数于24～72h显著减少(P<0.05或P<0.01)。结论用5-HT4受体调节剂改变胃肠道5-HT的分泌量,可导致肝/体重比和肝细胞的转录活性发生相应的改变;胃肠道分泌的5-HT具有促进肝细胞增殖的作用。

5-羟色胺4受体激动剂诱导肠神经元再生恢复肠道功能的研究进展

肠神经系统（enteric nervous system，ENS）是消化系统内所含神经元及其网络结构的总称。对胃肠道运动、感觉、分泌功能及其相应血液供应具有独立调节作用。肠壁神经丛损伤可能与药物、饮食、手术、神经干细胞、炎症、生长发育等多种因素有关，可表现为神经变性、神经节细胞缺失；神经递质合成、含量、分泌异常及其受体系统表达上调或下调；胃肠道运动、感觉、分泌功能紊乱等。大量研究证实神经干细胞、神经营养因子（neurotrophic factor；NTF）及5-羟色胺（5-hydroxy tryptamine；5-HT）4受体激动剂等对肠壁神经丛损伤具有修复、重塑作用[1-2]。

5-羟色胺4受体激动剂Prucalopride对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响

目的观察5-羟色胺(5-HT)4受体激动剂Prucalopride对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响,并探讨其机制。方法将胃癌细胞MKN28随机分为观察组和对照组,分别予以10μmol/L的Prucaloprid及等体积DMSO处理24 h,分别采用CCK8、Transwell、流式细胞术检测细胞增殖(OD值)、迁移和侵袭(穿膜细胞数)及细胞凋亡,用Western blotting法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、活化的Caspase3(Active Caspase3)及PI3K信号通路关键蛋白蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、P70。结果两组处理24 h时细胞OD值比较无统计学差异,48、72 h时观察组细胞OD值均低于对照组(P均<0.05);观察组细胞迁移及侵袭个数分别为(150±6)、(59±2)个,均高于对照组的(58±3)、(21±4)个(P均<0.05);观察组细胞凋亡率为26.1%,高于对照组的3.9%(P<0.05)。与对照组比较,观察组抗凋亡蛋白Bcl-2表达量下降(P<0.05),促凋亡蛋白Bax、Active Caspase3及PI3K信号通路蛋白p-AKT、p-mTOR、P70表达量增加(P均<0.05)。结论 Prucalopride可抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进胃癌细胞凋亡,并可能通过激活PI3K信号通路发挥该作用。

5-羟色胺4受体对消化道的作用及临床意义

5-羟色胺4受体在消化道中所起的作用日益受到重视,近年来由于该受体基因的克隆,对它的了解逐渐增多。本文对消化道中5-羟色胺4受体的结构、组成、生物化学、生理意义和临床应用作一综述。

5-羟色胺4受体激动剂对糖尿病小鼠结肠黏膜巨噬细胞极化的影响

目的研究5-羟色胺4受体(5-hydroxytryptamine 4 receptor,5-HT_(4)R)激动剂对糖尿病结肠黏膜巨噬细胞极化的影响。方法使用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立小鼠1型糖尿病模型,使用5-HT_(4)R激动剂RS67333进行治疗干预,实验动物随机分为3组,即非糖尿病组、糖尿病对照组和糖尿病给药组。通过免疫荧光方法验证巨噬细胞标记物F4/80和iba1在CX3CR1-GFP^(+)细胞中的表达;通过激光共聚焦显微镜观察CX3CR1-GFP^(+)细胞形态和数目分析结肠黏膜巨噬细胞的活化数量;通过RNAscope技术检测精氨酸酶1(arginase 1,Arg1)和一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达和分布变化。结果免疫荧光结果显示F4/80和iba1免疫阳性的细胞与CX3CR1-GFP^(+)的细胞基本共定位。与非糖尿病小鼠相比,STZ诱导的1型糖尿病模型小鼠结肠黏膜层活化的巨噬细胞数目增多(P<0.001),且M1型巨噬细胞产物iNOS在黏膜层腔侧表达增加(P<0.001),而M2型巨噬细胞产物Arg1在黏膜固有层表达下降(P<0.001);与糖尿病对照组相比,给予5-HT_(4)R激动剂可以抑制活化的巨噬细胞数目(P<0.001),结肠黏膜iNOS的表达上调(P<0.01)和Arg1的表达下调(P<0.05)。结论5-HT_(4)R激动剂可以抑制糖尿病小鼠结肠黏膜巨噬细胞向M1型极化。

电针天枢穴和太冲穴对便秘型肠易激综合征模型小鼠5-羟色胺信号系统的影响

目的:观察电针天枢穴和太冲穴对便秘型肠易激综合征(IBS-C)模型小鼠5-羟色胺(5-HT)信号系统的影响,为临床治疗提供依据。方法:36只野生型小鼠,按随机数字表法分为3组,每组12只。对照组不做处理,模型组与电针组经冰水灌胃法成功建立IBS-C模型。电针组针刺双侧天枢穴、太冲穴,日1次,每次15 min,共治疗14 d。对照组和模型组均正常喂养,不做其他特殊处理。观察各组小鼠首粒黑便排出时间、粪便颗粒数及含水量,检测各组小鼠血清中5-HT的表达以及远端结肠组织5-羟色胺4型受体(5-HT4R)蛋白及mRNA的表达。结果:与对照组比较,模型组小鼠首粒黑便排出时间延长,粪便颗粒数及含水量降低,血清中5-HT的表达升高,远端结肠组织5-HT4R蛋白及mRNA的表达下调;与模型组比较,电针组小鼠首粒黑便排出时间缩短,粪便颗粒数及含水量增加,小鼠血清中5-HT的表达量下调,远端结肠组织5-HT4R蛋白及mRNA的表达上调。结论:电针天枢穴和太冲穴可以通过调节5-HT信号系统治疗IBS-C。

防风提取物通过5-羟色胺信号轴对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠黏膜肥大细胞的影响

[目的]探讨防风提取物通过5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)信号轴对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠黏膜肥大细胞的作用。[方法]60只清洁级健康SD大鼠中随机选择10只作为A组,剩余50只建立腹泻型肠易激综合征模型,建模成功46只,随机分为B组(11只)、C组(11只)、D组(12只)、E组(12只)。A组、B组灌胃5 mL蒸馏水;C组灌胃5-HT信号抑制剂昂丹司琼2.6mg/(kg·d)(溶于5 mL蒸馏水);D组灌胃防风提取物6.3mg/(kg·d)(溶于2.5 mL蒸馏水)+昂丹司琼2.6mg/(kg·d)(溶于2.5 mL蒸馏水);E组灌胃防风提取物6.3mg/(kg·d)(溶于5 mL蒸馏水)。观察各组大鼠精神心理行为变化,检测排便粪点数、直肠内玻璃小球排出时间;以苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察结肠黏膜组织病理学改变;甲苯胺蓝染色法检测结肠黏膜肥大细胞数、阳性面积;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)检测结肠组织5-HT3受体(5-HT3 receptor,5-HT3R)、5-HT4受体(5-HT4 receptor,5-HT4R)、色氨酸羟化酶1(tryptophan hydroxylase 1,TPH1)mRNA相对表达量;Western blot检测结肠组织5-HT3R、5-HT4R、TPH1蛋白相对表达量。[结果]与A组比较,B组、C组、D组、E组水平运动次数、垂直运动次数减少,而且C组<B组<D组<E组(P<0.05)。与A组比较,B、C、D、E组粪点数增多,直肠内玻璃小球排出时间减少,且粪点数,E组<D组<B组<C组,直肠内玻璃小球排出时间,C组<B组<D组<E组(P<0.05)。HE染色显示,与B、C组比较,D、E组结肠黏膜上皮较完整,腺体排列较整齐,间质未见炎性细胞、红细胞,其中E组改善更显著。与A组比较,B、C、D、E组肥大细胞数、阳性面积增高,E组<D组<B组<C组(P<0.05)。与A组比较,B、C、D、E组5-HT3R、TPH1 mRNA及蛋白相对表达量升高,5-HT4R mRNA及蛋白相对表达量降低,且5-HT3R、TPH1 mRNA及蛋白相对表达量,E组<D组<B组<C组,5-HT4R mRNA及蛋白相对表达量,C组<B组<D组<E组(P<0.05)。[结论]防风提取物可减少腹泻型肠易激综合征大鼠结肠黏膜肥大细胞数,改善肥大细胞功能及大鼠行为,作用机制可能与调节5-HT信号轴有关。

电针对便秘型肠易激综合征大鼠结肠组织5-HT、5-HT_4受体的调节作用

目的通过观察电针对便秘型肠易激综合征大鼠结肠组织5HT、5-HL受体的调节作用，探讨电针治疗便秘型肠易激综合征的效应机制。方法将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组和西药组，采用0～4℃生理盐水灌胃方法建立便秘型肠易激综合征大鼠模型：模型制备成功后电针组和西药组均连续治疗7d。治疗结束后，对大鼠直肠扩张刺激诱导的腹部撤回反射（AWR）进行半定量评分，采用酶联免疫技术检测结肠黏膜5-HT含量，采用免疫组化法观察结肠黏膜5-HT。受体的表达。结果与正常组相比较，模型组大鼠在肠道压力为20mmHg时腹部撤回反射评分降低（P〈0．01）：与模型组相比较，电针组和西药组在肠道压力为20mmHg时腹部撤回反射评分增高（P〈0．05）。与正常组相比较，模型组大鼠结肠5-HT含量增高（P〈0．05），5HTa受体平均光密度降低（P〈0．05）：与模型组比较，电针组和西药组结肠5-HT含量降低（P〈0．01，P〈0．05），电针组5-HT。受体平均光密度增加（P〈0．05）：电针组与西药组5-HT浓度降低之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论电针能够抑制5-HT在便秘型肠易激综合征大鼠肠道的异常表达，增加5-HT4R表达。

4种5-HT_4受体激动剂对大鼠心肌I_(K1)通道的影响及促心律失常风险比较

目的比较4种5-羟色胺4型(5-HT4)受体激动剂西沙必利(cisapride),扎考必利(zacopride),莫沙必利(mosapride)和2[1-(4-胡椒基)哌嗪]基苯并噻唑{2-[1-(4-Piperonyl)piperazinyl]benzothiazole,BZTZ}对大鼠心室肌细胞膜内向整流钾通道(IK1)功能和蛋白表达的影响,并观察其对大鼠离体心脏心律的影响,从而评估其致心律失常的风险。方法应用全细胞膜片钳技术分别观察4种激动剂对胶原酶分解的成年SD大鼠心室肌细胞膜IK1和HEK293细胞异源表达的Kir2.1通道电流的影响。应用免疫印迹法检测4种激动剂孵育大鼠心室肌细胞24 h后IK1主要亚单位Kir2.1通道蛋白表达的变化。将麻醉大鼠的心脏取出进行Langendorff主动脉逆行灌流,分别观察4种激动剂给药30 min内离体心脏节律的变化,全程记录心电图。结果在大鼠心室肌细胞,BZTZ,西沙必利和莫沙必利0.1~10μmol·L-1可浓度依赖性地抑制IK1。在相同浓度(1μmol·L-1)时,BZTZ对IK1的抑制效应最强(P<0.01),其次为西沙必利,莫沙必利最弱。扎考必利可激动IK1(P<0.01)。在Kir2.1重组质粒转染HEK293细胞,扎考必利激动Kir2.1通道电流(P<0.01),而莫沙必利无明显影响。在大鼠离体心脏,BZTZ和西沙必利1μmol·L-1可引起严重的心律失常,期前收缩数分别达到159±28和(61±13)次(P<0.01),室速发生率分别为50%(P<0.05)和25%,室颤发生率分别为37.5%和12.5%。莫沙必利和扎考必利对心律均无明显影响,不引起心律失常的发生。扎考必利还可抑制西沙必利和BZTZ诱发的心律失常。4种激动剂的促心律失常风险等级依次为BZTZ>西沙必利>莫沙必利和扎考必利。结论 IK1可能作为5-HT4受体激动剂致心律失常副作用的独立风险因子和筛选安全5-HT4受体激动剂和促胃肠动力药的新靶点。

5-HT4受体对人消化间期小肠运动调控及其机制研究

目的通过观察5-羟色胺(5-HT4)受体激动剂对人消化间期移行性复合运动(MMC)及血浆胃肠激素的影响,探讨5-HT4受体激动剂对MMC的调控作用及其可能的介导因素。方法选取健康志愿者18人并观察给予选择性5-HT4受体激动剂后MMC的变化。并且在给药前后检测MMC不同时期血浆胃动素(MOT)、生长抑素(SS)、NO的浓度。结果健康人给药后MMC周期显著缩短[(87.5+24.2)min vs(60.5±18.4)min,P<0.001],MMCⅢ期波幅、动力指数、传播速度均比给药前显著升高(P<0.05)。MMC不同时期血浆MOT含量无显著变化(P>0.05),SS水平显著升高(P<0.01),而NO含量显著降低(P<0.05)。结论 5-HT4受体激活对人MMC有兴奋性作用,该兴奋作用可能通过SS、NO等胃肠激素起作用。

戊己丸不同配伍方对结肠平滑肌细胞5-HT3,4受体及下游信号传导通路主要元件的影响

目的:观察戊己丸不同配伍方对平滑肌细胞5-羟色胺3,4受体及其下游信号通路的影响。方法:采用Bitar的方法分离培养大鼠结肠平滑肌细胞,α-actin免疫组化鉴定。应用免疫荧光法和钙离子探针检测5-羟色胺3,4受体表达及Ca2+浓度;应用ELISA试剂盒检测cAMP,PKA的浓度。结果:1号方和2号方对大鼠结肠平滑肌细胞5-羟色胺3,4受体的表达及Ca2+浓度均具有抑制作用(P<0.05);可显著下调平滑肌细胞的cAMP和PKA水平(P<0.05);2号方作用效果优于1号方。结论:戊己丸可抑制5-羟色胺3,4受体表达及下调Ca2+,cAMP,PKA水平。

电针对慢性社交挫败抑郁模型小鼠行为学及脑组织p11、5-HTR4表达的影响

目的观察电针对慢性社交挫败抑郁模型小鼠脑组织p11和5-羟色胺受体4(5-HTR4)表达的影响,探讨电针改善小鼠抑郁症的可能机制。方法40只C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、假针组和电针组,每组10只。采用定期社交行为应激建立慢性社交挫败抑郁模型,电针组于“百会”“印堂”行电针干预,每日1次,每次15 min,每周5次,连续3周,假针组处理方法与电针组相同,但毫针不刺入皮肤,对照组和模型组仅捆绑固定相同时间,不进行干预。采用糖水实验、旷场实验、社交行为测试和强迫游泳实验评价小鼠行为学变化,RT-PCR检测小鼠中缝核p11 mRNA表达,Western blot检测小鼠海马组织5-HTR4蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠社交指数、糖水偏好百分比明显降低(P<0.01),强迫游泳实验不动时间明显延长(P<0.001),旷场实验直立次数、中央距离和中央时间明显减少(P<0.01,P<0.001),中缝核p11 mRNA和海马组织5-HTR4蛋白表达明显降低(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,电针组小鼠社交指数、糖水偏好百分比明显升高(P<0.05),强迫游泳不动时间明显缩短(P<0.01),旷场实验中央时间明显增加(P<0.01),中缝核p11 mRNA和海马组织5-HTR4蛋白表达明显升高(P<0.05);与假针组比较,电针组小鼠糖水偏好百分比明显升高(P<0.05),强迫游泳不动时间明显减少(P<0.05)。结论电针可能通过上调慢性社交挫败抑郁模型小鼠中缝核p11 mRNA表达,促进5-HTR4在谷氨酸能神经元质膜上表达,进而改善小鼠抑郁样行为。

激活和阻断内侧前额叶皮质PrL区5-HTR4对帕金森病大鼠焦虑行为的改善作用

目的:探讨内侧前额叶皮质(mPFC)的边缘前皮质(PrL)区5-羟色胺受体4(5-HTR4)在帕金森病(PD)大鼠焦虑样行为中的作用,阐明PD大鼠相关焦虑行为的可能神经机制。方法:320只雄性SD大鼠随机分为假手术组和盐酸6-羟基多巴(6-OHDA)毁损组[内侧前脑束(MFB)注射6-OHDA制备大鼠PD模型],每组160只。采用旷场实验和高架十字迷宫实验评测PrL区局部给予5-HTR4激动剂BIMU8或5-HTR4拮抗剂GR1138082组大鼠的焦虑行为;采用免疫组织化学染色法观察大鼠黑质致密部(SNc)和腹侧被盖区(VTA)多巴胺(DA)神经元缺失程度,计算酪氨酸羟化酶免疫反应(TH-ir)阳性神经元百分率,高压液相色谱法检测大鼠焦虑相关脑区的单胺类神经递质水平。结果:与假手术组比较,6-OHDA毁损组大鼠在旷场实验中的中央区停留时间百分比明显降低(P<0.01),在高架十字迷宫实验中开放臂进入次数百分比和开放臂停留时间百分比明显降低(P<0.05或P<0.01)。与给药前比较,PrL区给予BIMU8或GR113808后,假手术组大鼠在旷场实验中的中央区停留时间百分比、高架十字迷宫实验中开放臂进入次数百分比和开放臂停留时间百分比差异无统计学意义(P>0.05);而6-OHDA毁损组大鼠在旷场实验中的中央区停留时间百分比均明显升高(P<0.01),高架十字迷宫实验中开放臂进入次数百分比和开放臂停留时间百分比均明显升高(P<0.05或P<0.01)。与假手术组比较,6-OHDA毁损组大鼠损毁侧SNc和VTA区脑组织中TH-ir阳性神经元百分率明显降低(P<0.01),毁损侧的纹状体、mPFC、杏仁核(Amy)和腹侧海马(vHip)脑组织中单胺类神经递质水平明显降低(P<0.01)。结论:激活或阻断mPFC的PrL区5-HTR4均可改善PD大鼠相关的焦虑样行为。

健脾化湿颗粒对D-IBS模型大鼠脑中5-HT及5-HTR3,5-HTR4表达的影响

目的:从前额叶皮质、海马及下丘脑中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和5-羟色胺受体3(5-hydroxytryptamine receptor3,5-HTR3),5-羟色胺受体4(5-HTR4)角度探讨健脾化湿颗粒改善腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,D-IBS)模型大鼠结肠运动和内脏敏感性的作用机制.方法:采用番泻叶灌胃结合束缚应激法建立D-IBS大鼠模型,应用健脾化湿颗粒进行干预,采用酶联免疫法(ELISA)检测大鼠海马中5-HT含量,采用免疫组织化学法检测前额叶皮质、海马及下丘脑中5-HT、5-HTR3、5-HTR4阳性表达,采用逆转录-聚合酶链反应法检测海马中5-H T R3 m R N A和5-H T R4m RNA的表达水平.结果:与正常组相比,模型组海马中5-HT含量(327.30±22.35 vs 265.33±13.60),前额叶皮质、海马、下丘脑中5-HT阳性表达(0.16±0.02 vs 0.08±0.01,0.19±0.02 vs 0.09±0.01,0.17±0.02 vs 0.08±0.01)明显升高(P<0.01);前额叶皮质、海马、下丘脑中5-HTR3阳性表达(0.29±0.02 vs 0.10±0.01,0.23±0.02 vs 0.09±0.01,0.22±0.02 vs 0.09±0.02)及5-HTR4阳性表达(0.25±0.02 vs0.11±0.01,0.28±0.02 vs 0.10±0.02,0.27±0.02 vs 0.11±0.02)明显升高(P<0.01);海马中5-H T R3 m R N A和5-H T R4 m R N A的表达(0.54±0.01 vs 0.17±0.05,0.73±0.08 vs 0.10±0.02)显著升高(P<0.01).与模型组相比,阳性对照组、中、高剂量组海马中5-H T含量(298.92±12.16、286.29±24.43、279.86±20.05 vs 327.30±22.35)显著下降(P<0.05,P<0.01),中、高剂量组前额叶皮质中5-HT表达(0.12±0.01、0.11±0.01 vs 0.16±0.02)显著下降(P<0.01),阳性对照组、中、高剂量组海马、下丘脑中5-H T表达显著下降(P<0.05,P<0.01);各治疗组前额叶皮质、海马、下丘脑中5-H T R3表达及5-H T R4表达下降显著(P<0.05,P<0.01);各治疗组海马中5-H T R3 m R N A表达及5-H T R4 m R N A表达显著降低(P<0.05,P<0.01).结论:健脾化湿颗粒可能通过下调脑中5-HT、5-HTR3、5-HTR4表达来改善D-IBS模型大鼠结肠运动和内脏敏感性.

5-HTR4和GABRG2基因多态性与精神分裂症关系

目的探讨5-羟色胺4受体基因(5-HTR4)和γ-氨基丁酸-γ2受体基因(GABRG2)基因多态性与精神分裂症的关系。方法在95个中国北方汉族精神分裂症患者和他们的健康父母组成的核心家系中,以聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对5-HTR4基因rs888957(C/T碱基改变)和GABRG2基因rs211014(T/G碱基改变)单核苷酸多态性(SNP)进行检测。应用基于家系的连锁不平衡方法分析基因型数据。结果(1)5-HTR4基因rs888957及GABRG2基因rs211014基因型频率的分布均符合Hardy-Weinberg平衡;(2)传递不平衡检验(TDT)结果提示,5-HTR4基因rs888957及GABRG2基因rs211014与精神分裂症无连锁及关联;(3)UNPHASED双位点单体型分析结果显示,rs888957-rs211014单体型系统与精神分裂症无关联(P>0.05);(4)5-HTR4基因的rs888957位点等位基因分布与精神分裂症的阳性症状钟情妄想相关联(P<0.01)。GABRG2基因的rs211014位点等位基因分布与精神分裂的阳性症状冲动伤人行为相关联(P<0.05)。结论5-HTR4基因rs888957位点及GABRG2基因rs211014位多点态性可能与精神分裂症无关,但不能排除5-HTR4基因及GABRG2基因其他SNPs与精神分裂症相关联。

电针不同腧穴对功能性腹泻大鼠多组织5-HT3R、5-HT4R的影响

目的观察功能性腹泻(FDr)模型大鼠的下丘脑、脊髓、胃、肠中5-羟色胺3受体(HT3R)、5-羟色胺4受体(HT4R)mRNA的表达,探讨电针治疗FDr的作用机制,并分析经穴脏腑相关性。方法将48只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,足三里组,阴陵泉组,阴谷组、非经非穴组;每组8只。连续14 d用束缚、冷刺激、饮食失节等综合方法制备FDr模型。模型复制成功后,足三里组、阴陵泉组、阴谷组、非经非穴组给予电针干预20 min,1次/d,共7 d。测定大鼠胃内残留率与小肠推进率,并采取实时荧光定量PCR法检测下丘脑、脊髓、胃肠中5-HT3R、5-HT4R mRNA的表达。结果与正常组相比,造模后胃内残留率与小肠推进率均明显升高(P<0.05);模型组下丘脑、脊髓、胃肠中5-HT3R mRNA表达明显增加,5-HT4R mRNA表达明显减少(P<0.05)。电针后,足三里组和阴陵泉组与模型组相比,胃内残留率明显降低(P<0.05);下丘脑、脊髓、胃肠中5-HT3R mRNA表达明显减少,下丘脑、脊髓、胃窦中5-HT4R mRNA表达明显增加(P<0.05);与模型组相比,足三里组小肠推进率及结肠中5-HT4R mRNA表达明显升高(P<0.05)。与阴谷组、非经非穴组相比,足三里组胃内残留率、小肠推进率均明显降低(P<0.05);足三里组下丘脑、脊髓、胃、肠中5-HT3R mRNA表达明显减少,5-HT4R mRNA表达明显增加(P<0.05)。结论电针足三里穴和阴陵泉穴通过影响5-HT3R、5-HT4R mRNA表达对FDr起整体调节作用,提示经穴与脏腑之间存在特异性联系。