联合抑制环氧合酶-2与5-脂氧合酶对胃癌细胞增殖凋亡的影响

目的:通过单独及联合应用选择性COX-2抑制剂尼关舒利和5-LOX抑制剂AA861处理胃癌细胞系AGS,比较各实验组的增殖凋亡率,探讨联合抑制COX-2和5-LOX两条通路对胃癌细胞系AGS增殖凋亡的影响．方法:AGS细胞在含100 mL/L小牛血清+100 kU/L青、链霉素的RPMI1640培养基中培养,取对数生长期细胞做为实验组．以相差显微镜观察药物处理前后的细胞形态改变:设立AA861(25,50,100μmol/L)组,尼美舒利(50,100,200μmol/L)组,及AA861联合尼美舒利处理组(50μmol/L AA861+100μmol/L尼美舒利),用四氮唑蓝(MTT)法在24,48,72 h测量细胞吸光度,以此检测单用及联用AA861与尼美舒利对细胞生长增殖的影响:实验通过脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)和吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色法检测细胞凋亡率,以DNA-LADDER法观察凋亡．结果:相差显微镜观察,药物处理组细胞与对照组相比,形态发生明显改变．MTT显示,除尼美舒利200μmol/L的24,48 h处理组及AA861 25μmol/L的24 h处理组外,尼美舒利和AA861基本呈时间、剂量依赖性抑制AGS细胞增殖．TUNEL染色法表明,尼美舒利或AA861处理组的细胞凋亡率随着剂量的增加而升高,药物处理48 h后,MTT法表明,细胞增殖在AA861组和尼美舒利组与两药联用组间相比差异显著(0．240±0．002 vs 0．207±0．001,P＜0．01:0．211±0．002 vs 0．207±0．001, P＜0．05);TUNEL染色法表明,单药组与两药联用组细胞凋亡率相比差异明显(AA861组: 18．67%±0．03%．尼美舒利组:20．94%±0．48% vs两药联用组:23．76%±0．92%,P＜0．01):AO/ EB染色法也同时表明,细胞凋亡单药组与两药联用组相比差异明显(AA861组:18．17%±0．28%、尼美舒利组:19．35%±0．74% vs两药联用组:23．78%±0．04%,P＜0．01)．DNA琼脂糖凝胶电泳法显示,两药联合处理AGS细胞组与单药处理组比较,癌细胞增殖被抑制,凋亡明显增加．结论:COX-2抑制剂尼美舒利和5-LOX抑制剂AA861对胃癌AGS细胞的增殖抑制以及促凋亡作用基本呈时间浓度依赖性．联用尼关舒利和AA861抑制COX-2与5-LOX两条通路,与单独抑制其中一条通路比较,能更有效抑制胃癌细胞增殖,促进凋亡．