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hSOD1-G93A突变的肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠脊髓中5-mC水平以及DNMT1、DNMT3A和DNMT3B表达的变化
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作者 鲍炜炜 管英俊 +5 位作者 陈晓素 吕舒畅 陈燕春 张皓云 刘金梦 闫秋鹏 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2024年第2期111-117,共7页
目的探讨5-甲基胞嘧啶(5-mC)水平以及DNA甲基转移酶1、3A和3B(DNMT1、DNMT3A和DNMT3B)蛋白表达变化与肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)之间的关系。方法选用发病前期(70 d)、发病早期(95 d)、发病中期(108 d)和发... 目的探讨5-甲基胞嘧啶(5-mC)水平以及DNA甲基转移酶1、3A和3B(DNMT1、DNMT3A和DNMT3B)蛋白表达变化与肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)之间的关系。方法选用发病前期(70 d)、发病早期(95 d)、发病中期(108 d)和发病晚期(122 d)的hSOD1-G93A突变的ALS转基因小鼠,以同窝野生型(wild type,WT)小鼠作为对照,应用ELISA和Dot blot技术检测ALS小鼠脊髓中5-mC水平的变化规律,采用Western blot和免疫荧光双标染色技术检测ALS小鼠不同时期的脊髓中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的蛋白水平变化以及定位。结果ELISA和Dot blot结果显示,与WT小鼠相比,ALS转基因小鼠脊髓中5-mC水平升高;Western blot分析显示,与WT小鼠相比,ALS转基因小鼠脊髓中DNMT1蛋白水平在70 d无显著性变化,在95 d、108 d和122 d显著升高;DNMT3A蛋白水平在70 d、95 d和108 d升高,在122 d无显著性变化;DNMT3B蛋白水平在70 d无显著性变化,在95 d、108 d和122 d显著升高。结论ALS转基因小鼠脊髓中5-mC水平及关键DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3A和DNMT3B的蛋白水平异常升高与ALS发病密切相关。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 5-mc DNMT1 DNMT3A DNMT3B
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痛泻要方对内脏高敏性大鼠结肠MC活化与5-HT相关性影响的研究 被引量:11
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作者 旺建伟 殷越 +5 位作者 隋方宇 历凯 齐德英 金颖慧 胥风华 赵文静 《中医药学报》 CAS 2013年第1期82-85,共4页
目的:通过对内脏高敏性大鼠结肠MC密度、5-HT表达及二者相关性的影响,研讨痛泻要方对内脏高敏性大鼠结肠MC活化的干预作用。方法:采用乳鼠结肠刺激方法复制内脏高敏性大鼠IBS模型,以免疫组织化学方法和甲苯胺蓝改良法进行结肠双重复染法... 目的:通过对内脏高敏性大鼠结肠MC密度、5-HT表达及二者相关性的影响,研讨痛泻要方对内脏高敏性大鼠结肠MC活化的干预作用。方法:采用乳鼠结肠刺激方法复制内脏高敏性大鼠IBS模型,以免疫组织化学方法和甲苯胺蓝改良法进行结肠双重复染法,观察痛泻要方对结肠组织MC形态学、密度的影响,及其与5-HT表达之间关系,并观察痛泻要方对其二者相关性的影响。结果:经乳鼠结肠刺激方法复制内脏高敏性模型后,结肠中MC颗粒增多,MC周边5-HT表达增强,二者有明显相关性,经痛泻要方干预后,结肠中MC形态改善、数量降低,5-HT表达降低,对二者相关性具有明显调节作用。结论:痛泻要方可改善内脏高敏性大鼠肠道MC活化程度,并抑制MC释放5-HT,从而降低5-HT表达。 展开更多
关键词 痛泻要方 内脏高敏性 MC 5-HT IBS
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加味理肠饮对腹泻型肠易激综合征大鼠5-HT、NPY及肥大细胞的影响 被引量:6
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作者 梁峻尉 白文筠 +5 位作者 迟莉丽 闫华 孙大娟 王帅 赵继亭 赵静文 《山东中医药大学学报》 2018年第4期346-350,共5页
目的 :观察加味理肠饮对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠血浆、结肠组织5-羟色胺(5-HT)与神经肽(NPY)、丘脑及结肠组织5-羟色胺3受体(5-HT3R)mRNA与NPY mRNA表达、结肠肥大细胞(MC)水平的影响,以探讨其作用机制。方法:... 目的 :观察加味理肠饮对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠血浆、结肠组织5-羟色胺(5-HT)与神经肽(NPY)、丘脑及结肠组织5-羟色胺3受体(5-HT3R)mRNA与NPY mRNA表达、结肠肥大细胞(MC)水平的影响,以探讨其作用机制。方法:将SD大鼠随机分为7组,除空白对照组外,各组均予避水应激+夹尾刺激+番泻叶灌胃方法建立IBS-D模型,后分别给予相应药物灌胃,连续用药28 d后处死,运用Elisa法检测大鼠血浆及结肠组织中5-HT与NPY水平,并采用PCR法检测丘脑及结肠组织中5-HT3R mRNA、NPY mRNA的表达,采用甲苯胺蓝染色法检测MC的数量。结果:与空白组比较,模型组血浆及结肠组织5-HT的表达均上调、NPY表达下调(P〈0.05),模型组丘脑及结肠组织5-HT3R mRNA的表达均上调、NPY mRNA的表达下调(P〈0.05);与模型组比较,各药物组的血浆及结肠组织NPY表达均上调、丘脑及结肠组织5-HT3R mRNA表达均下调(P均〈0.05),除中药低剂量组外,其余各药物组的血浆及结肠组织5-HT表达均下调、丘脑及结肠组织NPY mRNA表达均上调(P〈0.05);与空白组比较,模型组结肠组织MC数增多(P〈0.05);与模型组比较,各药物组MC均减少(P〈0.05)。结论 :加味理肠饮能够有效的治疗IBS-D,其作用机制可能与调节5-HT、NPY、5HT3R mRNA、NPY mRNA的表达以及MC水平有关。 展开更多
关键词 加味理肠饮 肠易激综合征 大鼠模型 神经肽 5-羟色胺 肥大细胞
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5-氟尿嘧啶、丝裂霉素、肝素和地塞米松对体外不同生长状态晶状体上皮细胞生长的抑制作用 被引量:4
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作者 李秋明 董红涛 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2008年第3期491-493,共3页
目的:比较体外不同生长状态的晶状体上皮细胞(LECs)对药物敏感性的差异,为体外药物筛选设计提供参考。方法:用含体积分数为10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基调整LECs浓度,分为2组:未融合增生组(细胞浓度为4×104mL-1)和融合维持组(细... 目的:比较体外不同生长状态的晶状体上皮细胞(LECs)对药物敏感性的差异,为体外药物筛选设计提供参考。方法:用含体积分数为10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基调整LECs浓度,分为2组:未融合增生组(细胞浓度为4×104mL-1)和融合维持组(细胞浓度为4×105mL-1),分别放入24孔板中,每孔接种1mL。接种后12h,未融合增生组、融合维持组分别用含体积分数为20%、2%的FBS及含有不同处理因素(含有不同质量浓度5-氟尿嘧啶、丝裂霉素、肝素和地塞米松的DMEM培养基)的培养液培养。作用48h后用MTT比色法检测细胞增生情况。结果:5-氟尿嘧啶和丝裂霉素对未融合增生组和融合维持组的LECs均产生明显的浓度依赖性抑制作用,同一质量浓度药物作用下,未融合增生组的抑制率高于融合维持组(P<0.05)。肝素和地塞米松对未融合增生组LECs有较明显的浓度依赖性抑制作用(P<0.05),而对融合维持组的LECs几乎没有影响。结论:体外不同生长状态的LECs对不同药物及剂量敏感性不同。5-氟尿嘧啶和丝裂霉素抑制LECs的增生作用强,但对处于融合维持状态的LECs毒性也明显;肝素和地塞米松对LECs有一定的增生抑制作用,对处于融合维持状态的LECs毒性低。 展开更多
关键词 晶状体上皮细胞 体外培养 生长状态 5-氟尿嘧啶 丝裂霉素 肝素 地塞米松
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小鼠胃肠道5-羟色胺免疫反应阳性肥大细胞 被引量:2
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作者 张文学 刘文玲 +3 位作者 王坤英 柳玉山 荣换玲 卢正 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期94-97,共4页
利用免疫组化技术和甲苯胺蓝(TB)染色技术,对小鼠胃肠道5-羟色胺免疫反应阳性细胞(5-HT+细胞)、肥大细胞(MC)和5-羟色胺免疫反应阳性肥大细胞(5-HT+MC)进行了研究.结果表明:小鼠胃肠中5-HT+细胞多分布于黏膜上皮细胞之间、腺泡上皮细胞... 利用免疫组化技术和甲苯胺蓝(TB)染色技术,对小鼠胃肠道5-羟色胺免疫反应阳性细胞(5-HT+细胞)、肥大细胞(MC)和5-羟色胺免疫反应阳性肥大细胞(5-HT+MC)进行了研究.结果表明:小鼠胃肠中5-HT+细胞多分布于黏膜上皮细胞之间、腺泡上皮细胞之间和固有层内;MC多分布于黏膜层和黏膜下层结缔组织之中;小鼠胃和小肠中分别有49%和47%的MC与免疫组化染色的邻片中5-HT+细胞在位置上相对应,该部分MC为5-HT+MC;小鼠胃和小肠中分别有24%和20%的5-HT+细胞为MC.本文从形态学的角度证明了小鼠胃肠道MC可分泌5-HT,MC是消化道5-HT的来源之一. 展开更多
关键词 小鼠 5-羟色胺 肥大细胞 免疫组化 甲苯胺蓝
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长爪沙鼠肝脏基因组DNA甲基化水平检测 被引量:2
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作者 王志远 刘月环 《实验动物与比较医学》 CAS 2018年第1期44-47,共4页
目的用间接ELISA法检测长爪沙鼠肝脏基因组DNA整体甲基化的水平。方法选取新生仔鼠6只(仔鼠组),3月龄鼠12只[其中青年对照组6只,高脂饮食诱发非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)青年模型组6只],8月龄中老龄鼠6只(中老龄),各组均为雄性,按组采集... 目的用间接ELISA法检测长爪沙鼠肝脏基因组DNA整体甲基化的水平。方法选取新生仔鼠6只(仔鼠组),3月龄鼠12只[其中青年对照组6只,高脂饮食诱发非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)青年模型组6只],8月龄中老龄鼠6只(中老龄),各组均为雄性,按组采集血清(新生鼠除外)用于总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)检测,同时采集肝脏标本二份,一份作常规HE染色的形态学观察,一份提基因组DNA,用ELISA法试剂盒检测肝脏基因组DNA整体甲基化的水平[即5-甲基胞嘧啶(5-mc)含量]。结果青年模型组鼠及中老龄鼠均出现高脂血症,血清TC及TG均不同程度显著上升,青年对照组鼠血脂正常。病理学检查显示,青年模型组与中老龄组鼠肝脏出现较为明显的脂肪变性,而青年对照组肝脏无异常,新生仔鼠肝血窦中可见大量成堆分布有单核细胞和红细胞。肝脏基因组DNA整体甲基化水平,青年模型组沙鼠>新生仔鼠>老龄鼠>5对照组鼠。结论长爪沙鼠NAFLD及年龄增加引起的脂肪性变程度与其基因组DNA甲基化水平相关,间接ELISA法检测肝脏基因组DNA整体甲基化水平简便、迅速,成本低,或可以作为评价其表观遗传学的一种方法。 展开更多
关键词 长爪沙鼠 基因组DNA整体甲基化水平 5-甲基胞嘧啶(5-mc) 间接ELISA法 非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)
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三氯乙酸染毒对肝L-02细胞的增殖作用及对DNA甲基化水平的影响 被引量:4
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作者 杨建平 袁建辉 +11 位作者 胡恭华 纪卫东 张文娟 许玉玲 徐薇 杨淋清 张锦州 吴丽明 胡福勇 朱志良 吴礼康 庄志雄 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期333-336,共4页
目的 检测三氯乙烯(TCE)主要代谢产物三氯乙酸(TCA)对人肝L-02细胞染毒24h后的增殖作用,以及对DNA总体甲基化水平的影响,探索TCE对肝L02细胞的表型遗传毒性。方法选择0.1~0.9mmol/L浓度TCA作为合适的染毒剂量对肝L-02细胞染毒... 目的 检测三氯乙烯(TCE)主要代谢产物三氯乙酸(TCA)对人肝L-02细胞染毒24h后的增殖作用,以及对DNA总体甲基化水平的影响,探索TCE对肝L02细胞的表型遗传毒性。方法选择0.1~0.9mmol/L浓度TCA作为合适的染毒剂量对肝L-02细胞染毒24h后分别进行下列试验:以CCK-8试剂盒观测细胞的生长曲线;以抗5-mC抗体进行免疫荧光检测细胞核中胞嘧啶甲基化总体水平(TCA0.9mmol/L染毒24h);以流式细胞仪(FCM)检测其对细胞周期的影响及凋亡情况;提取细胞DNA进行琼脂糖电泳分析其对DNA的损伤作用。以上试验必要时设置5-氮杂胞苷(5-aza—dC5μmol/L)处理的L-02细胞为基因组DNA低甲基化的对照以及肝癌细胞作为细胞周期分析的对照。结果TCE在0.1~0.9mmol/L浓度下染毒24h后可以促进肝L-02细胞生长,并在0.9mmol/L浓度作用下24h可致肝L-02细胞DNA总体甲基化水平降低,荧光强度和正常细胞比较明显减弱;细胞周期分析发现TCA处理24h后再用正常培养基继续培养24h后可使细胞S+G2期中细胞比例增加(与肝癌细胞接近);DNA梯状电泳分析未发现DNA损伤性改变。结论TCA染毒24h可促进细胞生长,可诱导基因组DNA低甲基化,并造成细胞周期的改变,提示TCA对肝细胞的早期细胞毒性作用与表型遗传机制有关。 展开更多
关键词 三氯乙烯 三氯乙酸 DNA甲基化 表型遗传 甲基胞嘧啶
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甲醛对人Ⅱ型肺泡上皮细胞DNA氧化和甲基化水平的影响 被引量:4
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作者 柯跃斌 黄娟 +2 位作者 朱舟 吴双 陶功华 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2014年第1期24-29,共6页
目的:分析甲醛染毒对体外培养的人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)内8-羟基鸟嘌呤脱氧核苷(8-oxo-dG)水平、DNA 5-甲基胞嘧啶(5-mC)含量的影响及其时间-效应和剂量-效应关系,探讨甲醛所致的细胞DNA氧化与DNA甲基化的关联性。方法:用5... 目的:分析甲醛染毒对体外培养的人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)内8-羟基鸟嘌呤脱氧核苷(8-oxo-dG)水平、DNA 5-甲基胞嘧啶(5-mC)含量的影响及其时间-效应和剂量-效应关系,探讨甲醛所致的细胞DNA氧化与DNA甲基化的关联性。方法:用5~20μmol/L甲醛作用于A549细胞,用高压液相色谱串联电化学检测技术分析细胞DNA 8-oxo-dG水平,用免疫荧光和高效毛细管电泳法检测细胞全基因组DNA 5-mC含量改变。结果:甲醛染毒提高了细胞8-oxo-dG水平,但是降低了细胞的DNA 5-mC含量。甲醛致细胞DNA氧化与DNA甲基化呈现不同特点,A549细胞暴露于20μmol/L甲醛后,DNA氧化水平在1周甚至更早时间就已显著增高,而相同条件下DNA甲基化水平的改变需要6周以上的时间,DNA甲基化的改变滞后于DNA氧化。A549细胞经5~20μmol/L甲醛染毒8周后,DNA氧化水平与甲醛剂量呈正相关关系,而同样条件下DNA甲基化水平与甲醛剂量呈负相关关系。结论:甲醛染毒可提高DNA氧化水平,降低细胞DNA甲基化水平。在甲醛的毒作用效应中,细胞DNA氧化损伤可能是早于其DNA甲基化的一个重要分子事件。 展开更多
关键词 甲醛 DNA氧化 DNA甲基化 8-羟基鸟嘌呤脱氧核苷 5-甲基胞嘧啶
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菝葜治疗便秘型肠易激综合征作用机制的实验研究 被引量:21
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作者 马腾飞 王业秋 +2 位作者 张宁 刘影 李铁男 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期109-114,共6页
目的研究菝葜治疗便秘型肠易激综合征的疗效及作用机制。方法用冰水灌胃法复制大鼠便秘型肠易激综合征模型,将造模成功大鼠分为模型组、菝葜提取物高、中、低剂量组(浓度依次为8、4、2 g.ml-1,按生药量计)、阳性对照组,另设空白对照组... 目的研究菝葜治疗便秘型肠易激综合征的疗效及作用机制。方法用冰水灌胃法复制大鼠便秘型肠易激综合征模型,将造模成功大鼠分为模型组、菝葜提取物高、中、低剂量组(浓度依次为8、4、2 g.ml-1,按生药量计)、阳性对照组,另设空白对照组。灌胃给药3周后,酶免法测定大鼠血清5-HT和血浆SS、SP含量的变化,观察菝葜提取物对大鼠结肠5-HT、SP、SS和脊髓SP免疫组化染色的影响,以及对大鼠结肠MC甲苯胺蓝法染色的影响。结果与模型组相比,菝葜提取物低剂量组能够降低模型大鼠血清5-HT和血浆SS含量(P<0.05);能够升高模型大鼠血浆SP的含量(P<0.05);能够升高模型大鼠结肠SS、SP和脊髓SP免疫组化染色的平均灰度值(P<0.05);能够升高模型大鼠结肠5-HT免疫组化染色平均灰度值(P<0.01);并且能够减少模型大鼠结肠MC计数(P<0.05)。结论菝葜对便秘型肠易激综合征模型大鼠有明显的治疗作用,其作用机制可能是通过调整模型大鼠血清5-HT,血浆SS、SP,结肠5-HT、SP、SS、MC,脊髓SP等来实现的。 展开更多
关键词 菝葜 便秘型肠易激综合征 5-羟色胺 生长抑素 P物质 肥大细胞
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大鼠肺鳞癌癌变过程中基因组甲基化水平动态研究 被引量:1
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作者 刘文斌 刘晋祎 +4 位作者 周紫垣 周燕虹 敖琳 崔志鸿 曹佳 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2009年第1期27-29,35,共4页
背景与目的:研究大鼠肺鳞癌癌变各阶段基因组DNA甲基化水平动态变化趋势。材料与方法:支气管灌注3-甲基胆蒽(MCA)及二乙基亚硝胺(DEN)碘油溶液诱发Wistar大鼠肺鳞癌模型。采用免疫组化法检测大鼠肺鳞癌癌变各阶段基因组DNA甲基化水平,... 背景与目的:研究大鼠肺鳞癌癌变各阶段基因组DNA甲基化水平动态变化趋势。材料与方法:支气管灌注3-甲基胆蒽(MCA)及二乙基亚硝胺(DEN)碘油溶液诱发Wistar大鼠肺鳞癌模型。采用免疫组化法检测大鼠肺鳞癌癌变各阶段基因组DNA甲基化水平,利用图像分析系统测量其平均光密度值和积分光密度值。结果:经支气管灌注MCA及DEN碘油溶液,诱发Wistar大鼠肺鳞癌模型,共获取癌变各阶段标本154例,其中增生25例,鳞状化生组织27例,不典型增生组织37例,原位癌组织30例,浸润癌组织25例。大鼠肺鳞癌癌变各阶段基因组DNA甲基化水平按上述顺序呈递减的趋势,癌变各阶段甲基化水平与正常对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.01),正常和癌变支气管上皮基底层甲基化水平高于腔细胞层,差异亦具有统计学意义(P<0.01)。结论:大鼠肺鳞癌癌变过程中基因组DNA甲基化水平的降低,可能是介导其癌变的重要表遗传学机制。 展开更多
关键词 肺肿瘤 DNA甲基化 5-甲基化胞嘧啶抗体 癌变
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基于CAD与NC加工验证的五轴加工中心设计方法 被引量:4
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作者 王准 《制造技术与机床》 北大核心 2013年第1期53-57,61,共6页
以立、卧两种复合型(转台+摆头)五轴加工中心为研究对象,详细分析、总结出融合CAD平台(Inventor & Solidworks)与数控加工验证平台(Vericut),并采取双向关联方式,分析五轴加工中心计算机辅助设计的方法、原理及工作流程。这些原理... 以立、卧两种复合型(转台+摆头)五轴加工中心为研究对象,详细分析、总结出融合CAD平台(Inventor & Solidworks)与数控加工验证平台(Vericut),并采取双向关联方式,分析五轴加工中心计算机辅助设计的方法、原理及工作流程。这些原理与方法,是具备普遍性和实用性的,可被各类高端数控机床设计与制造者借鉴,以改善其相关设计与生产工作的质量、效率及成本目标。 展开更多
关键词 五轴加工中心 总体设计 CAD 数控加工验证 机械本体协调性
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连锁加油站计算机自动管理系统 被引量:1
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作者 李晓东 韩震宇 吕松茂 《机电一体化》 2001年第5期39-42,共4页
对加油站进行计算机自动化管理是加油站在经营运行中提出的实际要求。本文介绍了在加油站内部实现以SYBASE客户/服务器体系为核心的数据库业务管理系统,以及PC机通过通讯控制器管理多台MCS-51单片机从机的分布式网络系... 对加油站进行计算机自动化管理是加油站在经营运行中提出的实际要求。本文介绍了在加油站内部实现以SYBASE客户/服务器体系为核心的数据库业务管理系统,以及PC机通过通讯控制器管理多台MCS-51单片机从机的分布式网络系统。系统中,通讯控制器由89C51构成,通过其串行口实现与从机的通讯以及由RS232接口实现与PC机通讯。 展开更多
关键词 SYBASE客户/服务器体系 单片机 串行通讯 加油站 自动管理系统 联锁
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工作台回转与刀轴摆动五轴联动数控加工编程技术研究 被引量:4
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作者 周奎 曾祥录 陶华 《制造技术与机床》 CSCD 北大核心 2009年第12期95-98,共4页
研究了工作台回转与刀轴摆动五轴联动数控加工编程中的刀轴矢量与转动角度之间的转换;刀位点在工件坐标系与工作坐标系之间的位置变换;刀轴摆动导致的基准点与刀位点之间的位置补偿等关键技术,为多轴联动数控加工编程技术提供参考。
关键词 工作台回转 刀轴摆动 五轴联动 坐标变换 位置补偿
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病毒与非病毒载体转染新生大鼠血管纹边缘细胞的比较研究
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作者 杨阳 孔维佳 +5 位作者 李隽 胡钰娟 钟毅 郝亚楠 赵学艳 彭炜 《中华耳科学杂志》 CSCD 2008年第2期221-227,共7页
目的通过病毒与非病毒载体对原代培养的新生大鼠内耳血管纹边缘细胞转染情况的比较,选择出适合边缘细胞的基因治疗载体。方法用质粒(pEGFP-N1)、血清5型重组腺病毒(rAd5)以及血清2型重组腺相关病毒(rAAV2)三种载体转染新生大鼠(≤72小时... 目的通过病毒与非病毒载体对原代培养的新生大鼠内耳血管纹边缘细胞转染情况的比较,选择出适合边缘细胞的基因治疗载体。方法用质粒(pEGFP-N1)、血清5型重组腺病毒(rAd5)以及血清2型重组腺相关病毒(rAAV2)三种载体转染新生大鼠(≤72小时)耳边缘细胞,通过对转染效率、细胞凋亡以及细胞活性的检测将三种载体加以比较。结果对边缘细胞的转导效率依次为rAd5>rAAV2>pEGFP-N1,AnnexinⅤ-APC/7-AAD双染法检测转染阳性细胞的损伤情况依次为rAAV2<rAd5<pEGFP-N1,CCK-8法检测转染后的细胞活性依次为rAAV2>rAd5>pEGFP-N1。结论病毒载体相对于非病毒载体以其高转导效率、低细胞毒性在对原代培养的新生大鼠耳边缘细胞的转染中表现出明显优势。与血清2型重组腺相关病毒比较,相对高效、低毒性的血清5型重组腺病毒更适用于原代培养的新生大鼠血管纹边缘细胞的基因转染研究。 展开更多
关键词 质粒pEGFP—N1 血清5型腺病毒 血清2型腺相关病毒 转染 边缘细胞 大鼠
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一种多功能单片机接口实验板
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作者 李红旗 杨雷 《郑州大学学报(自然科学版)》 CAS 2001年第1期62-65,共4页
自制设计了一种 MCS- 51单片机接口实验板 .利用它可以做存储器扩展、并行 I/O扩展、串行通讯、A/D转换、D/A转换、键盘、LED显示、打印等多种单片机接口实验 ,弥补了传统的单板单用的不足 .给出了其硬件组成及各种接口说明 。
关键词 MCS-51单片机 接口电路 软件设计 接口实验板 硬件设计 单片机接口实验
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加味参苓白术散治疗腹泻型肠易激综合征的临床观察
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作者 张婷婷 周文博 黄泽辉 《智慧健康》 2019年第30期64-65,148,共3页
目的观察加味参苓白术散治疗腹泻型肠易激综合征(D-IBS)的临床疗效,初探肠粘膜肥大细胞(MC)和血浆5-羟色胺(5-HT)在IBS发病机制中可能的作用。方法收集脾胃虚弱型D-IBS患者60例、健康志愿者30例。将60例患者随机分成2组,治疗组给予加味... 目的观察加味参苓白术散治疗腹泻型肠易激综合征(D-IBS)的临床疗效,初探肠粘膜肥大细胞(MC)和血浆5-羟色胺(5-HT)在IBS发病机制中可能的作用。方法收集脾胃虚弱型D-IBS患者60例、健康志愿者30例。将60例患者随机分成2组,治疗组给予加味参苓白术散治疗,对照组给予匹维溴铵治疗,疗程4周,观察治疗的总有效率,比较两组患者治疗前后MC数目、5-HT水平变化,同时与健康组比较。结果治疗组总有效率优于对照组,治疗前后两组患者的MC数目和5-HT水平均有所下降,比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者的MC数目和5-HT水平较健康组明显升高,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论加味参苓白术散治疗脾胃虚弱型D-IBS取得良好的临床疗效,MC、5-TH可能均参与D-IBS发病机制的重要环节。 展开更多
关键词 加味参苓白术散 腹泻型肠激综合征 临床疗效 MC数目 5-HT水平
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5-甲基胞嘧啶 5-羟甲基胞嘧啶在女性甲状腺乳头状癌组织中的表达及与TET蛋白的关系 被引量:1
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作者 张松泽 肖樟生 杨飞标 《中国妇幼保健》 CAS 2022年第23期4499-4502,共4页
目的 探讨5-甲基胞嘧啶(5-mC)、5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)在女性甲状腺乳头状癌(PTC)组织中的表达及与TET蛋白的关系。方法 随机选取2019年1月—2020年1月于宁波大学附属人民医院进行手术治疗的33例女性PTC患者作为研究对象,经病理科收集... 目的 探讨5-甲基胞嘧啶(5-mC)、5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)在女性甲状腺乳头状癌(PTC)组织中的表达及与TET蛋白的关系。方法 随机选取2019年1月—2020年1月于宁波大学附属人民医院进行手术治疗的33例女性PTC患者作为研究对象,经病理科收集甲状腺癌组织和癌旁组织(距离癌组织2~3 cm)。提取组织DNA,计算全基因组DNA甲基化率,比较PTC癌组织和癌旁组织中5-mC和5-hmC表达水平。提取组织RNA,反转录后利用荧光定量聚合酶链式反应,以GAPDH为参照,采用2-△△Ct表示组织中TET1、TET2、TET3蛋白表达水平,比较PTC癌组织与癌旁组织TET蛋白表达水平。结果 PTC癌组织5-mC和5-hmC表达水平低于癌旁组织,差异均有统计学意义(t=13.841、10.900,均P<0.05);PTC癌组织TET1、TET2和TET3蛋白mRNA表达水平低于癌旁组织,差异均有统计学意义(t=4.780、10.766、19.119,均P<0.05);PTC癌组织5-hmC表达水平与TET1蛋白呈正相关,差异有统计学意义(r=0.789,P<0.05)。结论 PTC癌组织中5-mC、5-hmC、TET1、TET2及TET3蛋白呈低表达,其中5-hmC表达水平与TET1蛋白呈正相关,5-hmC与TET1有可能成为PTC的诊断和治疗新靶点。 展开更多
关键词 女性 甲状腺乳头状癌 5-甲基胞嘧啶 5-羟甲基胞嘧啶 TET蛋白
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针刺和热刺激对小鼠“关元”穴区肥大细胞、血清五羟色胺影响差异的研究(英文) 被引量:7
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作者 刘琼 朱伟 +5 位作者 刘迈兰 刘霞 曹佳男 胡舒宁 常小荣 景向红 《World Journal of Acupuncture-Moxibustion》 CSCD 2018年第4期257-262,311-312,共7页
目的:观察针刺激与热刺激不同刺激方式对小鼠"关元"局部穴区肥大细胞(MC)、五羟色胺(5-HT)和血清中5-HT表达的影响。方法:39只雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、针刺激组、热刺激组,每组13只,适应性喂养一周后进行试验。针刺... 目的:观察针刺激与热刺激不同刺激方式对小鼠"关元"局部穴区肥大细胞(MC)、五羟色胺(5-HT)和血清中5-HT表达的影响。方法:39只雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、针刺激组、热刺激组,每组13只,适应性喂养一周后进行试验。针刺激组手针刺激小鼠"关元" 5 min,热刺激组采用热灸仪刺激"关元" 30 min。采甲苯胺蓝染色方法和免疫荧光组织化学方法观察分析针刺与热刺激前后对"关元"穴区皮肤MC和5-HT表达(每组5只),采用酶联免疫吸附测定法测定针和热刺激前后对血清中5-HT含量(每组8只),分析比较针刺激与热刺激对小鼠皮肤MC、5-HT以及血清5-HT含量的不同影响。结果:①针或热刺激C57BL/6小鼠"关元"穴后,其穴区肥大细胞数量较C57BL/6空白组明显增多(空白组12.40±2.07 vs针刺激组23.00±5.96,空白组12.40±2.07 vs热刺激组26.20±10.85,均P<0.05),出现肥大细胞聚集及脱颗粒现象(空白组8.00±3.16vs针刺激组17.80±4.55,空白组8.00±3.16 vs热刺激组24.00±9.05,P<0.05,P<0.01)。②针或热刺激后出现穴区肥大细胞释放5-HT,并向血管周围聚集,穴区5-HT数量较空白组相比明显增多(空白组3.00±1.28 vs针刺激组10.02±3.21:空白组3.00±1.28vs热刺激组14.00±3.94,均P<0.01)。③与空白组对比,针或热刺激均能降低血清中5-HT含量(空白组0.72±0.2372 vs针刺激组0.43±0.21,空白组0.72±0.24 vs热刺激组0.32±0.18,均P<0.01),而热刺激组略优于针组(P<0.05)。结论:针刺激、热刺激均可以引起穴区肥大细胞的聚集和脱颗粒以及5-HT高表达,热刺激的效用略优于针刺激。 展开更多
关键词 针刺激 热刺激 肥大细胞 五羟色胺
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戊己丸不同配伍方治疗肠易激综合征的比较 被引量:6
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作者 王娅杰 崔羲和 +7 位作者 陈颖 李玉洁 杨庆 翁小刚 董宇 蔡维艳 李琦 朱晓新 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第13期1-9,共9页
目的:从神经-免疫-内分泌网络对优选的2种戊己丸配伍方干预肠易激综合征(IBS)的作用特点进行比较研究,为中医辨证论治提供一定的理论依据。方法:采用乳鼠结肠经皮冠状动脉腔内血管成形(PTCA)球囊刺激法建立IBS慢性高敏感动物模型,分为... 目的:从神经-免疫-内分泌网络对优选的2种戊己丸配伍方干预肠易激综合征(IBS)的作用特点进行比较研究,为中医辨证论治提供一定的理论依据。方法:采用乳鼠结肠经皮冠状动脉腔内血管成形(PTCA)球囊刺激法建立IBS慢性高敏感动物模型,分为正常组、模型组、得舒特组、戊己丸1#和2#方高、中、低剂量组,其中1#方以0.67 g·kg^(-1)为中剂量,2#方以0.77 g·kg^(-1)为中剂量,加倍、减半分别为高、低剂量,得舒特给药剂量为0.01 g·kg^(-1)。采用腹部抬起及弓背抬高阈值评价戊己丸不同配伍方对IBS肠道敏感性的影响;采用改良后的甲苯胺蓝染色法检测对大鼠结肠组织肥大细胞(MC)密度的影响;分别采用酶联免疫吸附测定(ELISA)和免疫组化法检测大鼠血液/结肠组织中5-羟色胺(5-HT),P物质(SP),生长抑素(SS)及血管活性肠肽(VIP)的浓度/阳性表达。结果:各组大鼠体质量随时间差异无统计学意义;与正常组比较,模型组腹部抬起和弓背抬高阈值均显著降低(P<0.01),结肠组织中MC密度明显升高(P<0.05),血液以及结肠组织中的5-HT,SP,SS水平均明显增加(P<0.05,P<0.01),结肠组织中VIP表达明显提高(P<0.05)。与模型组比较,戊己丸不同配伍方均可显著提高腹部抬起和弓背抬高阈值(P<0.01),明显减少结肠组织MC数量(P<0.05)及5-HT,SP,SS和VIP的表达(P<0.05)。分析戊己丸不同配伍方作用得出,戊己丸1#方在降低血液中5-HT,SP及SS方面不同程度地强于2#方,其中尤以对5-HT的影响的差别最为显著(P<0.01);而2#方在降低结肠5-HT阳性表达上与1#方差别无明显统计学意义,在下调SP阳性表达上显著优于1#方;对于结肠SS阳性表达,其阳性表达的强度及范围显著小于1#方(P<0.05)。结论:戊己丸不同配伍方均能调整IBS的胃肠激素紊乱,降低肠道敏感性;在整体作用上,1#方不同程度地强于2#方,而在肠道局部作用上,2#方显示出一定优势,而且1#方更长于对肠道动力学的影响,而2#方则对肠道感觉的影响更大一些。 展开更多
关键词 戊己丸 配伍 肠易激综合征(IBS) 5-羟色胺(5-HT) 肥大细胞(MC) 脑肠肽
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Molecules and mechanisms controlling the active DNA demethylation of the mammalian zygotic genome 被引量:1
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作者 Jun-Yu Ma Teng Zhang +2 位作者 Wei Shen Heide Schatten Qing Yuan Sun 《Protein & Cell》 SCIE CAS CSCD 2014年第11期827-836,共10页
The active DNA demethylation in early embryos is essential for subsequent development. Although the zygotic genome is globally demethylated, the DNA methylation of imprinted regions, part of repeat sequences and some ... The active DNA demethylation in early embryos is essential for subsequent development. Although the zygotic genome is globally demethylated, the DNA methylation of imprinted regions, part of repeat sequences and some gamete-specific regions are maintained. Recent evidence has shown that multiple proteins and biological pathways participate in the regulation of active DNA demethylation, such as TET proteins, DNA repair pathways and DNA methyltransferases. Here we review the recent understanding regarding proteins associated with active DNA demethylation and the regulatory networks controlling the active DNA demethylation in early embryos. 展开更多
关键词 active DNA demethylation ZYGOTE 5-hmC5-mc preimplantation embryo TET proteins
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