自身抗原SSA/Ro-52kD抗原优势表位分析

探讨自身抗原ＳＳＡ／Ｒｏ－５２ｋＤ的抗原优势表位，为疾病机制的研究提供依据，根据计算机软件进行的蛋白质序列结构分析。采用ＰＣＲ法克隆自身抗原ＳＳＡ／Ｒｏ－５２ｋＤ多肽片段的ｃＤＮＡ，定向插入表达载体ＰＧＥＸ－５Ｘ－１，并且导入大肠杆菌中表达重组融合蛋白，用ＧＳＴ亲和层析柱进行纯化，经免疫印迹法与病人阳性血清进行反应，结果表明片段Ｒｏ５２３具有较强的抗原性。

利用重组抗原检测抗SSA/Ro-52kD自身抗体及其临床意义

目的重组表达 SSA/ Ro- 5 2 k D融合蛋白 ,并用于检测自身抗体。方法应用 DNA重组技术构建 SSA/Ro- 5 2 k D工程菌 ,并表达 SSA/ Ro- 5 2 k D融合蛋白。经谷胱甘肽巯基转移酶 (GST)柱层析纯化后 ,作为抗原 ,分别用免疫印迹法 (IBT)和酶联免疫吸附试验 (EL ISA)检测 2 0份 SS患者血清、6 0份 SL E患者血清和 30份正常人血清。结果重组抗原检测抗 SSA/ Ro- 5 2 k D自身抗体敏感性较高 ,而且抗体滴度与病程相关。结论利用重组抗原对自身抗体进行定性。

SS－A52KD和60KD多肽抗体的研究

ＳＳ－Ａ５２ＫＤ和６０ＫＤ多肽抗体的研究张晓，汤美安，余步云（中山医科大学第三附属医院风湿科，广州５１０６３０）自从认识到多种抗体存在于风湿病中￣［１］以来，人们就开始寻找与某种疾病或某一临床亚型相关的自身抗体，结果发现针对ＳＳ－Ａ的抗体与系统性红斑...

人巨细胞病毒基因工程糖蛋白52kd抗原的临床初步应用

作者在构建人巨细胞病毒(HCMV)糖蛋白52 kd抗原编码区段的表达质粒pHCMV-52基础上,从含该克隆基因的大肠杆菌中分离并纯化其表达产物作为抗原,与已知ELISA-HCMV-IgM为阳性(12例)和阴性(4例)的血清反应,采用辣根过氧化物酶(HRP)标记的马抗人抗体取代同位素检测特异抗原—抗体复合物,两种方法结果一致者10例(10/12)。该临床初步结果显示,基因工程技术制备HCMV抗原可用于HCMV感染的临床诊断,并具有抗原制备方便、产量高、临床实用和易于推广等优点。

自身抗原Ro 52 kd多肽分子cDNA表达克隆的构建及其融合蛋白在大肠杆菌中的表达

采用ＰＣＲ法克隆自身抗原Ｒｏ５２ｋｄ多肽分子的ｃＤＮＡ，定向插入表达载体ＰＧＥＸ－４Ｔ－１，并导入大肠杆菌中表达重组融合蛋白，经免疫印迹法表明，重组融合蛋白具有Ｒｏ５２ｋｄ的抗原性。这为今后对Ｒｏ５２ｋｄ抗原表位的精确定位，分析特定抗原表位与疾病的相关性及制备重组抗原用于临床检测奠定了基础。

胃癌单抗MG5相应抗原的纯化及分析

作者报告鼠抗人胃癌单克隆抗体MG5相应抗原的纯化和初步鉴定。首先收集胃癌患者转移性腹水癌细胞。并制备可溶性抗原提取液。用concanavalin A(Con A)Sepharose 4B亲和层析法分离提取胃癌细胞糖蛋白成份后,再用MG5-Sepharose4B免疫亲和层析法纯化单抗MG5相应抗原。经高碘酸氧化,电泳脂蛋白染色SDS-PAGE和免疫印渍等实验分析,证实MG5相应抗原是一种含3个亚单位的糖蛋白,分子量分别为68kD、52kD和44kD,抗原决定簇存在于糖链上,免疫分析提示MG5相应抗原是一种新的胃癌相关抗原。

聚合酶链反应用于人巨细胞病毒B基因编码区段的体外扩增

作者采用聚合酶链反应(PCR)成功地从含人巨细胞病毒B基因的重组质粒pBH_2DNA中扩增及分离了B基因编码区段及其产物糖蛋白52kd抗原编码区段。0.2μg的模板DNA经过30次循环,目的基因片段的扩增量达到10μg,足以用于酶谱分析及克隆的构建。