五溴联苯醚(BDE-99)和羟基五溴联苯醚(5-OH-BDE-99)经由THRβ影响斑马鱼胚胎眼部色素的沉着

多溴联苯醚及其羟基代谢物(OH-BDEs)被认为是内分泌干扰物,特别是对甲状腺激素调节的影响。调查并比较了BDE-99及5-OH-BDE-99对甲状腺素受体的影响。斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的BDE-99和5-OH-BDE-99中,导致斑马鱼眼球黑色素的色素沉着减少,使用原位杂交以及定量PCR方法检测,发现THRβ在斑马鱼前脑部位表达,并有明显的降低。通过体外实验也证实BDE-99和5-OH-BDE-99能够与THRβ受体结合,尤其是5-OH-BDE-99的结合更为强烈。研究表明,BDE-99和5-OH-BDE-99对斑马鱼胚胎早期THRβ的活性有干扰作用,并导致眼部黑色素沉积减少。上述研究结果对BDE-99和5-OH-BDE-99的生物毒理学机制研究有一定的借鉴意义。

^(99)Tc^m标记5-HT_(1A)脑受体显像剂的研制及其生物分布

为了寻找 99Tcm 标记中枢神经系统 5 - HT1A协同受体显像药物 ,合成了单齿受体配基 1- (2 -甲氧基苯基 ) - 4 - (2 -巯基乙基 )哌嗪 (简称 MPMEP)、三齿配体 N,N-二 (2 -巯基乙基 ) - N',N'-二乙基乙二胺 (简称 BMPDEEDA)和 N,N-二 (2 -巯基乙基 )卞胺 (简称 BMPBA) ,其结构经 IR、NMR及元素分析表征 ;以“3+ 1”混合配体进行了 99Tcm标记 ,并确定了标记反应的最佳条件 :p H=6 .0～ 7.0 ,6 0～70℃下 ,反应 2 0～ 30 min,经 CH2 Cl2 萃取脂溶性部分后 ,99Tcm O(MPMEP) (BMPDEEDA)和 99Tcm O(MPMEP) (BMPBA)的标记率分别达到 95 %和 90 %以上。采用 HPL C对标记产物进行了分离和纯化 ,纯化后的标记物放化纯度均 >98%。小鼠体内的生物分布结果表明 99Tcm O(MPMEP)(BMPDEEDA)和 99Tcm O(MPMEP) (BMPBA)配合物可以通过血脑屏障 ,在脑中有一定的摄取和滞留 ;99Tcm O(MPMEP) (BMPBA)在血液中清除较快 ,静脉注射后 2、30、6 0 min时 ,脑与血摄取比分别为 0 .31、0 .33、0 .32 。

原发性肾透明细胞癌中转移相关基因CD99、FKBP5和FLJ13576的表达

目的:探讨肿瘤转移相关分子CD99、FKBP5、FLJ13576在原发性肾透明细胞癌中的表达。方法:应用半定量RT-PCR技术研究肿瘤转移相关分子CD99、FKBP5、FLJ13576在肾透明细胞癌组织和癌旁组织中的差异性表达。结果:CD99、FKBP5、FLJ13576在原发性肾透明细胞癌组织中的表达率分别为72%、60%和48%,而对应癌旁组织中的表达率分别为28%、24%和16%,表达水平也明显不同。肾透明细胞癌组织中CD99、FKBP5和FLJ13576 3种基因的表达水平均显著高于癌周组织(P<0.05)。结论:肿瘤转移相关分子CD99、FKBP5、FLJ13576在肾透明细胞癌原发组织中的表达明显上调,可能与肾细胞癌发生、发展密切相关,有望成为检测肾细胞癌的新的生物学标志。

5-HT_(1A)受体显像剂^(99)Tc^mO(MP MEP)(BMPDEEDA)的研究

目的 探讨研制99Tcm [N (2 (4 (2 甲氧基苯 ) 1 哌嗪 1 乙基 ) N (2 吡啶 ) 环己烷酰胺 ) ](WAY10 0 6 35 )类似物中枢神经系统 5 羟色胺 1A(5 HT1A)受体显像剂。方法 将化学合成的单齿配体 1 (2 甲氧基苯基 ) 4 (2 巯基乙基 )哌嗪 (MPMEP)和三齿配基N ,N 二 (2 巯基乙基 ) N′,N′ 二乙基乙二胺 (BMPDEEDA)与99Tcm 葡庚糖酸钠 (GH)经三齿配体与单齿配体混合标记方法 (“3+1”)混合配体交换 ,制得99TcmO(MPMEP) (BMPDEEDA)。同时 ,以大鼠脑海马膜组织匀浆为 5 HT1A 受体来源 ,与 5 HT1A受体的特异激动剂3H 2 (二 n 丙胺基 ) 8 羟基 四氢化萘 (8 OH DPAT)进行体外竞争结合实验 ,测定99Tcm 标记物的类似物ReO(MPMEP) (BMPDEEDA)对受体蛋白与特异拮抗 (激动 )剂竞争结合达到一半 (5 0 % )时的浓度 (IC50 值 )。结果 制备的99TcmO(MPMEP) (BMPDEEDA)经高压液相层析 (HPLC)纯化并测定其放化纯度 >95 %。大鼠脑海马摄取在注射后 30、6 0、12 0、180min时 %ID g分别为 0 .0 77、0 .0 6 8、0 .0 84和 0 .0 6 7,放射性摄取最高部位为丘脑 ,注射后 12 0min时 %ID g为 0 .15 4 ,各时相海马与小脑的摄取比值分别为 0 .84 7、0 .880、0 .92 1和 1.2 4 4。ReO(MPMEP) (BMPDEEDA)的IC50为 98.

^(99)Tc^m-5-氨基水杨酸包衣片在结肠的定位释药

采用放射性核素示踪技术研究了5-氨基水杨酸包衣片对犬结肠的靶向性。用99Tcm标记5-氨基水杨酸后,将标记物制成包衣片;通过在人工胃、肠液中测定放射性泄漏的方法观察包衣片的包衣膜性能;实验犬口服包衣片后,用SPECT显像观察包衣片在犬消化道内的运动过程。结果显示:包衣片在人工胃液中不溶解,外观无变化,无放射性漏出;将包衣片在人工胃液中滞留1h,取出放入人工肠液中3h,包衣膜被部分溶蚀,出现大量孔洞,但无放射性漏出;3.5h后有放射性漏出,表明包衣膜开始破裂释药。犬口服后,包衣片在升结肠开始释药,并在结肠内停留6～7h。表明5-氨基水杨酸包衣片能在结肠定位释药。

优质春播小麦99-5产量与气象影响因子回归分析

利用春播优质小麦99-5分期播种产量资料与同期气象资料进行回归分析,结果表明,小麦产量的高低与播种-抽穗期的积温、抽穗-开花期的日照和开花-成熟期的相对湿度呈显著相关。

氮杂苯并15-冠-5和联吡啶^(99m)Tc标记物的制备及其生物分布

利用协同配位原理研究了在生理盐水中以氮杂苯并 15 冠 5 (L)和 2 ,2′ 联吡啶 (Bipy)为配体的新的99mTc标记物 .在Na2 CO3 和NaHCO3 缓冲体系中 ,以NaBH4为还原剂 ,L和Bipy均取 5mg,在pH =9.4 7～ 10 .0 8范围内 ,标记率达到 80 % ;当pH =9.90 ,反应时间为 5 0min时 ,标记率达到最大值 90 % .在相同实验条件下 ,2种配体均不能单独标记99mTc .标记物在小鼠体内的生物分布实验结果表明 ,标记物有一定的骨摄取 ,其可能的组成为 [99mTc·L·Bipy·n(H2 O) ]3 + .标记物的主要清除途径可能为尿代谢 ,代谢过程中可能生成了某种脂溶性较好的代谢产物 .标记物的血液清除速率有待改进 。

一种新型潜在^(99m)TcN核标记5-HT_(1A)脑受体显像剂的制备研究

合成了一种含有(2-甲氧基苯基)哌嗪(MPP)活性基团的4-[(2-甲氧基苯基)哌嗪基]-二硫代甲酸盐(MPPDTF),式中MPP基团是与5-HT1A脑受体具有高亲和性的药效团.通过元素分析、红外光谱(IR)、核磁(1HNMR)及质谱(EI-MS)等表征确认了配体的结构.99mTcN核标记配合物按两步法制备:先由药盒法制得中间体([99mTc≡N]i2nt+),然后通过配体交换反应制得最终标记配合物(99mTcN(MPPDTF)2).配体交换反应条件在配体用量、反应pH值、反应温度以及反应时间等方面经过细致的优化,在最佳标记条件下可制得放射化学纯度大于98%的最终配合物.中间体和最终配合物的制备均经过TLC和HPLC鉴定.99mTcN(MPPDTF)2配合物为中性、脂溶性配合物(P=49.5±3.5,n=3),在室温下放置6 h以上放化纯无明显变化.

MicroRNA-99b-5p通过抑制成纤维细胞生长因子21表达促进心肌细胞肥大

【目的】研究微小RNA microRNA-99b-5p(miR-99b-5p)对心肌细胞肥大表型的调节作用及机制。【方法】实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人心肌组织(包括健康对照者、心力衰竭患者心肌组织)以及横向主动脉缩窄(TAC)手术小鼠心肌中miR-99b-5p的表达水平。血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理原代乳小鼠心肌细胞(NMVCs)后,利用鬼笔环肽染色呈现心肌细胞大小,RT-qPCR检测miR-99b-5p表达水平。利用RT-qPCR及蛋白质免疫印迹法检测转染miR-99b-5p mimic对NMVCs中肥大相关基因及成纤维细胞生长因子21(Fgf21)表达的影响。双萤光素酶报告实验验证miR-99b-5p与Fgf21基因3′端非翻译区(3’UTR)的结合作用。利用腺病毒介导在NMVCs中过表达Fgf21及超氧化物歧化酶2(Sod2),并利用小干扰RNA(siRNA)敲低NMVCs中Fgf21和Sod2表达,研究Fgf21/Sod2轴是否介导miR-99b-5p对心肌细胞肥大表型的调节作用。【结果】MiR-99b-5p在心衰患者心肌组织、TAC术后的小鼠心肌组织及在AngⅡ处理的心肌细胞中均表达上调(P<0.01)。MiR-99b-5p可促进NMVCs中与肥大相关基因的表达(P<0.01)。双萤光素酶报告基因实验证实miR-99b-5p与Fgf21基因的3’UTR存在结合作用,并且miR 99b-5p可抑制Fgf21及其下游基因Sod2表达(P<0.05)。在NMVCs中过表达Fgf21或Sod2均可有效逆转miR 99b-5p的促心肌细胞肥大作用(P<0.05)。【结论】MiR-99b-5p在肥厚心肌中表达增加,并通过Fgf21/Sod2轴发挥促进心肌细胞肥大的作用。

^(99)Tc^m(CO)_3-PNP5的合成及初步生物分布

采用两步法制备了99Tcm(CO)3-N,N-二[二(3-甲氧基丙基)膦基乙基]-2-乙氧基乙胺(99Tcm(CO)3-PNP5)新型配合物,标记率和放化纯度均大于90%。理化性质研究表明:99Tcm(CO)3-PNP5是一种体外稳定性好、具有一定脂溶性的阳离子配合物。小鼠生物分布研究表明,99Tcm(CO)3-PNP5在心肌中有一定的初始摄取和较好的滞留;血和肺的初始摄取较低,清除较快;肝中的初始摄取高,而清除迅速。在配合物中引入Tween-80后,配合物在小鼠体内心肌初始摄取明显升高,滞留也较好;肝中初始摄取较低且清除很快,心与肝的放射性摄取比(T/NT)高,说明Tween-80的引入明显改善了配合物99Tcm(CO)3-PNP5的生物性能。

^(99m)Tc-MDP全身骨扫描和血清OPG、BSP和TRACP-5b测定对肺癌骨转移的临床评价

目的:目的:探讨肺癌患者三项血清骨代谢指标含量变化与其骨转移的关系及其临床评价。方法:血清OPG、BSP和TRACP-5b测定均采用酶联免疫法。结果:测定结果表明,三项血清骨代谢指标含量骨转移组显著高于非骨转移组和正常对照组(P均<0.01),而非骨转移组与正常对照组比较无显著性差异(P均>0.05)。骨转移累及数目≥3处组三项血清骨代谢指标含量显著高于≤2处组和非骨转移组(P均<0.05,P均<0.01),而≤2处组与非骨转移组差异也具显著性(P均<0.05)。18例肺癌患者骨转移累及灶数统计结果,≤2处转移灶数为22个,≥3处转移灶数为120个,总体转移灶数为142个。血清骨代谢指标含量与转移灶数目的相关性分析显示,≤2处累及数目与OPG、BSP、TRACP-5b相关关系呈显著正相关(r=0.569、0.559、0.657,P均<0.05);≥3处转移灶数与OPG、TRACP-5b正相关关系更为显著(r=0.809、0.965,P均<0.01),但与BSP的关系与(1～2)处转移组相仿(r=0.617,P<0.05)。结论:三项血清骨代谢指标含量变化与其骨转移的关系密切,其测定对于肺癌骨转移的诊断和监测有一定的帮助。

A549肺腺癌多细胞球体药敏实验、Mdr1、MRP表达以及^(99m)Tc-MIBI摄取研究

目的探讨A549肺腺癌多细胞球体的多药耐药基因(mdr1)和多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达,甲氧基异丁基异腈(MIBI)摄取结果能否预测化疗效果。方法①血浆高峰浓度的化疗药物顺铂(DDP)、长春花碱酰胺(VDS)、氟尿嘧啶(5-氟尿嘧啶,5-FU)、羟喜树碱(HCP)、丝裂霉素(MMC)、多柔比星(阿霉素,ADM)分别进行药物敏感性实验。②单层贴壁细胞培养。96孔板1个,每组4孔,2×104细胞/孔。③MTT检测观察疗效。细胞加化疗药后培养48h,然后加MTT5mg/mL,每孔20μL,4h后用酶标仪(490nm)测量吸光度值。④RT-PCR检测A549细胞和MCF-7耐药株的mdr1和MRP表达,β2-MG作内参照。⑤96孔板内每孔一个球体,每孔掺入99mTc-MIBI9.25×104Bq(2.5μCi),分别于60和120min结束掺入并测量γ计数。结果①A549细胞药敏实验对DDP不敏感,对MMC、VDS、ADM、5-FU、HCP敏感。②MCF-7长春新碱耐药株(MCF-7/VCR)对DDP、VDS不敏感,对MMC、ADM、5-FU和HCP较敏感。③A549细胞及球体的Mdr1/β2-MG为0,MRP/β2-MG分别为0.76和0.62;MCF-7耐药细胞的mdr1/β2-MG和MRP/β2-MG分别为35和4.36。④A549多细胞球体对99mTc-MIBI120min的摄取值高于60min摄取值(P<0.05)。结论A549多细胞球体的mdr1和MRP表达水平较低以及MIBI摄取阳性提示无多药耐药性产生,与化疗药物敏感性检测结果基本一致。A549细胞对DDP耐药说明除mdr1和MRP之外,还存在与转运蛋白间接相关的其他耐药机制。

一种潜在5-HT_(1A)脑受体显像剂^(99)Tc^m-Bicine/HYNIC-MPP2的制备及其生物性能

优化合成了含有1-(2-甲氧基苯基)哌嗪(MPP)结构的配体2-(4-(2-甲氧基苯基)哌嗪基)乙胺-6-叔丁基氧羰基肼基吡啶-3-甲酸(HYNIC-MPP2)。在室温下以N,N-二(2-羟基乙基)氨基乙酸(Bicine)为共配体制备得到配合物99Tcm-Bicine/HYNIC-MPP2,其放射化学纯度大于95%,并且在6 h内保持稳定。脂水分配系数和电泳实验结果表明,该放射性标记配合物是水溶性和电中性的。正常小鼠体内生物分布实验结果表明,99Tcm-Bicine/HYNIC-MPP2有一定的脑摄取(注射后2 min时为0.31%ID/g)。脑区域分布及抑制实验显示,该配合物在5-HT1A受体含量丰富的海马组织有较高摄取(注射后2 min时为1.00%ID/g),而在受体含量低的小脑组织中摄取也低(注射后2 min时为0.63%ID/g)。抑制后,海马摄取降低较多(注射后2 min时为0.42%ID/g),而小脑摄取则无明显变化。抑制前后海马/小脑比值分别为1.59和0.89。由此可见该标记配合物与5-HT1A受体具有一定特异性结合,是一种新的潜在5-HT1A受体显像剂。

一种^(99)Tc^m标记的5-HT_(1A)受体显像剂的合成与标记

合成了一种99Tcm标记的5-HT1A受体显像剂。该显像剂先由二硫二氮与6-溴己酰氯结合,再与2-(1-哌嗪)苯甲醚结合,经还原、脱保护反应得到标记前体,再对前体进行99Tcm标记。标记率达90%以上,薄层层析测得标记物放化纯度大于95%。

熊99-5大豆的选育及栽培要点

熊99-5大豆是以自选系92-36作母本，丹87-3作父本杂交选育而成。该品种高产、优质、抗逆性强、适应性广，2000-2004年在各级试验及生产示范中表现高产稳产。适宜在辽宁省辽阳、鞍山、锦州、营口、庄河等地区种植。

新型心肌灌注显像剂^(99)Tc^m-N-DBODC5在兔体内的生物分布

制备了99Tcm-N-DBODC5,并将其经静脉注射到新西兰白兔体内,进行活体显像,检测其活体生物分布及离体器官分布,研究99Tcm-N-DBODC5作为心肌灌注显像剂的可行性。活体生物分布结果显示,99Tcm-N-DBODC5的心肌摄取迅速,心肌摄取量低于99Tcm-MIBI,99Tcm-N-DBODC5的肝清除速度显著快于99Tcm-MIBI,在注射后30 min时心与肝的T/NT为0.98±0.52,已接近1,显著高于99Tcm-MIBI的心与肝的T/NT(0.56±0.19),P=0.007。60 min时,99Tcm-N-DBODC5的心与肝的T/NT达到高峰,为1.18±0.57,而99Tcm-MIBI仅为0.71±0.29。在180 min内,99Tcm-N-DBODC5的心与肝的T/NT维持在较高水平9。9Tcm-N-DBODC5的肺摄取低,清除快,心与肺的T/NT在180 min内保持在1.43±0.37以上,与99Tcm-MIBI无显著差别9。9Tcm-N-DBODC5的肝清除迅速,避免了肝内放射性对左室下壁的干扰,有利于实现早期显像。故99Tcm-N-DBODC有望成为一种生物分布特性较好的新的心肌灌注显像剂。

2,2',4,4',5-五溴联苯醚(BDE-99)对巴夫藻和塔玛亚历山大藻的致毒胁迫效应

以2种海洋微藻的生长量、丙二醛(MDA)含量及过氧化氢酶(CAT)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)活性为检测指标,在微藻对数生长期时加入不同浓度梯度的2,2',4,4',5-五溴联苯醚(BDE-99),研究BDE-99对巴夫藻(Pavloca viridis)和塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense)的致毒胁迫效应。结果显示:低浓度(1. 67μg/L)的BDE-99对2种微藻均有刺激生长作用,高浓度有强烈的抑制作用并具有明显的剂量效应,26. 72μg/L浓度的BDE-99试验组对巴夫藻、塔玛亚历山大藻的生长抑制率分别为73%、74%。用一定浓度(6. 68μg/L)的BDE-99处理2种微藻,2种微藻的CAT活性在24 h开始升高,96 h达最高值,巴夫藻与塔玛亚历山大藻分别增加47%、31%;巴夫藻AKP活性于72 h达到最高值,与对照组相比,升高43%,塔玛亚历山大藻的AKP活性于48 h达到最大值,与对照组相比,升高40%; 2种微藻的ACP活性变化趋势不明显;随着培养时间的增加,2种微藻MDA含量逐渐升高,特别是塔玛亚历山大藻升高趋势极其明显,巴夫藻、塔玛亚历山大藻均在120 h达最高值,与对照组相比,分别增加56%、95%。研究结果可以为揭示多环芳烃化合物污染对水环境的危害程度提供参考。

用PROTEL 99辅助分析与设计+5V直流稳压电源

结合PROTEL99辅助分析与设计方法,对所设计的直流稳压电源进行仿真,获得电路的功能和指标,从而校验设计的结果,制定最佳设计方案。

[^(99)Tc^mN(PNP5)(DTC)]^+混配配合物的合成及其在小鼠体内的生物分布

通过配体交换反应制备了4种脂溶性阳离子配合物:[99TcmN(PNP5)(PODC)]+(PNP5:N,N-二[二(3-甲氧基丙基)膦基乙基]-2-乙氧基乙胺;PODC:N-甲氧基氨荒酸盐)、[99TcmN(PNP5)(BODC)]+(BODC:N-乙氧基氨荒酸盐)、[99TcmN(PNP5)(MOPDTC)]+(MOPDTC:N-甲氧基丙基氨荒酸盐)和[99TcmN(PNP5)(EOPDTC)]+(EOPDTC:N-乙氧基丙基氨荒酸盐),放化纯度均大于90%。小鼠生物分布结果显示:4种配合物在小鼠体内均有不同程度的心肌摄取和滞留,主要经肾排泄,在血、肝和肺等非靶组织中清除较快。其中,[99TcmN(PNP5)(EOPDTC)]+的靶与非靶组织放射性摄取比(T/NT)较高,30 min时,心脏与血、心脏与肺及心脏与肝的T/NT分别为23.75、3.45和3.63,利于快速心肌显像。若能通过结构修饰提高其心肌摄取,有望发展为一种新型心肌灌注显像剂。

甲硝唑衍生物混配配合物^(99m)TcN(PNP5)(MN-cys-OS)的制备及生物性能研究

合成了一种新的含甲硝唑药效团的双功能配体:2-[3-(2-甲基-5-硝基咪唑基)丙酰胺基]-3-巯基丙酸(MN-cys-OS),并与[99mTcN]i2nt+中间体反应,制备得到一种99mTcN核标记的混配配合物:99mTcN(PNP5)(MN-cys-OS),其标记率大于95%.研究表明99mTcN(PNP5)(MN-cys-OS)为电中性、脂溶性配合物(P=3.17±0.06),具有较好的体外稳定性.正常昆明小鼠体内生物分布研究结果显示该配合物具有很快的肝、血清除性能,进一步的荷MA891肿瘤小鼠研究显示其具有一定的乏氧选择性,但肿瘤摄取较低.