Valproic acid alters differential protein expression in SH-SY5Y cells

This study sought to identify differentially expressed proteins in SH-SY5Y cells treated with valproic acid, using two-dimensional difference gel electrophoresis analysis. Three proteins were unambi-guously identified： the eukaryotic translation initiation factor 4A isoform 1 and ATP6V1B2 protein were downregulated, while the heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K was upregulated. Moreover, all three proteins are associated with altered expression due to oxidative stress. Ma-trix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry and protein immunoblotting assay confirmed the differential expression of eukaryotic translation initiation factor 4A isoform 1. The results indicate that valproic acid exerts an antioxidation effect by regulating the expression of eukaryotic translation initiation factor 4A isoform 1.

丙戊酸钠及其代谢产物的体外肝毒性研究

目的研究丙戊酸钠及3个代谢产物(2-丙基-4-五烯酸、3-羟基丙戊酸、5-羟基丙戊酸)对体外人正常肝细胞L02增殖活性及对肝细胞损伤相关指标的影响。方法实验分为对照组和实验组,对照组细胞常规培养,实验组加入丙戊酸钠及3个代谢产物,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,PCR法检测CYP1A1、CYP1A2、PCNA、Bax及Bcl-2的mRNA相对含量,Western Blotting法检测蛋白表达,同时检测细胞上清液中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果与对照组相比,随着丙戊酸钠及3个代谢产物浓度和时间的增加,对L02细胞增殖活性的抑制逐渐增强,CYP1A1、CYP1A2及Bax的mRNA相对含量和蛋白表达量升高,PCNA及Bcl-2的mRNA相对含量和蛋白表达量均有下降,AST、ALT、LDH含量升高。结论丙戊酸钠及3个代谢产物与肝毒性有关。

丙戊酸钠及其代谢产物与肝损伤的相关性分析

目的研究丙戊酸钠及3个代谢产物(2-丙基-4-五烯酸、3-羟基丙戊酸、5-羟基丙戊酸)对肝损伤参考指标的相关性分析。方法共收集328例癫痫患者血样,其中,123例肝功能异常癫痫患者血样为试验组,205例肝功能正常癫痫患者血样为对照组,采用LC-MS/MS方法测定两组血样(丙戊酸钠及代谢产物)的血药浓度,通过ROC曲线分析丙戊酸及其代谢产物浓度对肝功能异常的诊断价值。结果肝功能异常组患者丙戊酸钠及其3个代谢产物平均血药浓度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。丙戊酸钠及其代谢产物的血药浓度均可作为诊断肝损伤的参考指标,5-羟基丙戊酸比丙戊酸钠有更好的诊断价值。结论丙戊酸钠代谢产物与肝毒性有关,能够作为肝损伤的诊断指标,可将其应用于临床,为丙戊酸钠有效给药提供参考。

VPA、SAHA和DAC对子宫内膜癌细胞系抑制作用的研究

目的:观察丙戊酸(VPA)、软木酰苯胺氧肟酸(SAHA)和5-氮-2-脱氧胞苷(DAC)对子宫内膜癌细胞RL-952和HEC-1-B的增殖抑制作用,及对细胞周期、凋亡情况和上皮型钙黏素(E-cad)基因表达的影响。方法:以VPA、SAHA和DAC作用于子宫内膜癌细胞,应用噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪和透射电镜对细胞增殖、周期和凋亡情况进行观察。应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法观察药物作用后细胞内E-cadmRNA表达的情况。结果:VPA、SAHA和DAC作用HEC-1-B和RL-952细胞,随着药物浓度的增加,增殖抑制率明显增加(6.77%～93.25%和3.24%～89.25%,5.61%～97.36%和2.56%～87.85%,8.25%～92.54%和5.56%～93.47%)(P<0.01);同一浓度药物随着作用时间的延长(24～96小时)对HEC-1-B和RL-952细胞增殖抑制率明显增加(42.41%～82.74%和36.17%～71.05%,43.15%～82.09%和40.38%～85.93%,43.26%～91.44%和37.75%～85.37%)(P<0.01)。HEC-1-B和RL-952细胞G0/G1期所占比例,经VPA、SAHA、DAC作用24小时后均较对照组增高,差异有高度统计学意义(P<0.01)。应用VPA、SAHA和DAC后细胞凋亡发生率均较对照组增高,差异有高度统计学意义(P<0.01),出现特征性凋亡形态特征。VPA、SAHA和DAC作用后,RL-952和HEC-1-B细胞E-cadmRNA表达上调,较对照组均增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:VPA、SAHA和DAC可有效抑制子宫内膜癌RL-952和HEC-1-B细胞增殖,有明显的细胞周期阻滞和诱导凋亡作用,对E-cad基因具有明显上调作用。