5-HTR4和GABRG2基因多态性与精神分裂症关系

目的探讨5-羟色胺4受体基因(5-HTR4)和γ-氨基丁酸-γ2受体基因(GABRG2)基因多态性与精神分裂症的关系。方法在95个中国北方汉族精神分裂症患者和他们的健康父母组成的核心家系中,以聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对5-HTR4基因rs888957(C/T碱基改变)和GABRG2基因rs211014(T/G碱基改变)单核苷酸多态性(SNP)进行检测。应用基于家系的连锁不平衡方法分析基因型数据。结果(1)5-HTR4基因rs888957及GABRG2基因rs211014基因型频率的分布均符合Hardy-Weinberg平衡;(2)传递不平衡检验(TDT)结果提示,5-HTR4基因rs888957及GABRG2基因rs211014与精神分裂症无连锁及关联;(3)UNPHASED双位点单体型分析结果显示,rs888957-rs211014单体型系统与精神分裂症无关联(P>0.05);(4)5-HTR4基因的rs888957位点等位基因分布与精神分裂症的阳性症状钟情妄想相关联(P<0.01)。GABRG2基因的rs211014位点等位基因分布与精神分裂的阳性症状冲动伤人行为相关联(P<0.05)。结论5-HTR4基因rs888957位点及GABRG2基因rs211014位多点态性可能与精神分裂症无关,但不能排除5-HTR4基因及GABRG2基因其他SNPs与精神分裂症相关联。

萨能奶山羊乳腺组织5-HTR4基因的克隆序列分析与原核表达

利用同源序列克隆原理设计5-羟色胺受体4(5-HTR4)一对克隆引物,对萨能奶山羊乳腺组织中5-HTR4进行克隆、测序,并进行分析;再根据克隆序列设计引物,从重组克隆载体中扩增出含Bam HⅠ/XhoⅠ酶切位点的5-HTR4片段,酶切后亚克隆至pGEX-4T-1载体,构建重组原核表达载体pGEX-5-HTR4,经IPTG诱导进行表达、鉴定。奶山羊5-HTR4基因的ORF与兔(Z50162)、猪(NM-001173418)、人(human5HT1D)、狗(NM-001003280)和鼠(AK082016)的同源性分别为46.1%、47.2%、78.9%、45.8%及89.8%。Smart分析发现,奶山羊5-HTR4基因推测氨基酸序列信号肽与人、鼠5-HTR4基因氨基酸序列信号肽均为1～23aa,SapB结构域均为49～126aa,结构特征与人、鼠的5-HTR4结构特征相一致。

枳实水提物对大鼠泻剂结肠肠壁神经丛的影响及机制研究

目的:探讨枳实水提物对胃肠道动力的兴奋作用是否有5-羟色胺4受体(5-HTR4)的参与,以及其与5-HTR4激动剂是否在泻剂结肠大鼠肠壁神经网络的重塑中发挥作用。方法:应用大黄建立泻剂结肠大鼠模型,随后分组予莫沙必利及不同剂量的枳实水提物灌胃治疗,持续14d。以墨汁推进试验测定其传输功能;留取结肠组织,采用透射电镜观察各组大鼠结肠组织的超微结构;Real-time PCR、Western blot及免疫组化测定5-HTR4高分子量神经丝(NF-H)mRNA/蛋白的表达水平。结果:1莫沙必利及枳实水提物高剂量组可显著改善泻剂结肠大鼠的肠道动力;2模型组、莫沙必利组及中药各剂量组结肠超微结构均出现不同程度的神经元退行性病变;3莫沙必利可上调5-HTR4蛋白质的表达,与mRNA水平呈同步变化;而枳实水提物上调5-HTR4 mRNA转录水平的同时并未使其蛋白质的表达增加。莫沙必利及枳实水提物高剂量组均可上调NF-H mRNA及蛋白质的表达。结论:莫沙必利通过兴奋5-HTR4受体增强慢传输型便秘大鼠模型结肠动力的同时,还能起到修复泻剂结肠肠壁肌间NF-H的作用。而枳实水提物促结肠动力的机制主要是通过促进NF-H生长实现的,5-HTR4是其作用的一个分子靶标,但可能不是发挥生物学活性的主要途径。