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miR-519b-3p调控IL-6/STAT3通路对宫颈癌细胞凋亡、迁移、侵袭的影响 被引量:1
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作者 黄丽 龚豪 张春莲 《中南医学科学杂志》 CAS 2024年第1期56-59,90,共5页
目的探讨miR-519b-3p调控IL-6/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路对宫颈癌细胞(SiHa)凋亡、迁移、侵袭的影响。方法qRT-PCR检测miR-519b-3p在宫颈癌组织中的表达。SiHa细胞分为miR-NC组、miR-519b-3p组、miR-NC+RhIL-6组、miR-519b-3p... 目的探讨miR-519b-3p调控IL-6/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路对宫颈癌细胞(SiHa)凋亡、迁移、侵袭的影响。方法qRT-PCR检测miR-519b-3p在宫颈癌组织中的表达。SiHa细胞分为miR-NC组、miR-519b-3p组、miR-NC+RhIL-6组、miR-519b-3p+RhIL-6组。流式细胞术评估SiHa细胞凋亡率,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况。Western blotting检测B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-cadherin、Bcl相关x蛋白(Bax)、STAT3和p-STAT3蛋白水平。结果与癌旁组织比较,宫颈癌组织miR-519b-3p表达下调(P<0.05)。SiHa细胞凋亡率、Bax和E-cadherin蛋白水平miR-519b-3p组高于miR-NC组,miR-NC+RhIL-6组低于miR-NC组,miR-519b-3p+RhIL-6组低于miR-519b-3p组(P<0.05)。SiHa细胞迁移数、侵袭数、Bcl-2、N-cadherin、p-STAT3蛋白水平miR-519b-3p组低于miR-NC组,miR-NC+RhIL-6组高于miR-NC组,miR-519b-3p+RhIL-6组高于miR-519b-3p组(P<0.05)。结论miR-519b-3p通过抑制IL-6/STAT3通路来抑制宫颈癌细胞迁移和侵袭,并增加细胞凋亡。 展开更多
关键词 宫颈癌 miR-519b-3p 细胞凋亡 细胞迁移 细胞侵袭 IL-6/STAT3通路
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miR-519d在非小细胞肺癌脑转移中的作用及机制
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作者 苏莹 马丽丽 +1 位作者 柳江 韩忠诚 《局解手术学杂志》 2024年第11期974-979,共6页
目的探究miR-519d在非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移(BM)中的作用及其机制。方法采用RT-PCR检测miR-519d在伴有BM的NSCLC患者和无BM的患者癌旁正常肺组织、NSCLC肺组织、NSCLC脑组织,人NSCLC细胞系(SK-MES-1、NCI-H226、NCIH1299和NCL-H820)... 目的探究miR-519d在非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移(BM)中的作用及其机制。方法采用RT-PCR检测miR-519d在伴有BM的NSCLC患者和无BM的患者癌旁正常肺组织、NSCLC肺组织、NSCLC脑组织,人NSCLC细胞系(SK-MES-1、NCI-H226、NCIH1299和NCL-H820)、正常人支气管上皮细胞(HBECs)、人脑微血管内皮细胞(HBMECs)及正常人星形胶质细胞(NHA)中的表达。将过表达miR-519d慢病毒(OE-miR-519d-LV)或空载体慢病毒(NC-LV)转染至NSCLC细胞系NCI-H1299中,作为OE-miR-519d-LV组和NC-LV组;联合转染OE-miR-519d-LV与pcDNA3.1-HER3的细胞作为OE-miR-519d-LV+pcDNA3.1-HER3组。将OE-miR-519d-LV组和NC-LV组细胞经心脏注射至裸鼠体内,以构建伴BM的NSCLC动物模型,并按注射细胞的不同将小鼠分为Ctrl组与miR-519d组。使用生物发光成像系统观察NCI-H1299细胞在小鼠大脑中的转移情况。CCK-8法检测OE-miR-519d-LV组和NC-LV组中NCI-H1299细胞的增殖情况。采用HBMECs和NHA包被的Transwell小室,以建立体外血脑屏障(BBB)细胞模型,并检测OE-miR-519d-LV组和NC-LV组NCI-H1299细胞跨内皮细胞的迁移能力。Western blot检测各组细胞中上皮间质转化(EMT)相关蛋白MMP-2、MMP-9、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达。生物信息学技术分析miR-519d与HER3的潜在结合位点,双荧光素酶基因报告实验验证两者的靶向调控关系。结果与癌旁正常肺组织相比,miR-519d在NSCLC肺组织和NSCLC脑组织中的表达降低(P<0.05);与NSCLC肺组织相比,NSCLC脑组织中miR-519d表达降低(P<0.05)。与HBECs相比,miR-519d在NSCLC细胞系中的表达降低(P<0.05),且miR-519d在NCI-H1299、NCI-H226和NCL-H820细胞中的表达水平低于SK-MES-1细胞(P<0.05)。与Ctrl组裸鼠相比,miR-519d组裸鼠的BM发生率更低,生存时间更长,差异有统计学意义(P<0.05)。与NC-LV组细胞相比,OE-miR-519d-LV组NCI-H1299细胞增殖活力、跨内皮细胞迁移能力及MMP-2、MMP-9、N-cadherin和Vimentin蛋白表达降低(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。miR-519d可靶向调控HER3蛋白表达。与OE-miR-519d-LV组相比,OE-miR-519d-LV+pcDNA3.1-HRE3组细胞的迁移能力升高(P<0.05),MMP-2、MMP-9、N-cadherin和Vimentin蛋白表升高(P<0.05),而E-cadherin表达降低(P<0.05)。结论miR-519d在伴有BM的NSCLC中表达水平降低,上调其表达可通过靶向调控HER3来抑制肿瘤的BM。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 miR-519d 人表皮生长因子受体3 脑转移
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miR-519e-5p靶向ANXA5对脊索瘤U-CH1细胞生物学行为的影响
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作者 李轶 黄小平 王玮 《局解手术学杂志》 2024年第10期892-897,共6页
目的探讨miR-519e-5p靶向膜联蛋白A5(ANXA5)对脊索瘤U-CH1细胞生物学行为的影响。方法以qRT-PCR测定人脊索瘤组织和癌旁组织中miR-519e-5p和ANXA5的表达。体外培养U-CH1细胞,并分为miR-519e-5p mimics组、miR-519e-5p mimics阴性对照+... 目的探讨miR-519e-5p靶向膜联蛋白A5(ANXA5)对脊索瘤U-CH1细胞生物学行为的影响。方法以qRT-PCR测定人脊索瘤组织和癌旁组织中miR-519e-5p和ANXA5的表达。体外培养U-CH1细胞,并分为miR-519e-5p mimics组、miR-519e-5p mimics阴性对照+空载组、miR-519e-5p mimics+ANXA5过表达组、对照组。平板集落形成实验、MTT实验检测各组U-CH1细胞增殖;流式细胞术检测各组U-CH1细胞凋亡;划痕实验、Transwell实验分别检测各组U-CH1细胞迁移与侵袭;Western blot检测各组U-CH1细胞ANXA5蛋白、凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax)及迁移上皮-间充质转化相关蛋白(Claudin-1、Vimentin、E-cadherin)表达;qRT-PCR法检测各组U-CH1细胞miR-519e-5p及ANXA5 mRNA表达;双荧光素酶报告基因实验检验miR-519e-5p与ANXA5在U-CH1细胞中的相互作用。结果与癌旁组织相比,脊索瘤组织miR-519e-5p表达降低(P<0.05),ANXA5 mRNA表达升高(P<0.05)。与对照组相比,miR-519e-5p mimics组细胞增殖率、集落生成率、迁移率、侵袭数、ANXA5 mRNA及ANXA5、Bcl-2、Claudin-1、Vimentin蛋白表达降低(P<0.05),miR-519e-5p mRNA表达、凋亡率及Bax、E-cadherin蛋白表达增高(P<0.05)。与miR-519e-5p mimics组相比,miR-519e-5p mimics+ANXA5过表达组细胞集落生成率、增殖率、侵袭数、迁移率、ANXA5 mRNA及ANXA5、Bcl-2、Vimentin、Claudin-1蛋白表达升高(P<0.05),凋亡率及Bax、E-cadherin蛋白表达下降(P<0.05)。miR-519e-5p可靶向下调U-CH1细胞中ANXA5表达。结论miR-519e-5p通过靶向抑制ANXA5表达降低脊索瘤U-CH1细胞迁移、增殖和侵袭活力,促进其凋亡。 展开更多
关键词 miR-519e-5p ANXA5 脊索瘤 U-CH1细胞 生物学行为
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早中熟常规棉品种创棉519选育及栽培技术
4
作者 贾朋东 庞立根 +4 位作者 黄涛 陈杰 郭明捷 王智 熊万光 《中国棉花》 2024年第3期7-8,共2页
创棉519是由创世纪种业有限公司选育,于2022年通过西北内陆棉区国家农作物品种审定委员会审定的早中熟常规棉花品种。该品种丰产性好,抗枯萎病。在介绍其选育过程、特征特性的基础上,总结了关键栽培技术。
关键词 常规棉 创棉519 品种选育 抗病性 栽培技术
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小麦新品种咸麦519选育及配套高效栽培技术
5
作者 王彬龙 李瑞国 +1 位作者 魏艳丽 蒋会利 《陕西农业科学》 2024年第4期28-31,共4页
阐述了小麦新品种咸麦519的选育背景和过程,并从农艺性状、抗病性、品质等方面总结了其品种特性。根据咸麦519特征特性及栽培试验研究结果,介绍了其配套高效栽培技术,包括整地、施肥、种子处理、播期播量、播种质量、灌溉、病虫害预防... 阐述了小麦新品种咸麦519的选育背景和过程,并从农艺性状、抗病性、品质等方面总结了其品种特性。根据咸麦519特征特性及栽培试验研究结果,介绍了其配套高效栽培技术,包括整地、施肥、种子处理、播期播量、播种质量、灌溉、病虫害预防和收获等方面技术内容,以期为该品种在生产中的高效应用提供参考。 展开更多
关键词 小麦新品种 咸麦519 选育 栽培技术
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国审优质中强筋小麦新品种瑞华麦519选育及栽培技术
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作者 李珍富 杨鹏 +12 位作者 常东伟 卫万娟 郑雅月 杨永乐 任仰涛 陈伟 赵其兵 王磊 夏中华 李晖辉 蔡武宁 顾启花 金彦刚 《大麦与谷类科学》 2024年第3期70-75,共6页
瑞华麦519是江苏瑞华农业科技有限公司以优质强筋小麦品种烟农19和矮秆大穗、抗性好的小麦品种瑞华麦516进行杂交,经系谱法选育而成的综合抗性好、高产稳产的半冬性优质中强筋小麦新品种。2020—2022年参加国家黄淮冬麦区南片水地组区... 瑞华麦519是江苏瑞华农业科技有限公司以优质强筋小麦品种烟农19和矮秆大穗、抗性好的小麦品种瑞华麦516进行杂交,经系谱法选育而成的综合抗性好、高产稳产的半冬性优质中强筋小麦新品种。2020—2022年参加国家黄淮冬麦区南片水地组区域试验,瑞华麦519的2年区域试验平均产量为9084.8 kg/hm^(2),比对照周麦18增产6.30%,2年较对照增产均具高度统计学意义(<0.01)。生产试验和第2年区域试验同步,瑞华麦519平均产量为9354.0 kg/hm^(2),较对照周麦18增产6.71%,具高度统计学意义(<0.01)。2023年通过国家审定,审定编号为国审麦20230045,已申报国家新品种权保护。 展开更多
关键词 瑞华麦519 选育 中强筋 高产 栽培技术
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LncRNA-MIAT通过抑制miR-519d-3p激活EZH2促进甲状腺癌的恶性行为 被引量:1
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作者 吾甫尔·依马尔 王护国 《河北医学》 CAS 2023年第8期1233-1240,共8页
目的:探讨长链非编码RNA MIAT(LncRNA-MIAT)对甲状腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的调控作用与分子机制。方法:用癌症基因组图谱(TCGA)和甲状腺癌(THCA)mRNA-seq数据分析LncRNA-MIAT和组蛋白甲基化转移酶2(EZH2)在甲状腺癌中的表达。... 目的:探讨长链非编码RNA MIAT(LncRNA-MIAT)对甲状腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的调控作用与分子机制。方法:用癌症基因组图谱(TCGA)和甲状腺癌(THCA)mRNA-seq数据分析LncRNA-MIAT和组蛋白甲基化转移酶2(EZH2)在甲状腺癌中的表达。用人正常甲状腺细胞系Nthy-ori 3-1和人甲状腺癌细胞系FTC-133作为靶细胞。qPCR法检测LncRNA-MIAT、miR-519d-3p、EZH2 mRNA的表达水平差异。RNA荧光原位杂交(FISH)检测LncRNA-MIAT在FTC-133细胞中的定位,Western blot检测EZH2蛋白的表达。荧光素酶报告基因检测LncRNA-MIAT和miR-519d-3p以及miR-519d-3p与EZH2的直接作用。将FTC-133细胞分为6组[空白对照组(control组)、空载体组(Empty vector组)、过表达LncRNA-MIAT组(LncRNA-MIAT组)、miR-519d-3p的抑制剂组(miR-519d-3p inhibitor组)、EZH2的抑制剂EPZ-6438处理组(EPZ-6438组)、miR-519d-3p抑制剂联合过表达LncRNA-MIAT组(LncRNA-MIAT+miR-519d-3p inhibitor组)]。用Edu试剂盒和平板克隆法检测细胞增殖。用流式细胞术检测细胞凋亡。用Transwell细胞迁移和侵袭实验检测细胞的行为。结果:LncRNA-MIAT和EZH2在甲状腺癌组织和细胞中的表达均上调,二者具有正相关性(r=0.466,P<0.05),miR-519d-3p在FTC-133细胞中表达下调(P<0.05)。经过双荧光素酶报告基因实验检测发现miR-519d-3p的靶基因是EZH2,且LncRNA-MIAT靶向抑制miR-519d-3p激活EZH2。与Empty vector组相比,LncRNA-MIAT组和miR-519d-3p inhibitor组的Edu阳性细胞百分比、细胞克隆数、细胞侵袭和迁移数均显著上调(P<0.05),细胞凋亡率均减少(P<0.05)。EZH2的抑制剂EPZ-6438则减少Edu阳性细胞百分比、细胞克隆数、细胞侵袭和迁移数(P<0.05),增加细胞凋亡率(P<0.05)。分别与LncRNA-MIAT组或miR-519d-3p inhibitor组比,LncRNA-MIAT+miR-519d-3p inhibitor组的Edu阳性细胞百分比、细胞克隆数、细胞侵袭和迁移数均显著上调(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05)。结论:甲状腺癌细胞中LncRNA-MIAT通过抑制miR-519d-3p激活EZH2促进甲状腺癌的恶性行为。 展开更多
关键词 甲状腺癌 长链非编码RNA MIAT miR-519d-3p 组蛋白甲基化转移酶2 细胞恶性行为
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miR-519d-3p靶向HIF-1α抑制高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞功能障碍及血管生成 被引量:1
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作者 蔡晖 宋颖 +1 位作者 石华宗 杨豫湘 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期1087-1092,共6页
目的:明确miR-519d-3p对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)功能障碍与血管生成的影响,并阐明其对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的调控机制。方法:通过5、30mmol/L葡萄糖分别诱导HRMEC建立正常(NG)和高糖(HG)细胞模型。将HRMEC分为... 目的:明确miR-519d-3p对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)功能障碍与血管生成的影响,并阐明其对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的调控机制。方法:通过5、30mmol/L葡萄糖分别诱导HRMEC建立正常(NG)和高糖(HG)细胞模型。将HRMEC分为对照组(HG细胞模型转染阴性对照模拟物)、甘露醇组(对照组加入25mmol/L甘露醇)、miR-519d-3p过表达组(HG细胞模型转染miR-519d-3p模拟物)、miR-519d-3p联合HIF-1α过表达组(HG细胞模型共转染miR-519d-3p模拟物和HIF-1α过表达载体)。实时荧光定量PCR法检测各组miR-519d-3p的表达情况。Western blotting法检测各组HIF-1α蛋白的表达情况。荧光素酶报告基因实验检测miR-519d-3p和HIF-1α的结合位点情况。CCK-8法检测各组细胞增殖情况。Hoechst 33342染色法检测各组细胞凋亡情况。ELISA法检测各组细胞外液炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6蛋白的表达情况。小管形成实验检测各组新生毛细血管管腔样结构形成情况。结果:与NG相比,HG细胞模型中miR-519d-3p表达显著减少,而HIF-1α蛋白表达显著增加(均P<0.01)。与对照组比较,miR-519d-3p过表达组中HIF-1α蛋白表达显著降低(P<0.01)。miR-519d-3p中“CGUGAAA”序列可以与HIF-1α3'-非编码区(3'-UTR)中“GCACUUU”序列特异性结合。与对照组比较,miR-519d-3p过表达组细胞24、48、72h吸光度值均显著增加,细胞凋亡率显著减少,细胞外液TNF-α、IL-1β、IL-6浓度均显著减少,新生毛细血管管腔样结构数量显著减少(均P<0.01)。与miR-519d-3p过表达组比较,miR-519d-3p联合HIF-1α过表达组细胞24、48、72h吸光度值均显著减少,细胞凋亡率显著增加,细胞外液TNF-α、IL-1β、IL-6浓度均显著增加,新生毛细血管管腔样结构数量显著增加(均P<0.01)。对照组和甘露醇组中上述各指标比较无差异(均P>0.05)。结论:高糖诱导HRMEC模型中miR-519d-3p表达下调,而HIF-1α蛋白表达上调。HIF-1α是miR-519d-3p的靶基因,miR-519d-3p靶向HIF-1α增加细胞增殖并降低细胞凋亡和炎症反应,从而减轻高糖诱导的HRMEC功能障碍并抑制血管生成。 展开更多
关键词 miR-519d-3p 高糖 人视网膜微血管内皮细胞 功能障碍 低氧诱导因子-1α(HIF-1α)
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枯草芽胞杆菌GB519在水稻植株中的定殖及对稻瘟病田间防效 被引量:3
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作者 祁山颜 朱峰 +6 位作者 王继春 田成丽 王东元 欧玉苹 刘晓梅 李莉 姜兆远 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期48-56,共9页
枯草芽胞杆菌GB519是一株具有广谱抑菌活性的生防菌株。本研究利用绿色荧光蛋白标记的菌株GB519-GFP处理水稻种子、根和叶片,结合激光共聚焦显微镜观察和抗生素平板回收检测的方法,探究其在水稻根茎叶中的定殖动态。结果显示:经GB519-GF... 枯草芽胞杆菌GB519是一株具有广谱抑菌活性的生防菌株。本研究利用绿色荧光蛋白标记的菌株GB519-GFP处理水稻种子、根和叶片,结合激光共聚焦显微镜观察和抗生素平板回收检测的方法,探究其在水稻根茎叶中的定殖动态。结果显示:经GB519-GFP发酵液处理水稻种子、根和叶片后,菌株均可内生定殖于植株的表皮、皮层和维管束中,表明其可在水稻植株内迁移和定殖。GB519-GFP在处理部位的定殖量通常呈现先减少后增多的趋势,非处理部位3~5 d后即可检测到标记菌株。浸种处理,3 d后在幼芽中可检测到标记菌株;20 d后在根中的菌量最多,达5.7×10^(5) cfu/g。灌根处理,1 d后根中菌量为5.4×10^(5) cfu/g;20 d后根、茎和叶中菌量均达到最大值;处理80 d后,根中定殖数量仍达1.9×10^(5) cfu/g。叶面喷施处理,1 d后叶片菌量为4.2×10^(5) cfu/g;20 d后叶片菌量达4.4×10^(5) cfu/g。不同处理方法在各部位的定殖量几乎均在处理20 d后达到峰值。采用叶面喷施GB519对稻瘟病穗颈瘟的田间防效达73.9%,表明叶面喷施GB519能够起到防控稻瘟病的作用。本研究为使用枯草芽胞杆菌GB519防控水稻稻瘟病提供指导。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌GB519 GFP 定殖动态 稻瘟病 防效
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miR-519d-3p通过调控Toll样受体4/核因子-κB信号通路对前列腺癌细胞的影响机制研究 被引量:1
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作者 程耿 张朝阳 +2 位作者 万莉 杨军 周舰 《中国性科学》 2023年第1期39-43,共5页
目的 探讨通过微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)调控Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路对前列腺癌细胞的机制研究。方法 于2021年6月购买前列腺癌细胞株PC3,培养至对数时期,随机分为对照组、下调miR-519d-3p组、上调miR-519d-3... 目的 探讨通过微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)调控Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路对前列腺癌细胞的机制研究。方法 于2021年6月购买前列腺癌细胞株PC3,培养至对数时期,随机分为对照组、下调miR-519d-3p组、上调miR-519d-3p组。采用聚合酶链反应检测miR-519d-3p表达情况,对比干预24h、48h、72h细胞增殖、细胞迁移、侵袭率;检测细胞TLR4/NF-κB信号通路蛋白表达状况。结果 与对照组相比,下调miR-519d-3p组细胞增殖率、细胞侵袭数、迁移数、miR-519d-3p表达量、B淋巴细胞瘤-2基因/Bcl-2相关X基因(Bcl-2/Bax)、TLR4/β-actin、NF-κB/β-actin蛋白表达量上升,细胞凋亡率下降(P<0.05);与下调miR-519d-3p组相比,上调miR-519d-3p组细胞增殖率、细胞侵袭数、迁移数、miR-519d-3p表达量、Bcl-2/Bax、TLR4/β-actin、NF-κB/β-actin蛋白表达量降低,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论 上调miR-519d-3p可抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭,其作用机制可能与TLR4/NF-κB信号通路相关。 展开更多
关键词 微小RNA-519d-3p TLR4/NF-κB信号通路 前列腺癌 细胞凋亡 细胞侵袭
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LncRNA ZFPM2-AS1靶向miR-519e-5p对脊索瘤U-CH1细胞生物学行为的影响 被引量:1
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作者 李轶 王程阳 +3 位作者 刘顺帆 杨贤 高雨焦 马磊 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第2期268-274,共7页
目的:探讨lncRNA ZFPM2-AS1靶向miR-519e-5p对脊索瘤U-CH1细胞生物学行为的影响。方法:体外培养U-CH1细胞,将ZFPM2-AS1的小干扰RNA以及miR-519e-5p的模拟物分别转入U-CH1细胞中,并随机分组:si-NC组、si-ZFPM2-AS1组、miR-NC组、miR-519e... 目的:探讨lncRNA ZFPM2-AS1靶向miR-519e-5p对脊索瘤U-CH1细胞生物学行为的影响。方法:体外培养U-CH1细胞,将ZFPM2-AS1的小干扰RNA以及miR-519e-5p的模拟物分别转入U-CH1细胞中,并随机分组:si-NC组、si-ZFPM2-AS1组、miR-NC组、miR-519e-5p组、si-ZFPM2-AS1+anti-miR-NC组、si-ZFPM2-AS1+anti-miR-519e-5p组;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测U-CH1细胞中lncRNA ZFPM2-AS1与miR-519e-5p表达量;MTT、流式细胞术、划痕实验、Transwell实验分别检测U-CH1细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭;双荧光素酶报告实验检测lncRNA ZFPM2-AS1与miR-519e-5p的靶向调控关系;蛋白印迹(western blotting)法分析蛋白E-cadherin、N-cadherin表达。结果:与si-NC组、miR-NC组比较,si-ZFPM2-AS1组、miR-519e-5p组细胞活力、划痕愈合率、侵袭细胞数及蛋白N-cadherin水平下降,凋亡率、E-cadherin水平增高(P<0.05);lncRNA ZFPM2-AS1可负向调控miR-519e-5p表达;si-ZFPM2-AS1+anti-miR-519e-5p组与si-ZFPM2-AS1+anti-miR-NC组比较,细胞活力、划痕愈合率、侵袭细胞数及蛋白N-cadherin水平增高,凋亡率、E-cadherin水平下降(P<0.05)。结论:下调lncRNA ZFPM2-AS1可促进U-CH1细胞凋亡并阻滞增殖、迁移、侵袭,其机制与上调miR-519e-5p表达有关。 展开更多
关键词 lncRNA ZFPM2-AS1 miR-519e-5p 脊索瘤 细胞增殖 迁移 侵袭
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新型肝癌相关性抗原HCA519及其变异体HCA90的基因克隆和表达 被引量:4
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作者 王歈 韩克军 +1 位作者 屈伟 陈慰峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期46-52,共7页
通过利用肝癌病人体内血清中所含的对肿瘤抗原产生的特异性抗体筛选肝癌组织cDNA表达文库的方法 (SEREX) ,筛选得到了可以诱导肝癌病人抗体免疫应答的两个新抗原HCA5 19基因(GenBankAF14 6 731)及其变异体HCA90基因 (GenBankAF 2 872 6 ... 通过利用肝癌病人体内血清中所含的对肿瘤抗原产生的特异性抗体筛选肝癌组织cDNA表达文库的方法 (SEREX) ,筛选得到了可以诱导肝癌病人抗体免疫应答的两个新抗原HCA5 19基因(GenBankAF14 6 731)及其变异体HCA90基因 (GenBankAF 2 872 6 5 ) .它们定位于染色体 2 0q11 2 ,HCA5 19含 18个外显子 ,HCA90含 19个外显子 .其中HCA90所特有的外显子序列长 10 8bp ,属Alu重复序列片段 ,插入于HCA5 19外显子 10和 11之间 ,原为HCA5 19内含子序列 .该插入片段位于HCA5 19开放阅读框架之内 ,不改变HCA5 19的读码框 ,使HCA5 19编码的 74 7个氨基酸增长至HCA90的 783个氨基酸 .通过Northern杂交和RT PCR分析发现 ,HCA5 19和HCA90基因分别在 9 9例和 6 9例肝癌组织中高表达 ,RT PCR显示 ,它们在正常肝组织和其它正常组织中有极低水平转录本表达 .而这种低表达转录本在Northern杂交中不能被检测到 .HCA5 19蛋白被首次发现在肿瘤病人中能够诱导机体的抗体免疫应答 ,为一个新的肿瘤相关性抗原分子 .其变异体HCA90抗原基因为首次发现的新基因 .其功能可能与细胞的恶性增殖相关 。 展开更多
关键词 肝细胞癌 HCA519 HCA90 SEREX 基因克隆 基因表达
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MiR-519通过调节HuR表达抑制胃癌细胞活力 被引量:2
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作者 周宁 周洋 +1 位作者 唐勇 于文燕 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期19-23,共5页
目的:探讨mi R-519参与调节胃癌细胞活力的机制。方法:q PCR检测胃癌细胞中mi R-519表达,Western印迹法检测胃癌细胞中Hu R蛋白表达,M法研究肿瘤细胞的活力,脂质体转染法分别转染Hu R真核表达质粒及干扰片段、转染mi R-519。结果:胃癌... 目的:探讨mi R-519参与调节胃癌细胞活力的机制。方法:q PCR检测胃癌细胞中mi R-519表达,Western印迹法检测胃癌细胞中Hu R蛋白表达,M法研究肿瘤细胞的活力,脂质体转染法分别转染Hu R真核表达质粒及干扰片段、转染mi R-519。结果:胃癌细胞株中Hu R蛋白表达高于对照组细胞,过表达Hu R可增加细胞活力(P<0.001),干扰Hu R表达后,细胞活力降低(P=0.001);胃癌组织中mi R-519表达低于对照组(P=0.001),过表达mi R-519可抑制Hu R蛋白表达并降低胃癌细胞活力。结论:Mi R-519可能通过下调Hu R蛋白表达而降低胃癌细胞活力。 展开更多
关键词 miR-519 HUR 胃癌
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肿瘤相关抗原基因HCA519在昆虫细胞中的表达和纯化 被引量:4
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作者 王歈 李燕 陈慰峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期50-54,共5页
为进行肿瘤细胞免疫应答的研究及制备肿瘤诊断用抗体 ,利用昆虫细胞表达系统表达了肿瘤相关性抗原HCA5 19的重组蛋白 ,并进行了纯化 .所表达的重组蛋白分子量约 10 0kD ,含 75 5个氨基酸残基 ,在HCA5 19cDNA3′端接入FLAG序列 ,则在重... 为进行肿瘤细胞免疫应答的研究及制备肿瘤诊断用抗体 ,利用昆虫细胞表达系统表达了肿瘤相关性抗原HCA5 19的重组蛋白 ,并进行了纯化 .所表达的重组蛋白分子量约 10 0kD ,含 75 5个氨基酸残基 ,在HCA5 19cDNA3′端接入FLAG序列 ,则在重组蛋白C端接入 1个 8肽的FLAG尾 .利用其特异性抗体可以有效地纯化重组蛋白 .该FLAGTAG不影响整个重组蛋白的免疫反应性 .纯化的重组蛋白与天然蛋白具有相同或相似的免疫反应性 .它可与识别天然蛋白的血清抗体发生同样的阳性反应 .HCA5 19的足量提供 ,可以免疫动物 ,制备抗体 ;可作为抗原 ,分析其诱导肿瘤病人CTL的特异应答 。 展开更多
关键词 HCA519 肿瘤相关性抗原 重组蛋白 免疫反应性 昆虫细胞 表达 纯化
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miR-517a,miR-518b,miR-519a在出生体重异常儿胎盘及母体血清中表达的研究 被引量:3
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作者 韩月 宋薇薇 +3 位作者 郑丹凤 李珍 那全 王丹 《现代妇产科进展》 CSCD 2012年第12期913-916,共4页
目的:检测出生体重异常儿胎盘及母体血清中microRNA517a(miR-517a)、microRNA518b(miR-518b)、microRNA519a(miR-519a)的表达,探讨这三种微RNAs(miR-NAs)对出生体重的影响。方法:选择无妊娠并发症和合并症的足月分娩产妇,按胎儿出生体... 目的:检测出生体重异常儿胎盘及母体血清中microRNA517a(miR-517a)、microRNA518b(miR-518b)、microRNA519a(miR-519a)的表达,探讨这三种微RNAs(miR-NAs)对出生体重的影响。方法:选择无妊娠并发症和合并症的足月分娩产妇,按胎儿出生体重分为:正常出生体重儿组(对照组,15例)、巨大儿组(20例)及小样儿组(15例)。分别收集3组的新鲜胎盘组织及母体血清,用实时荧光定量PCR方法检测3组miRNAs的变化。结果:miR-517a在巨大儿组(3.28±1.04)与小样儿组(3.63±1.45)胎盘中的表达均显著高于对照组(0.29±0.91)(P均<0.05);miR-519a在巨大儿组(4.62±0.44)与小样儿组(5.99±1.06)胎盘中的表达亦均显著高于对照组(2.65±0.57)(P均<0.05);而miR-518b在3组胎盘中的表达无统计学差异(P>0.05)。miR-517a在巨大儿组(2.76±0.44)与小样儿组(3.69±0.79)母体血清中的表达均显著高于对照组(0.14±1.81)(P均<0.05);miR-519a在巨大儿组(1.93±0.76)与小样儿组(0.47±1.17)母体血清中的表达均显著低于对照组(4.56±0.74)(P均<0.05);而miR-518b在三组母体血清中的表达无统计学差异(P>0.05)。结论:miR-517a、miR-519a参与了异常出生体重的调节。 展开更多
关键词 巨大儿 婴儿 低出生体重 微RNAs 胎盘 血清 miR-517a miR-518b miR-519a
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连带债务人追偿权与法定代位权的适用关系——以民法典第519条为分析对象 被引量:42
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作者 谢鸿飞 《东方法学》 CSSCI 北大核心 2020年第4期130-143,共14页
连带债务人的追偿权与法定代位权构成要件相同,后者是否成立及其范围取决于前者。在传统理论上,两者的法律效果存在较大差异,源于前者是债务人固有的权利,后者系法定继受债权而来。两者不应构成竞合关系,由权利人择一适用,而应一体适用... 连带债务人的追偿权与法定代位权构成要件相同,后者是否成立及其范围取决于前者。在传统理论上,两者的法律效果存在较大差异,源于前者是债务人固有的权利,后者系法定继受债权而来。两者不应构成竞合关系,由权利人择一适用,而应一体适用,后者补充和强化前者的效力,这也符合民法典的文义。产生连带之债的合同解除后,在债权人无力履行返还义务时,超过份额履行债务的连带债务人应享有追偿权。债务人追偿和代位时行使的债权均为按份债权,其主张或行使担保权时,应区分对连带债务份额的担保与对整个连带债务的担保。债权人抛弃担保等从权利导致追偿权人无法追偿的,应承担损害赔偿责任。追偿权也应劣后于债权人的债权。法定代位权的范围由追偿权决定,两者的诉讼时效和阻却请求权行使的事由应予统一。 展开更多
关键词 连带债务 追偿权 法定代位权 民法典第519 请求权竞合 法律关系
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枯草芽胞杆菌GB519抗菌蛋白的理化性质及生防效果 被引量:4
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作者 朱峰 王继春 +4 位作者 田成丽 祁山颜 王东元 任金平 王义山 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期778-785,共8页
枯草芽胞杆菌GB519是从土壤中分离对稻瘟病菌具有显著抑菌活性的菌株。为了明确菌株GB519抗菌粗蛋白的理化性质,分析了光照、紫外线、温度、pH和酶(蛋白酶K、胰蛋白酶和胃蛋白酶)对抑菌活性的影响。结果表明,抗菌蛋白对光照、紫外线和3... 枯草芽胞杆菌GB519是从土壤中分离对稻瘟病菌具有显著抑菌活性的菌株。为了明确菌株GB519抗菌粗蛋白的理化性质,分析了光照、紫外线、温度、pH和酶(蛋白酶K、胰蛋白酶和胃蛋白酶)对抑菌活性的影响。结果表明,抗菌蛋白对光照、紫外线和3种酶作用稳定;40℃~100℃处理1 h抑菌活性稳定,121℃处理30 min活性仅降低了7.4%,具有较好的耐高温特性;在pH 2.0~10.0活性稳定,但pH 11.0~12.0活性有所下降,分别降低了14.9%和18.1%。抗菌蛋白对多种植物病原菌具有抑菌作用,其中对茄子菌核病菌的抑菌活性为72.7%。在温室条件下对水稻叶瘟的防效达到80.1%。因此,菌株GB519可作为防控稻瘟病生防潜力菌进行开发。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌GB519 抑菌蛋白 理化性质 水稻稻瘟病
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上调miR-519d对喉鳞癌细胞增殖及凋亡的影响 被引量:3
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作者 沈纳 白广平 +2 位作者 高天乐 黄新生 李俊 《中国临床医学》 2015年第5期582-585,共4页
目的:研究miR-519d对喉鳞癌细胞增殖及凋亡的调控作用。方法:采用RT-PCR、Western印迹等技术检测人喉癌上皮细胞株Hep-2及人支气管上皮细胞(human bronchial epithelium cell,HBE)中信号转导和转录激活子3(signal transducer and a... 目的:研究miR-519d对喉鳞癌细胞增殖及凋亡的调控作用。方法:采用RT-PCR、Western印迹等技术检测人喉癌上皮细胞株Hep-2及人支气管上皮细胞(human bronchial epithelium cell,HBE)中信号转导和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)以及miR-519d的表达情况;通过质粒转染上调Hep-2细胞株中miR-519d的表达后,采用细胞增殖及凋亡检测技术观察转染细胞与对照细胞的增殖及凋亡情况。结果:STAT3 mRNA在Hep-2中的表达明显高于其在HBE细胞中的表达(P〈0.05),而miR-519d在Hep-2中的表达明显低于其在HBE中的表达(P〈0.05)。STAT3在转染miR-519d后的Hep-2细胞中的表达明显下降(P〈0.05)。转染后继续培养0~7 d,转染后Hep-2细胞的增殖率明显低于未转染细胞(P〈0.05)。转染后继续培养24 h,转染miR-519d的细胞凋亡率为(2.80±0.15)%,对照细胞的凋亡率为(0.92±0.09)%(P=0.000 4)。转染后继续培养72 h,转染miR-519d的细胞凋亡率为(23.06±3.52)%,对照细胞的凋亡率为(23.26±2.56)%(P=0.965 5)。结论:STAT3在Hep-2细胞中高表达,而相关的miR-519d呈低表达,通过上调miR-519d可以抑制STAT3的表达从而抑制肿瘤细胞的增殖,促进肿瘤细胞的凋亡。 展开更多
关键词 喉鳞癌 miRNA-519d STAT3 增殖 凋亡
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国审玉米杂交种辽单519的选育及栽培要点 被引量:6
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作者 于惠琳 石清琢 王延波 《辽宁农业科学》 2020年第5期86-88,共3页
辽单519是辽宁省农业科学院玉米研究所以自选系辽3061为母本、辽3062为父本组配而成的玉米杂交种。辽单519两年区域试验平均产量为798.9 kg/667m^2,比对照郑单958增产5.44%,2018年生产试验平均产量为706.4 kg/667m^2,比对照郑单958增产4... 辽单519是辽宁省农业科学院玉米研究所以自选系辽3061为母本、辽3062为父本组配而成的玉米杂交种。辽单519两年区域试验平均产量为798.9 kg/667m^2,比对照郑单958增产5.44%,2018年生产试验平均产量为706.4 kg/667m^2,比对照郑单958增产4.6%。2019年通过农业部国家农作物品种委员会审定。该品种籽粒品质优、高产稳产性好、抗病抗逆性强,适应性广,具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 玉米 辽单519 杂交种 品种选育
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瑞芬太尼通过miR-519d-3p/STAT3对胃癌细胞增殖、凋亡的影响 被引量:6
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作者 孙成成 刘宇 胡旭明 《世界华人消化杂志》 CAS 2019年第16期984-990,共7页
背景研究表明,阿片类药物不仅用于肿瘤手术麻醉及术后镇痛,而且对肿瘤细胞恶性生物学行为具有一定抑制作用.瑞芬太尼作为一种高效阿片受体激动剂,已有报道瑞芬太尼可抑制结肠癌、肝癌、肺腺癌等多种肿瘤细胞增殖、迁移并诱导肿瘤细胞凋... 背景研究表明,阿片类药物不仅用于肿瘤手术麻醉及术后镇痛,而且对肿瘤细胞恶性生物学行为具有一定抑制作用.瑞芬太尼作为一种高效阿片受体激动剂,已有报道瑞芬太尼可抑制结肠癌、肝癌、肺腺癌等多种肿瘤细胞增殖、迁移并诱导肿瘤细胞凋亡.但目前瑞芬太尼对胃癌(gastric cancer, GC)细胞增殖和凋亡的影响及其机制尚不清楚.目的研究瑞芬太尼对GC细胞增殖、凋亡的影响及其潜在作用机制.方法培养人GC SGC7901细胞, MTT实验检测不同浓度瑞芬太尼对细胞增殖的影响.构建过表达miR-519d-3p的GC细胞,另构建抑制表达miR-519d-3p和过表达STAT3的细胞并给于瑞芬太尼处理,分别于培养24h、48h和72h时采用MTT法测定细胞增殖活性,培养48 h时采用流式细胞仪测定细胞凋亡情况, qRTPCR和Westernblot实验分别用于检测细胞中miR-519d-3p和STAT3蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验检验miR-519d-3p是否靶向STAT3.结果瑞芬太尼能够有效抑制GC细胞增殖,诱导细胞凋亡,并促进细胞中miR-519d-3p表达;过表达miR-519d-3p抑制GC细胞增殖并诱导细胞凋亡,而抑制miR-519d-3p表达可逆转瑞芬太尼对GC细胞增殖和凋亡的作用;双荧光素酶报告基因实验证实GC细胞中miR-519d-3p靶向负调控STAT3的活性;过表达STAT3逆转了瑞芬太尼对GC细胞增殖和凋亡的作用.结论瑞芬太尼具有抑制GC细胞增殖并诱导细胞凋亡的作用,其作用机制可能与调控miR-519d-3p/STAT3表达有关. 展开更多
关键词 胃癌 瑞芬太尼 miR-519d-3p STAT3 增殖 凋亡
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