砒石对哮喘小鼠5-脂氧合酶激活蛋白基因表达及白三烯C_4的影响

目的 探讨 5 脂氧合酶激活蛋白 (FLAP)基因表达、小鼠白三烯C4(LTC4)水平在小鼠哮喘发病中的作用 ,以及砒石对哮喘的治疗作用与FLAP基因表达及LTC4水平的关系。方法 建立小鼠卵蛋白哮喘模型 ,灌胃给予砒石等药 ,用逆转录聚合酶链反应方法检测肺组织中FLAPmRNA表达的变化 ;用ELISA方法检测支气管肺泡灌洗液 (BALF)中LTC4含量。结果 哮喘小鼠肺组织FLAP基因表达水平、BALF中LTC4水平均较正常对照组显著升高。 1 2 5、2 5 0及 5 0 0mg/kg剂量的砒石可下调哮喘小鼠FLAPmRNA表达的量 ,抑制哮喘小鼠BALF中LTC4的水平。结论 气道中FLAP基因表达上调和LTC4水平增高在OVA致敏小鼠哮喘发病中起着重要作用。砒石可显著抑制哮喘小鼠肺组织中FLAP基因的表达 ,降低哮喘小鼠BALF中LTC4水平 ,具有抗哮喘活性。

磷酸二酯酶基因和5-脂氧合酶激活蛋白基因多态性与脑梗死的关联性研究

目的研究磷酸二酯酶基因(PDE4D)和5-脂氧合酶激活蛋白基因(ALOX5AP)多态性与脑梗死(CI)的关联性。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测PDE4D基因SNP83/SNP87位点和基因ALOX5AP的SG13S100/SG13S114位点的基因多态性,结合问卷调查结果分析基因多态性与CI的相关性。结果 CI发病流行因素包括高年龄、高血压、高胆固醇血症和心房颤动,287例CI组与300名对照组中PDE4D基因SNP83位点的C/T分布、ALOX5AP基因的SG13S100位点的A/G分布、SG13S114位点的T/A分布差异均具有统计学意义(P<0.05),SNP87C/T分布差异无统计学意义。结论 CI分布的遗传危险因素包括SNP83C/T、SG13S100A/G、SG13S114T/A三种基因位点多态性的变化。

5-脂氧合酶激活蛋白及磷酸二酯酶4D基因多态性与脑梗死易患性的分子流行病学研究

目的:分析5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)及磷酸二酯酶4D(PDE4D)基因多态性与脑梗死(CI)易患性的分子流行病学特征。方法:收集CI患者396例作为病例组,另选取300名健康体检者作为对照组,运用PCR检测技术和基质辅助激光解析分析2组受检者ALOX5AP基因中SG13S89、SG13S114和PDE4D基因中SNP83的多态性,分析ALOX5AP及PDE4D基因多态性与CI的关系。结果:病例组SG13S89中AG基因型、A等位基因频率均高于对照组(P<0.05)。多元logistic逐步回归分析显示,调整年龄、高血压及糖尿病等因素的影响后,SG13S89中AG基因型是增加CI发生的危险性因素(P<0.05);AT型及SAD型CI患者SG13S89基因中的基因型及基因频率差异均无统计学意义(P>0.05);年龄分层后分析发现,女性是增加SG13S89基因中的AG基因型发生脑卒中的危险因素(P<0.05)。结论:SG13S89中的AG基因型和A等位基因使得CI的频率高于其他等位基因,可能的机制是通过介导的血管炎性反应实现,而未发现SG13S114及SNP83基因的多态性与CI有关。

5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因多态性在缺血性卒中中的研究进展

缺血性卒中是一种复杂的多因素疾病,关于这个疾病的遗传学组成为流行病学数据提供了大量证据。但是易患人群的范围还不清楚。对单基因紊乱相关的缺血性中风的研究已经取得了很大进步。但与基因相关的复杂多因子遗传卒中知之甚少。通过全基因组连锁研究确认了在冰岛人口中5-脂氧合酶激活蛋白(5-lipoxygenase activating protein,ALOX5AP,FLAP)的单元型是缺血性脑卒中的危险因素,但它们在其他人口中的作用还不能确定。高通量基因分析和生物统计学的进步使新的研究设计成为可能,包括全基因组研究。这个途径将可识别其他基因和最终发现治疗缺血性卒中的新方法。

新疆维吾尔族急性缺血性脑卒中短期预后与5-脂氧合酶激活蛋白SG13S32位点及危险因素的相关性研究

目的探讨新疆维吾尔族人群急性缺血性脑卒中短期预后与5-脂氧合酶激活蛋白(5-lipoxygenase-activating,ALOX5AP)基因SG13S32位点、年龄、性别、就诊时间等危险因素的相关性。方法选取194例新疆地区急性缺血性脑卒中经相同药物治疗后的维吾尔族患者,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测ALOX5AP基因SG13S32位点多态性,采用队列研究的统计分析方法比较不同基因型人群的短期预后改善情况,并经Logistic逐步回归分析,得出预后相关独立因素。结果 5-脂氧合酶激活蛋白基因SG13S32位点不同基因型间维吾尔族急性缺血性脑卒中短期预后改善差异无统计学意义(χ2=0.336,P=0.562)。经Logistic逐步回归分析,年龄、就诊时间及纤维蛋白原为影响维吾尔族急性缺血性脑卒中患者短期预后的独立因素。结论 5-脂氧合酶激活蛋白基因SG13S32位点不同基因型之间急性缺血性脑卒中短期预后改善没有明显差异,且不是影响维吾尔族急性缺血性脑卒中短期预后的独立危险因素。年龄、就诊时间及纤维蛋白原可影响急性缺血性脑卒中短期预后改善。

人重组5-脂氧合酶基因真核表达载体的构建和鉴定

基因表达载体的构建是进一步研究相应基因功能的基础.该文详细地介绍了人5-脂氧合酶基因真核细胞表达载体的设计理念和构建方法,并通过转染、western blotting等方法鉴定了该载体在HEK293T细胞中的表达.

5-脂氧合酶激活蛋白基因多态性与环境因素在缺血性卒中发生中的交互作用

目的探讨5-脂氧合酶激活蛋白基因（ALOX5AP基因）启动子区rs17222919位点基因多态性与环境因素在河南汉族人群缺血性卒中（Is）发病中的交互作用。方法对河南省汉族622例Is患者和631名健康对照者进行环境危险因素调查，运用TaqMan—PCR技术对ALOX5AP基因rs17222919位点进行基因分型，探讨其与IS发生的相关性，并根据交互作用系数（γ,γ=βeg/βe）判断交互作用及其作用模型。结果Is组rs17222919位点的TG（189／622，30．4％）、GG（18／622，2．9％）基因型频率及G等位基因频率（225／1244，18．1％）显著低于健康对照组（221／631，35．0％；31／631，4．9％；283／1262，22．4％），差异具有统计学意义（X2=4．117，P=0．042；x2=4．457，P=0．035；x2=7．294，P=0．007）。TG＋GG基因型与高血压、糖尿病、吸烟之间在Is发病中均存在负向交互作用（y=0．943、0．922、0．830），其作用模型均为超相乘模型。结论IS的发生是遗传及环境因素相互作用的结果。在河南汉族人群中，rs17222919位点G等位基因可能对Is发病的环境危险因素高血压、糖尿病、吸烟暴露的效应具有减弱作用。

缺血性卒中5-脂氧合酶激活蛋白基因多态性和相关药物的治疗进展

缺血性脑卒中是一种多因素多基因的疾病,为我国第一位死亡原因。尽管国内外缺血性脑卒中的研究甚多,但对基因相关的复杂多因子遗传性脑卒中却关注甚少。全基因组连锁不平衡研究确认5-脂氧合酶激活蛋白（5-lipoxygenase-acti-vatingprotein，ALOXSAP）基因与卒中的相关性，因此全球各国家进行大量的病例．对照研究，探寻ALOX5AP基因与脑卒中的关系。目前临床上治疗缺血性脑卒中的基因药物仍处于研发阶段，但在不久的将来，脑卒中的基因研究会为脑血管疾病的预防和治疗提供有效、个体化的方法。

连接酶反应分析ALOX5AP基因、PDE4D基因与江苏南京地区腔隙性脑梗死的易感性

目的:分析江苏省南京地区汉族人群腔隙性脑梗死患者的ALOX5AP基因、PDE4D基因单核苷酸多态性(singlenucleotide polymorphism,SNP),并研究其与脑梗死的发病是否存在相关性。方法:运用多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和连接酶检测反应(ligase detection reaction,LDR),观察280例腔隙性脑梗死患者和258例对照组人群的ALOX5AP基因及PDE4D基因的4个SNP位点,并进一步分析其基因型。结果:PDE4D基因rs966221、rs456009的等位基因、基因型频率在两组间没有显著性差异,单倍体型构成在两组间亦无显著性差异;ALOX5AP基因的两SNP(rs4073259、rs4769055)的等位基因和基因型频率在两组间差异均有显著性(P<0.05),SNP单倍体型(GA、GC)在两组间差异更为明显(P<0.01)。结论:本研究未发现PDE4D基因与腔隙性脑梗死的发病相关,但ALOX5AP基因可能为中国江苏省南京地区腔隙性脑梗死的易感基因。

ALOX5AP基因T(-1340)G多态性与中国北方汉族人群冠状动脉粥样硬化性心脏病发病的关联

目的:探讨编码5-脂氧合酶激活蛋白FLAP的基因ALOX5APT(-1340)G多态性与中国北方汉族人群冠心病发病的相关关系。方法:选自2006-01/2007-09在解放军沈阳军区总医院行选择性冠状动脉造影者共680例。根据造影结果分为冠心病组336例均为选择性冠状动脉造影阳性,对照组344例为造影阴性或动脉管腔狭窄<50%且临床上无相关心肌缺血证据者。在随机选择的无亲缘关系的48名中国北方汉族个体中,采用聚合酶链反应-重测序法对ALOX5AP基因进行单核苷酸多态的筛查,共发现7个多态。冠心病组和对照组受试者采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测ALOX5AP基因T(-1340)G多态性位点在两组间的基因型和等位基因分布。结果:ALOX5AP基因T(-1340)G3种基因型(TT型,TG型和GG型)在冠心病组分布频率分别为26.79%,51.79%和21.43%,在对照组分别为33.72%,47.38%和18.90%,两组间的基因型分布皆符合Hardy-Weinberg平衡定律,3种基因型在两组间的分布差异无显著性意义(χ2=3.90,P>0.05)。G等位基因在两组间的分布频率为47.32%和42.59%,差异无显著性意义(χ2=3.08,P>0.05)。按性别分层进行亚组分析,发现ALOX5APT(-1340)G多态的基因型和等位基因频率在冠心病组和对照组间的比较差异无显著性意义。结论:5-脂氧合酶激活蛋白基因ALOX5APT(-1340)G多态性与中国北方汉族人群冠心病发病可能无相关关系。

花生四烯酸5-脂氧合酶激活蛋白-1340 T/G单核甘酸多态性与急性心肌梗死相关性研究

目的探讨花生四烯酸5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)-1340 T/G单核甘酸多态性与急性心肌梗死相关性。方法选取自2015年2月至2017年6月于北部战区总医院心血管内科就诊的326例急性心肌梗死患者为急性心肌梗死组,另选取同期326例因胸痛住院并经冠状动脉造影检查显示为阴性的患者为阴性组。采用经典的测序分析ALOX5AP-1340 T/G单核甘酸多态位点基因型和等位基因频率的分布情况。采用多元Logistic回归分析法分析急性心肌梗死发病的独立危险因素。结果 ALOX5AP-1340 T/G单核苷酸多态位点存在TT型、TG型和GG型3种基因型。阴性组ALOX5AP-1340 T/G单核苷酸位点的三种基因型TT型、TG型和GG型的分布频率为29.1%(95/326)、49.1%(160/326)、21.8%(71/326),急性心肌梗死组的分布频率为24.5%(80/326)、44.5%(145/326)、31.0%(101/326);ALOX5AP-1340 T/G单核苷酸多态位点T和G等位基因分布频率在急性心肌梗死患者为46.7%(305/652)、53.3%(347/652),在阴性组的分布频率为53.7%(350/652)、46.3%(302/652)。两组患者ALOX5AP基因-1340 T/G单核苷酸多态位点分布比较,差异有统计学意义(P<0.05;OR=1.32;95%可信区间1.06～1.64)。多元回归分析结果显示,ALOX5AP-1340 T/G单核苷酸多态G等位基因是急性心肌梗死发病的独立危险因素(P<0.05)。结论 ALOX5AP-1340 T/G等位基因可能是急性心肌梗死发病的危险因素,在冠状动脉粥样硬化不稳定斑块形成过程中起重要作用。

缺血性脑卒中ALOX5AP基因SG13S114T/A和SG13S89G/A多态性研究

目的探讨5-脂氧合酶激活蛋白基因的SG13S114T/A和SG13S89G/A的多态性与缺血性脑卒中的关系及性别差异。方法对确诊的100例缺血性脑卒中和100例对照者从外周静脉血提取DNA,经聚合酶链反应-单核苷酸多态性方法(PCR-PLFP)检测SG13S114T/A和SG13S89G/A位点酶切多态性。结果(1)ALOX5AP的SG13S114A等位基因频率在缺血性脑卒中男性患者的出现率(35.7%)明显高于对照组(28.4%);(2)SG13S114AA明显增加男性缺血性脑卒中的发病风险1.59倍;(3)SNPSG13S89G/A与缺血性脑卒中的易感性不相关。结论ALOX5AP基因SG13S114的AA基因型和A等位基因频率增加了本地区男性缺血性脑卒中的发病风险。

ALOX5AP基因SG13S114A/T多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的关系

目的:通过检测动脉粥样硬化性脑梗死(ACI)患者ALOX5AP基因SG13S114A/T多态性,探讨ALOX5AP基因SG13S114A/T的多态性与ACI的关系,以及SG13S114A等位是否为ACI的易感基因。方法:用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析法,分析412例确诊的ACI和368例同时与其基础疾病相匹配的非ACI者的ALOX5AP基因SG13S114A/T的多态性,比较两组间该基因多态性的差异。结果:ACI组ALOX5AP基因SG13S114AA基因型频率以及A等位基因均高于对照组,但是两组的差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:ALOX5AP基因SG13S114A/T的多态性与ACI的发生没有明确的关系,也不能得出该基因的A等位基因为ACI的易感基因的结论。

中国人群ALOX5AP基因SG13S114A/T多态性与缺血性卒中相关性的Meta分析

目的对5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因第1内含子SG13S114A/T多态性与缺血性卒中(IS)的关联性研究进行meta分析。方法通过文献检索2004～2009年发表的中国人ALOX5AP基因SG13S114A/T多态性与IS相关性的病例-对照研究,剔除不符合要求的文献;以基因型和等位基因频数的优势比(OR)值为统计量,以漏斗图和Egger法检验发表偏倚,根据同质性检验结果合并数据,采用Revman4.2版统计软件进行数据统计。结果 5篇文献符合条件纳入研究,入选文献无明显发表偏倚。同质性检验显示基因型(AA+AT)/TT的统计量χ2=1.00,P=0.91;等位基因频数A/T的统计量χ2=8.18,P=0.09,各研究间无异质性。数据合并结果显示,SG13S114A/T位点(AA+AT)/TT的OR值为1.22,95%CI为1.09～1.36,Z值为3.5,P<0.05;等位基因频数A/T的OR值为1.05,95%CI为0.96～1.14,Z值为1.09,P=0.28。结论 ALOX5AP基因SG13S114A/T多态性与中国人群IS具有相关性,AA基因型可能是IS的易感基因型。

ALOX5AP和CYP3A5基因多态性与缺血性卒中后血栓事件的相关性

目的探讨基因多态性及基因-基因交互作用与缺血性卒中、卒中后血栓事件的相关性。方法采用基质辅助激光解吸附电离/飞行时间质谱法（MDLDI-TOF-MS）对396例缺血性卒中患者及378例对照者ALOX5APSG13S32（rs9551963）、SG13S42（rs4769060）、SG13S89（rs4769874）、SG13S114（rs10507391）、EPHX2 G860A（rs751141）、CYP2C9＊2 C430T（rs1799853）、CYP2C9＊3 A1075C（rs1057910）、CYP3A5 A6986G（rs776746）等5个基因8个位点的多态性进行检测。用广义多因子降维法（GMDR）检测基因与基因之间的交互作用,并对所有的缺血性卒中患者血栓事件进行12个月随访。血栓事件包括：缺血性卒中复发（RIS）和其他血管事件。结果单个基因分析表明,8个位点基因型分布在病例组和对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。但GMDR分析显示,rs10507391和rs776746存在有意义的交互作用,同时携带rs10507391 AA和rs776746GG者,缺血性卒中风险增加2.014倍（95%CI：1.896~6.299,P=0.006）,并与随访期间血栓事件发生相关。多元Cox回归分析显示,rs10507391 AA和rs776746GG的交互作用是缺血性卒中后血栓事件发生的独立危险因素（RR=2.921,95%CI：1.118~7.012,P=0.008）。结论 rs10507391和rs776746间的交互作用增加了缺血性卒中的易感性,并与缺血性卒中后血栓事件发生相关。

AMI患者ALOX5AP基因SG13S114位点SNP与ARPs的关系

目的研究心肌梗死(AMI)患者ALOX5AP基因SG13S114位点单核苷酸基因多态性(SNP)与急性时相反应蛋白(ARPs)的关系。方法分别采用限制性长度多态性聚合酶链反应(RLFP)方法,免疫比浊法研究ALOX5APSG13Sll4A/T的SNP及ARPs包括纤维蛋白原(fbg),高敏C反应蛋白(hs-CRP)的关系。结果心肌梗死组与冠心病组患者外周血基因组ALOX5AP基因SG13S114位点SNP分布T/T,T/A,A/A具有显著性差异(P<0.05;ALOX5AP基因SG13S114A/A型的AMI患者中FBg和hs-CRP显著高于对照组。结论 ALOX5AP基因SG13S114A/A可能是中国人群AMI发病的遗传性危险因素,也是影响AMI患者预后的重要炎症性因素。

新疆维吾尔族及汉族脑梗死病人ALOX5AP基因rs4293222位点多态性比较分析

目的探讨新疆维吾尔族及汉族脑梗死病人5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因rs4293222位点多态性的差异。方法采用病例-对照研究方法,利用聚合酶链反应和DNA基因测序法对100例病人ALOX5AP基因rs4293222位点多态性的各基因型及等位基因频率多态性进行测定,比较新疆地区维吾尔族和汉族脑梗死病人不同基因型的差异,并统计结果。结果维吾尔族与汉族ALOX5AP基因rs4293222位点比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论汉族和维吾尔族脑梗死ALOX5AP基因rs4293222位点基因型和基因频率无差异。

ALOX5AP基因SG13S114T/A多态性与急性心肌梗死的相关性

目的:探讨中国苏南地区汉族人群5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因SG13S114T/A多态性与急性心肌梗死(AMI)的相关性。方法:以300例AMI患者(AMI组)和415例非冠心病患者(对照组)作为研究对象,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测ALOX5AP基因SG13S114T/A多态性。结果:(1)与对照组相比,AMI患者TT和AT基因频率均明显升高,且频率分布都有统计学意义(P分别为0.027,0.032);T等位基因频率分布差异无统计学意义(59.50%和64.82%,P=0.324)。(2)亚组分析:男性AMI患者的AA,AT,TT基因型和T等位基因频率均无统计学差异,而女性TT基因型与AMI的发生存在相关性(P=0.042)。对多个危险因素行多元Logistic回归分析显示ALOX5AP基因SG13S114T/A AT和TT基因型与AMI的发生密切相关(P值分别为0.000,0.001)。T等位基因频率具有统计学意义(P=0.038)。AT和TT基因型与男性和女性AMI的发生均存在相关性(男性P值分别为0.010,0.040;女性P值分别为0.010,0.004),T等位基因与女性AMI的发生也有关联(P=0.026),而T等位基因与男性AMI的发生无相关性(P=0.285)。结论:在中国苏南地区汉族人群中,ALOX5AP基因SG13S114T/A TT和AT基因型可能是苏南地区汉族人群AMI的易感基因型,T等位基因可能是AMI发病的重要遗传危险因素,并与女性AMI的发病存在相关性。

脂氧合酶基因多态性与糖尿病肾脏疾病合并心血管疾病、颈动脉内-中膜厚度关系的研究

目的探讨脂氧合酶基因多态性与DKD合并心血管疾病(CVD)、颈动脉内-中膜厚度(CIMT)的关系。方法选取2014年2月至2018年3月于我院住院的477例DKD患者,根据是否合并CVD分为合并CVD组(CVD,n=372)和无CVD组即对照组(Con,n=105)。根据CIMT分为正常组(CIMT<1.0mm)119例及增厚组(CIMT≥1.0mm)358例。采用TaqMan-PCR检测5-脂氧合酶基因多态性,分析不同基因型与DKD、CVD、CIMT的关系。结果 Con组GG基因型分布频率、G等位基因频率与CVD组比较,差异有统计学意义(χ~2=6.598、16.162,P<0.01)。CIMT正常组GG基因型分布频率、G等位基因频率与增厚组比较,差异有统计学意义(χ~2=15.211、31.419,P<0.01)。Logistic回归分析显示,年龄、高血压病史、LDL-C、C-RP、β2微球蛋白(β2-MG)、CIMT、阻力指数(RI)及左室心肌重量指数(LVMI)为DKD合并CVD事件的危险因素。GG型、TG型年龄、C-RP、β2-MG、CIMT、RI及LVMI与TT型比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)rs17222919TT基因型为DKD合并CVD的易感基因,与CIMT、LVMI增加有关。

ALOX5AP基因单核苷酸多态性与缺血性脑卒中患者颈动脉斑块的相关性分析

目的探讨5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因单核苷酸多态性与缺血性脑卒中患者颈动脉斑块的关系,为颈动脉斑块的缺血性脑卒中早期诊断、治疗和发病机制研究提供依据。方法选取737例缺血性脑卒中患者,按有无颈动脉斑块分为斑块组和无斑块组,应用多重聚合酶链反应(PCR)及基因序列分析技术分析各组患者ALOX5AP基因8个位点多态性分布情况。结果斑块组的甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)、收缩压和血葡萄糖(Glu)水平均明显高于无斑块组(P<0.05)。对ALOX5AP基因8个位点基因型和等位基因频率分析发现,斑块组与无斑块组间差异无统计学意义(P>0.05)。ALOX5AP基因8个位点组成的2个单倍型构成在斑块组与无斑块组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ALOX5AP基因多态性与缺血性脑卒中患者颈动脉斑块形成无关。