氯诺昔康体外孵育体系的建立及氯诺昔康代谢产物5-OH氯诺昔康的检测

目的:建立一个以氯诺昔康为底物来研究CYP2C9~*1在体外代谢活性的体系并利用UPLC-MS/MS来检测氯诺昔康代谢产物,为临床上相关药物的合理用药提供依据。方法:以氯诺昔康为底物,利用重组昆虫细胞微粒体体外孵育法,模拟与体外孵育相似的环境进行体外代谢,通过建立UPLC-MS/MS检测氯诺昔康代谢产物,采用Graphpad prism软件绘制米曼曲线,计算K_m值和最大反应速度Vm,从而通过氯诺昔康来研究CYP2C9~*1中的体外代谢活性。结果:在最终确定的色谱条件下,氯诺昔康、其代谢产物及内标峰分离良好。K_m值为1.201μmol·L^(-1),最大反应速度Vmax值为0.276 2 pmol·min^(-1)·mg^(-1)。结论:本研究通过UPLC-MS/MS建立CYP2C9~*1酶代谢活性检测方法,此方法方便快捷、灵敏性高、准确性好,适用于氯诺昔康代谢产物的测定研究。同时通过氯诺昔康建立了体外孵育体系,为CYP2C9~*1酶代谢活性的研究提供了参考依据。