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大鼠5-脂肪氧合酶cDNA的重组腺病毒制备及在大鼠血管外膜成纤维细胞中的表达
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作者 董晓 柯尊平 +3 位作者 王俊峰 周明 谭利 党书毅 《岭南心血管病杂志》 2016年第2期201-206,共6页
目的利用细菌内同源重组法快速构建携带大鼠5-脂肪氧合酶(5-lipoxygenase,5-LO)cDNA的重组腺病毒质粒和制备表达大鼠5-LO的重组腺病毒,并在大鼠原代血管外膜成纤维细胞中实现过表达。方法聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)... 目的利用细菌内同源重组法快速构建携带大鼠5-脂肪氧合酶(5-lipoxygenase,5-LO)cDNA的重组腺病毒质粒和制备表达大鼠5-LO的重组腺病毒,并在大鼠原代血管外膜成纤维细胞中实现过表达。方法聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增大鼠5-LOcDNA片段,亚克隆至腺病毒穿梭质粒中,构建成转移质粒pshuttle-CMV-5LO;用PmeI线性化的pshuttle-CMV-5LO转化含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态BJ5183,通过同源重组获得阳性重组质粒pAdEasy-1-5LO。重组质粒经鉴定后用Pad酶切,转入HEK293细胞,包装成重组腺病毒Ad-1-5LO,经纯化,鉴定,滴度测定,转染体外培养的大鼠原代血管外膜成纤维细胞,Western blot检测腺病毒载体在体外的过表达。结果 5-LOcDNA成功地插入到穿梭质粒中,pshuttle-CMV-5LO与pAdEasy-1在BJ5183中成功发生了同源重组,得到了重组腺病毒质粒pAdEasy-1-5LO,重组腺病毒经PCR和酶切鉴定表明携带有目的基因5-LOcDNA,滴度约为1.0×10^(15)pfu/L,转染大鼠原代血管外膜成纤维细胞后经Western blot检测,细胞内5-LO的表达明显增加。结论细菌内同源重组法构建腺病毒载体具有高效、省时、省力的特点,制备出的高滴度重组腺病毒Ad-1-5LO实现了在血管外膜成纤维细胞中的过表达,为研究5-LO途径在血管重构中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 5-脂肪氧合酶 白三烯 腺病毒载体 同源重组 克隆
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Expression of 5-Lipoxygenase in human colorectal cancer 被引量:3
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作者 Labile Togba Soumaoro Satoru Iida +6 位作者 Hiroyuki Uetake Megumi Ishiguro Yoko Takagi Tetsuro Higuchi Masamichi Yasuno Masayuki Enomoto Kenichi Sugihara 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2006年第39期6355-6360,共6页
AIM: To evaluate the 5-lipoxygenases (Loxs) expression level in human colorectal cancer specimens in order to determine its clinicopathologic significance in human tumorigenesis. METHODS: The relative quantity of 5-Lo... AIM: To evaluate the 5-lipoxygenases (Loxs) expression level in human colorectal cancer specimens in order to determine its clinicopathologic significance in human tumorigenesis. METHODS: The relative quantity of 5-Lox mRNA in paired 91 colorectal tumor and adjacent normal mucosa samples was determined by real time quantitative PCR. Additionally, the expression of 5-Lox and cyclooxygenase (Cox)-2 proteins was also examined using immunohistochemical staining methods. RESULTS: There was a marked increase in 5-Lox mRNA levels in the tumor compared with paired normal mucosa samples (P < 0.0001). Sixty six (72.5%) tumors showed high 5-Lox mRNA levels. The positivity rate of 5-Lox and Cox-2 protein expression was 68.7% and 79.1% respectively. There was a significant association between tumoral 5-Lox mRNA level and tumor size (Rho = 0.392, P = 0.0002), depth or vessel invasion. CONCLUSION: These results suggest that 5-Lox is up-regulated in colorectal cancer and that inhibition of its expression might be valuable in the prevention and treatment of colorectal cancer. 展开更多
关键词 5-脂肪氧合酶 结肠癌 直肠癌 -2
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Further evidence for the roles of 5-lipoxygenase and cysteinyl leukotriene receptors in cerebral ischemic injury
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作者 Wei-pingZHANG Qiu-fuGE San-huaFANG YuZHOU Guo-liangYU Meng-lingWANG ZhongCHEN Er-qingWEI 《中国药理通讯》 2005年第2期25-26,共2页
Arachidonic acid-metabolizing enzyme 5-lipoxygenase (5-LOX) produces pro-inflammatory mediators:leukotrienes (including cysteinyl leukotrienes, CysLTs). 5-LOX and CysLTs are involved in the pathophysiological process ... Arachidonic acid-metabolizing enzyme 5-lipoxygenase (5-LOX) produces pro-inflammatory mediators:leukotrienes (including cysteinyl leukotrienes, CysLTs). 5-LOX and CysLTs are involved in the pathophysiological process after brain injury, and the actions of CysLTs are mediated via activation of their receptors, CysLT1 and CysLT2. We have recently reported the expressions of 5-LOX, CysLT1 and CysLT2 in human brains with traumatic injury and tumors, and short-term neuroprotective effects of Cys-LT1 antagonists in stroke models of rats and mice. 展开更多
关键词 5-脂肪氧合酶 半胱氨酰基 白细胞三烯受体 大脑 5-LOX CysLT1
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Expression of 5 - lipoxygenase of the brain tissue after focal cerebral ischemia- reperfusion injury and the influence of a 5 -lipoxygenase inhibitor zileuton in rats
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作者 Yu Juan Xu Lin +1 位作者 Liu Ying Chen Chong-Hong 《中国药理通讯》 2006年第4期39-40,共2页
关键词 局灶性脑缺血 再灌注损伤 5-脂肪 脑组织 表达 大白鼠 5-脂肪氧合酶抑制剂 ZILEUTON
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3-乙酰基-11-酮-β-乳香酸的抗炎作用及其衍生物的化学修饰 被引量:6
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作者 刘绍军 刘丽娜 《中国当代医药》 2011年第16期15-17,共3页
乳香酸(Bas)是乳香提取物中的活性成分,乳香酸在治疗炎症方面的疾病如类风湿关节炎、慢性支气管炎、哮喘以及慢性发炎性肠道疾病(溃疡性结肠炎和克罗恩病)已经显示出显著的药理活性。数据表明,3-乙酰基-11-酮-β-乳香酸(AKBA)... 乳香酸(Bas)是乳香提取物中的活性成分,乳香酸在治疗炎症方面的疾病如类风湿关节炎、慢性支气管炎、哮喘以及慢性发炎性肠道疾病(溃疡性结肠炎和克罗恩病)已经显示出显著的药理活性。数据表明,3-乙酰基-11-酮-β-乳香酸(AKBA)被认为在各种乳香酸中是最强大的。AKBA被发现和确认为5-脂肪氧合酶(5-LOX)强大的抑制剂;AKBA的其他药理活性研究发现,它还充当了p38-MAP激酶强大的抑制剂。为了得到更多的AKBA,它的衍生物BA、KBA、ABA经过一系列化学修饰乙酰化和烯丙基氧化转化为AKBA,从而AKBA的量根据乳香树种和相应树脂质量从0.1%~3.0%上升到25%~35%。 展开更多
关键词 3-乙酰基-11--β-乳香酸 抗炎 5-脂肪氧合酶 p38-MAP激
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现代医学200词 199.白三烯受体 被引量:1
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作者 胡宜(译) 《日本医学介绍》 2007年第12期575-575,共1页
白三烯(1eukotriene,LT)是由花生四烯酸在5-脂肪氧合酶的作用下由生成的LTA。构成的生理活性脂类,可以分为LTB4和半胱氨酰LT(CysLTs:LTC4,LTD4,LTE4)。
关键词 白三烯受体 现代医学200词 5-脂肪氧合酶 花生四烯酸 生理活性 LTC4 半胱氨酰 LTB4
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