HPLC测定不同干燥方法亳菊中5种成分的含量

通过高效液相色谱法建立测定不同干燥方法亳菊中绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草素、木犀草苷和金合欢素的含量的方法。采用菲罗门C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速:1.0m L·min^(-1),检测波长325 nm,柱温30℃。绿原酸41.50~0.83×103μg·m L^(-1)木犀草苷2.45~122.50μg·m L^(-1)、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸15.78~1.58×103μg·m L^(-1)、木犀草素327.33~1.96×103μg·m L^(-1)、金合欢素7.62~762μg·m L^(-1)浓度范围内呈良好线性关系,回归方程分别为y=3.3257x-10.6227(r=1.0000)、y=0.9865x+0.1356(r=1.0000)、y=3.6681x-27.6275(r=0.9999)、y=1.2538x-4.3563(r=1.0000)和y=3.6216x-1.2515(r=1.0000)。加样回收率分别为97.97%、97.49%、97.79%、98.27%、98.90%,RSD均小于5%。该方法快速,简便,重复性好,适合于同时测定亳菊中绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草素、木犀草苷和金合欢素的含量。

5-0-[(3,4-亚甲二氧基)-肉桂酰基]-奎宁酸甲酯的合成

目的研究5-O-[(3,4-亚甲二氧基)-肉桂酰基]-奎宁酸甲酯的合成工艺。方法以(3,4-亚甲二氧基)-肉桂酰氯和奎宁酸为原料经5步反应制得本品。并对本品进行鸭乙肝病毒2215细胞体外抗病毒试验。结果得到的样品经NMR和MS分析为结构正确的化合物,本品抗乙肝病毒作用明显。结论5-O-[(3,4-亚甲二氧基)-肉桂酰基]-奎宁酸甲酯为一新的化合物,有可能成为治疗乙型肝炎的新药或先导化合物。

梯度逆流色谱分离纯化雪菊中的3,5-二咖啡酰奎宁酸和奥卡宁

采用梯度逆流色谱技术快速分离纯化雪菊中的3,5-二咖啡酰奎宁酸和奥卡宁,以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(2∶8∶2∶8,2∶8∶4∶6;v/v)为溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,转速800r/min,流速5.0mL/min,检测波长254nm。所得馏分通过电喷雾电离(ESI)质谱和核磁共振谱(NMR)鉴定化合物的结构。从200mg粗提物中一次分离得到两个主要化合物:3,5-二咖啡酰奎宁酸(11.2mg)和奥卡宁(10.7mg),且3,5-二咖啡酰奎宁酸为首次从雪菊中分离得到;经高效液相色谱法分析,其纯度分别为92.82%和97.55%。研究结果表明,应用梯度逆流色谱分离雪菊中的生物活性成分快速高效。

高效液相色谱法测定鼻咽清毒剂中4种活性成分的含量

目的建立鼻咽清毒剂中4种活性成分木犀草苷、蒙花苷、噻嗪二酮苷和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量测定方法。方法依利特C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,流速0.9 m L·min-1;检测波长334 nm（木犀草苷、蒙花苷）;254 nm（噻嗪二酮苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸）;柱温30℃。结果在该色谱条件下,木犀草苷、蒙花苷、噻嗪二酮苷和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸分离良好,质量浓度分别在9.84~196.80μg·m L-1（r=0.999 8）、11.92~238.40μg·m L-1（r=0.999 6）、6.85~137.00μg·m L-1（r=0.999 9）、5.60~112.00μg·m L-1（r=0.999 4）时与其峰面积呈良好的线性关系,加样回收率依次为96.9%、99.0%、97.8%、96.9%,RSD依次为1.4%、1.4%、1.6%、0.71%（n=6）。结论所建立的方法简便、准确、重复性好,可用于鼻咽清毒剂的质量控制。

HPLC法同时测定佛耳草中黄酮类和酚酸类成分的含量

目的:建立同时测定佛耳草中酚酸类和黄酮类成分含量的高效液相色谱分析法。方法:采用高效液相色谱双波长切换法,色谱柱为Diamonsil C_(18)柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长为327 nm和360 nm,流速为1.0 ml·min^(-1),柱温:30℃,进样量:10μl。结果:绿原酸在0.041~0.821μg、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸在0.127~2.549μg、槲皮素在0.020~0.411μg、木犀草素在0.040~0.806μg范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为98.31%,97.51%,98.29%,98.73%,RSD分别为1.19%,1.52%,1.22%,1.47%。结论:该法简便,重复性好,各成分分离良好,可用于佛耳草的质量评价。

HPLC法同时测定佛耳草中黄酮类和酚酸类成分的含量

目的:建立同时测定佛耳草中酚酸类和黄酮类成分含量的高效液相色谱分析法。方法:采用高效液相色谱双波长切换法,色谱柱为Diamonsil C18柱(4.6mm×200mm,5μm);流动相:甲醇(A)-0.4%磷酸溶液(B),梯度洗脱;检测波长为327nm和360nm;流速为1.0mL·min-1。结果:绿原酸在4.104~82.07μg、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸在12.74~254.90μg、槲皮素在2.055~41.11μg、木犀草素在4.032~80.64μg范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为98.31%、97.51%、98.29%、98.73%,RSD分别为1.19%、1.52%、1.22%、1.47%。结论:该法简便,重复性好,各成分分离良好,可用于佛耳草的质量评价。

中华枸杞中1个新的香豆素葡萄糖苷

目的研究中华枸杞Lycium chinense果实的化学成分。方法采用硅胶、D101大孔吸附树脂、ODS等柱色谱以及半制备液相色谱等现代分离技术进行分离纯化,根据化合物的波谱数据和理化性质进行结构鉴定,并对部分化合物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结果从中华枸杞醋酸乙酯部位分离得到11个化合物,分别鉴定为7-O-(6-O-3-羟基异丁酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)-6-甲氧基香豆素(1)、东莨菪苷(2)、东莨菪素(3)、反式对香豆酰基-β-D-葡萄糖苷(4)、cassoside I(5)、对羟基苯乙酮-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、苯甲醇吡喃葡萄糖苷(7)、苯乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、柚皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(9)、5-O-对香豆酰奎尼酸甲酯(10)、绿原酸甲酯(11)。结论化合物1为1个新的香豆素葡萄糖苷,命名为枸杞苷E。化合物10和11为首次从该属植物中分离得到。化合物4~11为首次从该植物中分离得到。化合物11对α-葡萄糖苷酶具有弱的抑制作用。

羊耳菊药材中4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量测定

目的:建立羊耳菊药材中4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量测定方法,为其质量控制提供科学依据。方法:采用HPLC直接测定,色谱柱Eclipse XDB C18柱,保护柱为SecurityGuard C18柱;流动相甲醇-0.1%磷酸(28∶72);检测波长为325nm。结果:测定了13批不同产地市售的羊耳菊药材,4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量在0.12%～0.55%之间。结论:该法方便、快速、准确、重复性好,可以控制该药材的质量。

百蕊草药材与标准汤剂量值传递规律研究及分析

目的 建立百蕊草Thesii Herba标准汤剂的UPLC特征图谱及其指标成分的含量测定方法;研究百蕊草药材与标准汤剂特征图谱的变化,并分析指标成分百蕊草素I在药材-标准汤剂的量值传递规律。方法 采用Waters Acquity UPLC BEH Shield RP18色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液,梯度洗脱,体积流量0.4 mL/min,检测波长330、270 nm,柱温30℃,建立特征图谱与含量测定方法。以出膏率、含量及转移率、特征图谱共有峰传递数为主要评价指标,分析百蕊草标准汤剂的量值传递规律。结果 19批百蕊草药材、标准汤剂与各自的对照特征图谱相似度分别为0.986~1.000、0.989~1.000。百蕊草标准汤剂特征图谱标定6个共有峰,药材中的5个共有峰全部转移至标准汤剂并被指认,其中4个共有峰采用对照品比对确认,分别为5-O-阿魏酰奎宁酸(峰2)、4-O-阿魏酰奎宁酸(峰3)、百蕊草素I(峰5)、山柰酚-3-O-(2″-O-α-鼠李糖基-6″-O-丙二酰基)-β-葡萄糖苷(峰6)。19批标准汤剂的平均出膏率为27.45%,百蕊草素I从药材-标准汤剂的平均转移率为89.48%,出膏率与转移率均未出现离散数据。结论 建立的标准汤剂特征图谱及含量测定方法稳定可靠,百蕊草素I从药材到标准汤剂的量值传递结果表明,百蕊草标准汤剂的质量得到了较好地控制,其制备工艺具有科学性、可行性,为百蕊草配方颗粒的质量标准制定奠定基础。

青龙衣正丁醇部位化学成分研究

目的研究青龙衣（核桃楸Juglans mandshurica的未成熟的外果皮）正丁醇部位的化学成分。方法采用正、反相硅胶柱色谱,Sephadex LH-20,高效液相制备色谱等方法进行分离纯化,并通过波谱数据分析鉴定化合物的结构。结果从青龙衣正丁醇提取部位中分离得到14个化合物,分别鉴定为5-O-咖啡酰基奎宁酸丁酯（1）、3,5-二咖啡酰奎宁酸丁酯（2）、香草酸-4-O-β-D-（6′-O-没食子酰基）葡萄糖苷（3）、4-羟基-2,6-二甲氧基苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）、4,5,8-三羟基-α-萘酮-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）、1,4,8-三羟基萘-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（6）、1,4,5-三羟基萘-1,4-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（8）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（9）、槲皮苷（10）、杨梅苷（11）、阿福豆苷（12）、金丝桃苷（13）、胡萝卜苷（14）。结论化合物1~4为首次从胡桃属植物中分离得到,化合物5、8~12为首次从青龙衣中分离得到。

HPLC法同时测定拨云退翳丸中10种指标成分

目的采用HPLC-DAD法同时测定拨云退翳丸中甘草苷、甘草酸铵、蔓荆子黄素、胡薄荷酮、阿魏酸、绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、盐酸小檗碱、山柰素、蒙花苷10种成分。方法应用Shim-pack VP-ODS C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-乙腈（50∶50,A）和0.05%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱,梯度洗脱程序为0-5 min,50%A;5-30 min,50%-80%A;30-32 min,80%-50%A;32-40 min,50%A;进样体积10μL,体积流量1.0 m L/min,柱温40℃。结果甘草苷、甘草酸铵、蔓荆子黄素、胡薄荷酮、阿魏酸、绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、盐酸小檗碱、山柰素、蒙花苷10种成分能够达到很好分离;其线性范围分别为2-20（r=0.999 2）、20-200（r=0.999 5）、3-30（r=0.999 4）、2-20（r=0.999 7）、1.2-12.0（r=0.999 5）、3.5-35.0（r=0.999 2）、8-80（r=0.999 3）、9-90（r=0.999 3）、2-20（r=0.999 6）、3-30μg/m L（r=0.999 5）;平均加样回收率分别为99.1%、101.1%、100.2%、99.4%、101.9%、98.5%、100.5%、101.7%、100.8%、99.7%,RSD分别为0.62%、0.79%、0.77%、0.83%、0.47%、0.38%、0.97%、1.05%、0.86%、1.11%（n=6）。6批次供试品中甘草苷、甘草酸铵、蔓荆子黄素、胡薄荷酮、阿魏酸、绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、盐酸小檗碱、山柰素、蒙花苷质量分数分别为0.505-0.685、1.793-2.012、0.227-0.268、0.183-0.206、1.258-1.324、0.348-0.381、0.648-0.720、1.544-1.722、1.543-1.627、3.434-3.883 mg/丸。结论该方法快速、灵敏度高、准确度高、专属性好,为拨云退翳丸的质量控制提供依据。

软枣猕猴桃果实中1个新的降倍半萜苷类化合物

目的研究软枣猕猴桃Actinidiaarguta果实的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、SephadexLH-20柱色谱、制备薄层色谱和半制备型高效液相色谱等方法分离,根据波谱数据鉴定化合物结构。结果从软枣猕猴桃75%工业乙醇冷浸提取物的正丁醇萃取物中共分得15个化合物,分别鉴定为(2R,6R,9R)-三羟基-大柱香波龙烷-4,7E-二烯-3-酮-9-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、(6S,9R)-玫瑰花苷(2)、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(3)、紫云英苷(4)、香草酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、1-O-feruloyl-β-D-glucopyranoside(6)、阿魏酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、红景天苷(8)、3-hydroxy-1-(4-O-β-D-glucopyranosyl-3-methoxyphenyl) propan-1-one(9)、5-O-咖啡酰基奎宁酸甲酯(10)、5-O-咖啡酰基奎宁酸丁酯(11)、5-O-阿魏酰基奎宁酸甲酯(12)、5-O-香豆酰基奎宁酸甲酯(13)、咖啡酸(14)和原儿茶酸(15)。结论化合物1为1个未见文献报道的甲基环己烯型降倍半萜苷类化合物,命名为软枣猕猴桃苷A;化合物2、5和7~13为首次从猕猴桃属植物中分离得到;化合物6为首次从软枣猕猴桃中分离得到。

忍冬藤中咖啡酰奎宁酸葡萄糖苷的分离及含量测定

目的：忍冬藤中5-O-[4＇-O-（β-D-吡喃葡萄糖基）咖啡酰基]奎宁酸的分离鉴定及HPLC含量测定方法的建立。方法：采用色谱分离方法从忍冬藤50%甲醇提取物中分离得到5-O-[4＇-O-（β-D-吡喃葡萄糖基）咖啡酰基]奎宁酸,并通过核磁共振波谱和质谱数据确定其结构。含量测定色谱条件：Dikma Technologies PLATISILTMODS C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相乙腈（A）-0.4%冰乙酸溶液（B）梯度洗脱（0~20 min,8%~15%A）;流速1.0 m L·min^-1;检测波长327 nm;柱温35℃。结果：5-O-[4＇-O-（β-D-吡喃葡萄糖基）咖啡酰基]奎宁酸在0.15~3.07μg与峰面积呈良好的线性关系,其线性回归方程为Y=1.521 3X-3.777 7（r=1.000 0）。供试品溶液在24 h内稳定性良好,平均加样回收率（n=6）为95.95%,RSD1.5%。对收集的8批忍冬藤药材进行测定,5-O-[4＇-O-（β-D-吡喃葡萄糖基）咖啡酰基]奎宁酸质量分数1.737~7.390 mg·g-1。结论：首次从忍冬藤中分离鉴定了5-O-[4＇-O-（β-D-吡喃葡萄糖基）咖啡酰基]奎宁酸,报道了其完整核磁数据,建立了忍冬藤中该成分的含量测定方法,并设立了合理的含量限度值。建立的含量测定方法准确、可靠,可用于忍冬藤药材的质量控制。

栀子中2个成分的分离鉴定及不同采收期栀子样品的比较分析

目的：分离制备栀子药材中化学成分,建立栀子中该成分HPLC含量测定法.方法：色谱条件采用Kromasil C18色谱柱（4.6 mm×250mm,5μm）,以乙腈-0.1％磷酸水溶液（18∶82）为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长327 nm,柱温40℃.结果：从栀子药材中分离鉴定出6＂-对香豆酰京尼平龙胆双糖苷（1）,3,5-二-O-咖啡酰基-4-O-（3-羟基-3-甲基）戊二酰基奎宁酸（2）2个成分;这2个成分在0.118 8～1.188,0.122 8 ～1.228 μg线性关系良好;平均回收率分别为99.23％,100.4％,RSD分别为2.4％,2.3％;栀子不同采收期对2种成分含量影响较大.结论：本试验结果能较好地反映栀子不同采收期成分的变化,可为栀子药材质量标准的完善提供参考.