健脾化湿颗粒对D-IBS模型大鼠脑中5-HT及5-HTR3,5-HTR4表达的影响

目的:从前额叶皮质、海马及下丘脑中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和5-羟色胺受体3(5-hydroxytryptamine receptor3,5-HTR3),5-羟色胺受体4(5-HTR4)角度探讨健脾化湿颗粒改善腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,D-IBS)模型大鼠结肠运动和内脏敏感性的作用机制.方法:采用番泻叶灌胃结合束缚应激法建立D-IBS大鼠模型,应用健脾化湿颗粒进行干预,采用酶联免疫法(ELISA)检测大鼠海马中5-HT含量,采用免疫组织化学法检测前额叶皮质、海马及下丘脑中5-HT、5-HTR3、5-HTR4阳性表达,采用逆转录-聚合酶链反应法检测海马中5-H T R3 m R N A和5-H T R4m RNA的表达水平.结果:与正常组相比,模型组海马中5-HT含量(327.30±22.35 vs 265.33±13.60),前额叶皮质、海马、下丘脑中5-HT阳性表达(0.16±0.02 vs 0.08±0.01,0.19±0.02 vs 0.09±0.01,0.17±0.02 vs 0.08±0.01)明显升高(P<0.01);前额叶皮质、海马、下丘脑中5-HTR3阳性表达(0.29±0.02 vs 0.10±0.01,0.23±0.02 vs 0.09±0.01,0.22±0.02 vs 0.09±0.02)及5-HTR4阳性表达(0.25±0.02 vs0.11±0.01,0.28±0.02 vs 0.10±0.02,0.27±0.02 vs 0.11±0.02)明显升高(P<0.01);海马中5-H T R3 m R N A和5-H T R4 m R N A的表达(0.54±0.01 vs 0.17±0.05,0.73±0.08 vs 0.10±0.02)显著升高(P<0.01).与模型组相比,阳性对照组、中、高剂量组海马中5-H T含量(298.92±12.16、286.29±24.43、279.86±20.05 vs 327.30±22.35)显著下降(P<0.05,P<0.01),中、高剂量组前额叶皮质中5-HT表达(0.12±0.01、0.11±0.01 vs 0.16±0.02)显著下降(P<0.01),阳性对照组、中、高剂量组海马、下丘脑中5-H T表达显著下降(P<0.05,P<0.01);各治疗组前额叶皮质、海马、下丘脑中5-H T R3表达及5-H T R4表达下降显著(P<0.05,P<0.01);各治疗组海马中5-H T R3 m R N A表达及5-H T R4 m R N A表达显著降低(P<0.05,P<0.01).结论:健脾化湿颗粒可能通过下调脑中5-HT、5-HTR3、5-HTR4表达来改善D-IBS模型大鼠结肠运动和内脏敏感性.

消风止痒汤辅助雷公藤多苷片治疗风热型急性荨麻疹疗效及其对中医证候积分及血清IgE、WBC、5-HT水平的影响

目的观察消风止痒汤辅助雷公藤多苷片治疗风热型急性荨麻疹疗效及其对中医证候积分和血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞(WBC)、5-羟色胺(5-HT)水平的影响。方法选取我院收治的风热型急性荨麻疹患者96例作为研究对象,按照随机数字表法分为两组,均给予基础干预,对照组给予雷公藤多苷片治疗,研究组在对照组基础上采用消风止痒汤辅助治疗。观察两组中医证候积分、临床疗效,检测患者白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)、IgE、WBC、5-HT水平。结果治疗后两组瘙痒、水肿、风团数量、风团大小积分显著低于治疗前(P<0.05),且研究组显著低于对照组(P<0.05);研究组总有效率91.67%显著高于对照组75.00%(P<0.05);治疗后两组IL-4水平显著低于治疗前(P<0.05),且研究组显著低于对照组(P<0.05),两组IFN-γ水平显著高于治疗前(P<0.05),且研究组显著高于对照组(P<0.05);治疗后两组IgE、WBC水平显著低于治疗前(P<0.05),且研究组显著低于对照组(P<0.05),两组5-HT水平显著高于治疗前(P<0.05),且研究组显著高于对照组(P<0.05)。结论消风止痒汤辅助雷公藤多苷片可有效改善风热型急性荨麻疹患者临床症状和血清IgE、WBC、5-HT水平,提高治疗效果。

基于短链脂肪酸调控5-HT探讨中医药治疗肠易激综合征作用机制

肠易激综合征,肠道微生态失调及肠5-羟色胺(5-HT)系统紊乱是其基础病因。肠道菌群的代谢产物短链脂肪酸(SCFAs)可调节肠5-HT的生成,而肠易激综合征患者SCFAs异于常人。目前,中医药的相关研究局限于分别通过调控5-HT、SCFAs达到治疗目的。中医药可以通过作用于肠道菌群改变SCFAs生成进而影响肠5-HT的合成与释放,降低内脏高敏性,从而为中医药治疗提供思路。

5-羟色胺诱导冠状动脉收缩的机制研究

目的:探讨5-羟色胺(5-HT)诱导冠状动脉收缩的机制。方法:取雄性Wistar成年大鼠,制备离体冠状动脉环,经血管张力测定仪测定动脉环的张力变化,并探讨给予不同信号通路抑制剂对5-HT诱导的冠状动脉收缩的影响。结果:首先发现给予5-HT_(2A)受体阻断剂沙格雷酯(sarpogrelate,1μmol/L)可完全消除5-HT引起的冠状动脉浓度依赖性收缩;磷脂酶C_β(PLC_β)抑制剂U73122(10μmol/L和50μmol/L)、Rho相关蛋白激酶抑制剂Y-27632(3μmol/L和10μmol/L)和蛋白激酶Cδ亚基(PKCδ)抑制剂rottlerin(3μmol/L和10μmol/L)孵育后,均可明显抑制5-HT引起的冠状动脉环收缩(P<0.05);此外,L-型钙通道(Cav1.2)阻断剂硝苯地平(1μmol/L)及细胞内钙池操纵性钙内流(SOCE)抑制剂SKF96365(10μmol/L和30μmol/L)和2-氨基乙氧基苯硼酸(2-APB,50μmol/L和100μmol/L)孵育后,5-HT诱导的血管收缩张力较未处理组明显下降(P<0.05);另外,在含硝苯地平(1μmol/L)的无钙Kerbs-Henseleit(K-H)液中,发现5-HT仍可诱导血管收缩。结论:5-HT通过激活5-HT_(2A)受体诱导冠状动脉收缩,其机制可能与PKC和Rho激酶信号通路,以及钙调控有关。

5-羟色胺2C受体对形觉剥夺性成年弱视大鼠离体脑片初级视皮层长时程增强的影响

目的探讨5-羟色胺2C受体(5-HT2CR)对形觉剥夺性成年弱视大鼠离体脑片视皮层V1M区长时程增强(LTP)的影响。方法将16只2周龄Spargue Dawley大鼠随机分为正常对照组和单眼形觉剥夺组,每组8只。正常对照组大鼠不做任何处理;单眼形觉剥夺组大鼠行右侧眼睑缝合术制备单眼形觉剥夺性弱视模型,造模成功后饲养6周,然后处死2组大鼠,冠状切取400μm厚视皮层脑组织切片并孵育于人工脑脊液中。根据人工脑脊液中加入的药物不同,将正常对照组大鼠视皮层切片作为A组,将剥夺眼对侧视皮层切片分为B、C、D和E组,将剥夺眼同侧视皮层切片分为F、G、H和I组。A、B、F组人工脑脊液中不加任何药物,C、G组加生理盐水,D、H组加10μmol·L-15-羟色胺盐酸盐,E、I组加10μmol·L-1SB 242084和10μmol·L-15-羟色胺盐酸盐。采用细胞外微电极记录法对各组大鼠视皮层组织切片进行电生理学实验,记录离体组织切片视皮层V1M区LTP并计算神经元场突触后电位(f PSP)斜率。结果 A、B、C、D、E、F、G、H、I组大鼠视皮层f PSP斜率分别为(198.1±13.5)%、(106.3±8.3)%、(106.3±8.3)%、(157.1±9.7)%、(102.6±4.7)%、(144.5±2.9)%、(144.5±2.9)%、(192.2±8.6)%和(129.7±13.5)%。A、B、F组大鼠视皮层f PSP斜率两两比较差异均有统计学意义(P<0.001),其中A组大鼠视皮层f PSP斜率高于B、F组(P<0.001),B组大鼠视皮层f PSP斜率低于F组(P<0.001)。D组大鼠视皮层f PSP斜率高于C组(t=-10.833,P<0.001);H组大鼠视皮层f PSP斜率高于D、G组(t=-6.841、-10.616,P<0.001);E组大鼠视皮层f PSP斜率低于D、I组(t=11.872、-3.910,P<0.001,P<0.05);I组大鼠视皮层f PSP斜率低于H组(t=9.911,P<0.001)。结论单眼形觉剥夺可造成双侧视皮层神经元功能减退,5-羟色胺盐酸盐可通过5-HT2CR起到一定逆转作用。

儿童强迫症、抑郁症患者血小板5-羟色胺浓度的比较研究

目的:通过检测儿童强迫症、抑郁症患者血小板5-羟色胺(5-HT)的浓度,探讨血小板5-HT在儿童强迫症、抑郁症发病中的作用。方法:采用高效液相色谱法检测22例强迫症患儿(包括强迫思维15例,强迫动作7例)和20例抑郁症患儿血小板5-HT的浓度,并与20名正常儿童进行比较。结果:强迫症患儿(173.43±90.67)ng/109和抑郁症患儿(251.62±152.72)ng/109血小板5-HT的浓度低于正常儿童(351.91±170.97)ng/109(P<0.05),强迫症患儿的血小板5-HT的浓度和抑郁症患儿的差异没有显著性(P>0.05)。强迫症患儿中,强迫思维患儿的血小板5-HT的浓度(147.09±44.92)ng/109低于强迫动作患儿(229.88±136.44)ng/109(P<0.05)。结论:儿童强迫症、抑郁症患者血小板5-HT浓度明显下降,并且强迫思维患儿的血小板5-HT浓度与强迫动作患儿的差异有显著性。

四逆散有效成分对内脏高敏感大鼠5-HT信号通路的多靶点协同调控

目的：研究芍药苷、辛弗林、甘草酸对内脏高敏感大鼠5-羟色胺（5-HT）信号通路的多靶点[色氨酸羟化酶1（TPH1）/5-羟色胺转运体（SERT）/5羟色胺3受体（5-HT3R）/5-HT4RI调控,探讨各成分间的协同交互作用,探索四逆散有效成分干预内脏高敏感状态的潜在机制。方法：SD大鼠随机分为正常组,模型组,匹维溴铵组（15 mg·kg^-1）,芍药苷组（50 mg·kg^-1）,辛弗林组（50 mg·kg^-1）,甘草酸组（50 mg·kg^-1）,芍药苷＋甘草酸组（25 mg·kg^-1＋25 mg·kg^-1）,芍药苷＋辛弗林组（25 mg·kg^-1＋25 mg·kg^-1）,辛弗林＋甘草酸组（25 mg·kg^-1＋25 mg·kg^-1）,芍药苷＋辛弗林＋甘草酸组（16.7 mg·kg^-1＋16.7 mg·kg^-1＋16.7 mg·kg^-1）,四逆散组（10 g·kg^-1）。采用复合应激法建立肠易激综合征（IBS）内脏高敏感大鼠模型;以大鼠一般状态评分和直肠扩张腹壁撤退反射（AWR）的最小容量阈值评价大鼠肠道敏感性程度;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠结肠组织5-HT,TPH1,SERT,5-HT3R,5-HT4R水平,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠结肠组织TPH1,5-HT3R,5-HT4R mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠结肠组织TPH1,5-HT3R蛋白水平。结果：与正常组比较,模型组大鼠一般状态评分和最小容量阈值显著下降（P〈0.01）,结肠组织5-HT,TPH1,5-HT3R水平显著升高,SERT,5-HT4R水平明显降低（P〈0.05,P〈0.01）,TPH1,5-HT3R mRNA及蛋白表达显著升高,5-HT4R mRNA表达明显降低（P〈0.05,P〈0.01）。与模型组比较,芍药苷＋辛弗林＋甘草酸组结肠5-HT,TPH1,5-HT3R水平明显降低,SERT,5-HT4R水平明显升高,TPH1,5-HT3R mRNA及蛋白表达明显降低,5-HT4R mRNA表达明显升高（P〈0.05,P〈0.01）;TPH1,5-HT3R,5-HT4R mRNA多靶点纠偏作用明显,最小容量阈值和一般状态评分明显升高（P〈0.05,P〈0.01）,组内成分之间存在协同交互作用。结论：芍药苷＋辛弗林＋甘草酸组合对內脏高敏感大鼠结肠5-HT合成限速酶（TPH1）和相关受体（5-HT3R,5-HT4R）具有协同增效的调控作用,有效成分组合对5-HT通路的多靶点纠偏效应可能是四逆散改善大鼠内脏高敏感状态的重要机制。

石菖蒲水提物对获得性无助模型的抗抑郁作用

目的:探讨石菖蒲水提物(WERAT)在获得性无助模型上的抗抑郁作用及其对神经系统的作用机制。方法:在获得性无助实验中,将大鼠随机分为空白对照组、模型组、丙咪嗪(100 mg.kg-1)组、WERAT(100,200 mg.kg-1)组,连续ig给药5 d。利用大鼠穿梭计算机图像实时检测分析系统给予大鼠不可逃避的足底电击建立获得性无助模型,进行条件性回避反应训练,测定大鼠的逃避失败次数;在小鼠5-羟色胺酸(5-HTP)增强实验中,小鼠随机分为空白对照组、氟西汀(30 mg.kg-1)组和WERAT(50,100,200 mg.kg-1)组测定5-HTP诱导的小鼠甩头次数。结果:在获得性无助实验中,模型组动物在第3～5天的逃避失败次数比正常组动物显著增加(分别为P<0.05,P<0.01,P<0.01),WERAT 100 mg.kg-1.d-1在第3～5天能够使逃避失败次数显著减少(分别为P<0.05,P<0.01,P<0.05),WERAT 200 mg.kg-1.d-1在第4天和第5天更加明显的减少逃避失败次数(P<0.01)。在小鼠5-HTP增强实验中,WERAT 200 mg.kg-1显著增加5-HTP诱导的小鼠甩头次数(P<0.01)。结论:WERAT在大鼠获得性无助模型上具有抗抑郁作用,其抗抑郁活性可能与增强5-羟色胺(5-HT)神经系统的功能有关。