人腺病毒55型致青年肺炎的临床特征分析

目的 分析人腺病毒55型(HAdV-55)所致肺炎青年患者的临床特征。方法 通过医院医疗信息系统收集人腺病毒55型(HAdV-55)所致肺炎青年患者的病历资料,采用描述性流行病学方法对资料进行回顾性研究,并分析患者一般情况、临床症状和体征、实验室检查及影像学检查等结果。结果 临床症状以发热、咳嗽、咳痰、咽痛、乏力、畏寒为主,体征主要为咽部充血、呼吸音异常、扁桃体肿大。实验室检查以白细胞计数(WBC)正常、淋巴细胞计数(LYM)降低、C反应蛋白升高、丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)升高、乳酸脱氢酶(LDH)升高为主。影像学检查病变以斑片状实变影及团块样实变影多见,可伴有磨玻璃影。结论 HAdV-55可引起疫情暴发,患者以发热、咳嗽、咽痛为主要症状,影像学以斑片状实变影及团块样实变影多见。

RPA-毛细管电泳检测人腺病毒55型的方法建立及初步应用

目的建立重组酶聚合酶扩增(RPA)技术联合毛细管电泳快速检测人腺病毒55型(HAdV55)的方法及初步应用。方法构建HAdV55-Hexon质粒作为扩增模板,针对HAdV55保守区Hexon基因序列设计RPA特异性引物,对引物筛选和优化,并建立RPA扩增及联合毛细管电泳检测体系,进行了特异性、灵敏度、可靠性评价;对18份临床样本进行RPA毛细管电泳检测。结果构建了含有HAdV55-Hexon全长基因的质粒,获得一对扩增效率最高的RPA引物;HAdV55的RPA毛细管电泳检测体系最低检出限为2.9×10^(3) copies/mL,整个过程30 min即可完成,冠状病毒(HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-HKU1)、甲型乙型流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒标准品提取物用该体系检测时均为阴性,且检测常见的人腺病毒类型(HAdV3、HAdV4、HAdV7、HAdV16、HAdV21)时也均为阴性,可认为对HAdV55有较强的特异性检测;建立的RPA毛细管电泳检测能够有效地检测出临床患者咽拭子中的HAdV55。结论RPA联合毛细管电泳检测HAdV55方法的建立为其临床诊断提供了良好的基础。

小鼠抗人腺病毒55型六邻体(HAdV55 Hexon)蛋白单克隆抗体的制备

目的制备特异性小鼠抗人腺病毒55型六邻体蛋白(HAdV55 Hexon)单克隆抗体(mAb)。方法以化学合成HAdV 55、3、4、7、16、21的Hexon基因为模板,PCR扩增后分别构建原核表达质粒pET28a-HAdV55 Hexon与真核表达质粒pCAGGS-HAdV3、4、7、16、21、55 Hexon;将pET28a-HAdV55 Hexon质粒转化至大肠杆菌(E.coli)感受态细胞BL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,将纯化的包涵体经过变性与复性后利用切向流膜过滤系统获得纯化蛋白;将pCAGGS-HAdV55 Hexon用于拔罐免疫BALB/c小鼠,HAdV55 Hexon蛋白用于加强免疫,通过杂交瘤技术制备抗HAdV55 Hexon的mAb,并进行抗体效价测定、抗体亚类鉴定;对上述抗体利用pCAGGS-HAdV55 Hexon转染HEK293T细胞和BHK细胞分别进行Western blot法和免疫荧光法(IFA)以鉴定其特异性;选择其中效价高的两株抗体,进一步利用pCAGGS-HAdV3、4、7、16、21、55 Hexon转染细胞分别进行Western blot法和IFA做交叉反应性分析。结果成功构建pET28a-HAdV55 Hexon和pCAGGS-HAdV55 Hexon、3、4、7、16、21表达质粒;IPTG诱导pET28a-HAdV55 Hexon转化的BL21细菌,HAdV55 Hexon蛋白主要以包涵体形式表达,经过变性及复性后超滤得到纯化的HAdV55 Hexon蛋白;筛选得到6株可分泌HAdV55 Hexon mAb的杂交瘤细胞株,抗体亚类分析显示2株为IgG2a亚型,4株为IgG2b;获得与HAdV3 Hexon、HAdV4 Hexon、HAdV7 Hexon、HAdV16 Hexon、HAdV21 Hexon无交叉反应性的2株高效价的特异性HAdV55 Hexon抗体。结论获得的特异性小鼠抗HAdV55 Hexon的mAb为建立其抗原检测方法提供了实验基础。

55型人腺病毒致hDSG2转基因小鼠肺感染动物模型的建立及意义

背景55型人腺病毒(human adenovirus type 55,HAdV-B55)可引起呼吸道感染,严重者可发展为病毒性肺炎甚至危及生命。理想的HAdV-B55感染模型对发病机制、药物治疗以及多价疫苗的研制有重要价值。目的建立HAdV-B55人源化受体桥粒芯糖蛋白2(humanized receptor desmoglein-2,hDSG2)转基因小鼠肺感染动物模型。方法雄性hDSG2转基因小鼠、野生型C57BL/6(C57)小鼠各25只,按感染后3 d、5 d、7 d、14 d和PBS对照随机分为5组,每组5只,感染小鼠用HAdV-B55(108 TCID50)滴鼻进行感染,对照组用相同剂量的PBS滴鼻,每日称重并观察小鼠活动情况,分别于感染后3 d、5 d、7 d、14 d取材,对照组滴鼻后14 d取材。测定各组的肺系数、肺组织病理、肺组织内HAdV-B55基因拷贝量、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和γ干扰素表达水平以及血清中IL-6浓度水平。结果hDSG2转基因小鼠感染HAdV-B55病毒后一般状况较C57小鼠恢复慢,体质量增长较慢(P<0.01),且表现出活动减少、蜷缩抱团等急性感染症状;hDSG2转基因小鼠的肺组织病理表现较C57小鼠重,主要为肺泡壁增厚和炎性细胞浸润,同时肺系数增高显著(P<0.05),肺组织内HAdVB55基因拷贝量显著增多(P<0.05),肺组织内IL-6表达水平(P<0.05)与血清中IL-6浓度显著升高(P<0.01)。结论采用经鼻滴入HAdV-B55方法,可以建立hDSG2转基因小鼠肺感染的动物模型,该模型稳定性和持续致病性较好,具有进一步深入研究的价值。

成人腺病毒B组55型重症肺炎11例诊治分析

目的分析成人腺病毒B组55型重症肺炎患者的临床诊治资料,总结其临床特征及诊治方法。方法回顾性分析2013年4—5月本科收治的经病原学确诊的,符合美国感染疾病学会/美国胸科协会2007年关于成人社区获得性肺炎(CAP)重症肺炎诊断标准的11例成人腺病毒B组55型重症肺炎患者的临床诊治资料。结果 11例患者均为男性,年龄15～41岁,平均(28.5±5.3)岁。9例来自河北省保定地区,其中4例来自同一个县,呈一定的人群、地域聚集分布。临床症状重,11例均有高热、咳嗽、咳痰、胸闷,4例出现了精神障碍,4例伴腹泻。11例患者C反应蛋白(CRP)、白介素6(IL-6)、降钙素原(PCT)水平及中性粒细胞分数均升高;10例清蛋白(ALB)降低;10例乳酸脱氢酶(LDH)升高;9例天冬氨酸氨基转移酶(AST)升高;8例丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高;7例肌酸激酶(CK)升高。入院时11例均为Ⅰ型呼吸衰竭,治疗过程中有7例发展为Ⅱ型呼吸衰竭。胸部CT检查示11例均以多肺叶受累的肺实变为主要特征,受累肺叶均多于3叶,其中4例出现空洞,1例出现纵隔气肿、皮下积气。均给予利巴韦林、甲泼尼龙及抗生素等治疗,8例痊愈出院,3例死亡。结论腺病毒B组55型引起的成人重症肺炎临床症状重,除高热、咳嗽等呼吸系统症状外,还伴发腹泻、精神症状等肺外表现。肺部CT以多肺叶受累的肺实变为主要特征,还可出现纵隔、皮下气肿。实验室检查指标中炎性指标升高(CRP、IL-6、PCT及中性粒细胞分数等),ALT、AST、CK、LDH升高,ALB降低。临床工作中发现具有上述特点的患者时需注意进行腺病毒B组55型的相关检查,尽早明确诊断,制定相应的治疗措施,以提高该病的治愈率。

铁牛-55型拖拉机悬挂机构的优化设计

对铁牛 ５５型拖拉机悬挂机构进行运动分析，利用提升杆与下拉杆铰接点建立两个四杆机构的内在联系，为悬挂机构的优化设计提供简捷途径。结果表明：提升杆长度的变化对提升能力影响很小；提升杆与下拉杆的铰接点距下拉杆回转铰链点的合理距离为４７０ ｍ ｍ ，相应的提升能力较原设计提高７．１２％ 。

驻成都某部55型腺病毒疫情流行病学调查分析

目的对驻成都某部55型腺病毒疫情进行流行病学调查分析,为类似疫情防控提供参考。方法设计流行病学调查表,对驻成都某部开展现场调查,描述疫情流行特征;采集患者咽拭子,利用实时荧光定量PCR技术确定病原。结果 2016年1月21日~2月7日累计发现55型腺病毒感染患者38例,实验室检测55型腺病毒阳性4例,无重症和死亡病例。2月3~5日为发病高峰,临床症状以发热(≥37.5℃)、咳嗽、咽痛为主。除1名教员外,其余病例均为2个学兵队学兵,3个人群罹患率没有显著性差异(P>0.05)。结论此次疫情是由一名学兵于原单位感染55型腺病毒后输入营区引起,提示新组训部队要加强卫生防病的组织领导,充分了解各学兵原单位疾病、特别是疫情发生情况,早期要加强疫情的监控与防范,防止疫情在营区发生或传播。

55型腺病毒疫情暴发原因分析及防控对策

腺病毒的传播力一般较强,可以引起季节性流行,4、7型腺病毒常在人群聚集的群体中发生暴发流行。55型腺病毒是11型和14型腺病毒的组合体,现已广泛存在于自然界中,近几年在部队造成了多起暴发疫情。但在同样人群聚集的托幼机构和地方院校却没有暴发疫情的报道。分析其原因和探讨其防控对策,对防控55型腺病毒疫情暴发,将起到事半功倍的作用。

一起人腺病毒55型感染聚集暴发病例的临床特征分析

目的分析一起人腺病毒55型感染聚集暴发病例的临床特征,为疫情防控和临床诊治提供参考。方法收集32例人腺病毒55型感染的住院患者,比较肺炎组与无肺炎组的检验指标;比较治疗前后临床特征、检验指标、胸部CT。应用SPSS 20.0统计软件进行数据分析,呈非正态分布的计量资料采用非参数独立样本Mann-Whitney U检验。结果32例患者均为青年男性,31例(96.9%)以发热起病,平均最高体温38.8±0.8℃,平均热程为2.2天;咳嗽咳痰24例(75.0%),头痛23例(72.0%),咽痛12例(37.5%),咽部充血30例(93.8%),26例(81.3%)扁桃腺肿大伴有白色脓性苔膜和淋巴滤泡增生,出院时症状体征恢复正常。32例胸部CT提示腺病毒肺炎21例(65.6%),11例(34.4%)未见异常,其中1例无肺炎患者持续发热5天转为肺炎。比较入院时21例肺炎组和11例无肺炎组的各项检验指标,只有单核细胞百分比差异有统计学意义(Z=-2.32,P=0.02)。治疗一周32例患者全部退热,16例(50%)无任何症状。出院时22例胸部CT肺部病变范围缩小≥1/2,显效率为100%,其中15例病变全部吸收,治愈率为68.2%。和治疗前相比,治疗一周血白细胞、淋巴细胞绝对值、中性粒细胞绝对值明显升高(P<0.05),血单核细胞绝对值、单核细胞百分比、CRP、血沉(ESR)明显下降(P<0.05)。在治疗第14天检测咽拭子腺病毒DNA阴转率为100%(6/6)。结论腺病毒55型感染主要侵犯呼吸道,肺炎发生率高,传染性强,易聚集发病。临床症状、体征、检验指标和放射影像特点缺乏明显特异性。治疗两周检测咽拭子腺病毒DNA可以转阴。尽早积极开展治疗和实施隔离措施,预后良好。

EQUINOX55型遥感傅里叶变换红外光谱系统的校正

利用遥感傅里叶变换红外发射光谱 ,对红外辐射源的绝对光谱能量分布和热气体浓度进行测量时 ,首先必须对测得的红外辐射源的发射光谱强度进行校正 ,为此 ,需用已知温度的标准绝对黑体对系统进行校正。本文考察了黑体温度对EQUINOX5 5型遥感傅里叶变换红外光谱的响应函数的影响。结果表明 ,仪器响应函数随着温度的升高而增加 ,但当温度比较高时 ,仪器响应函数曲线变化趋小。

一起人腺病毒55型引起的儿童发热暴发疫情病原学鉴定

目的对江西省某地一起儿童不明原因发热暴发疫情的病原进行鉴定。方法采集患儿咽拭子标本,提取样本总核酸,采用TaqMan微流体芯片技术对所有标本进行42种呼吸道病原检测,对检出腺病毒阳性的标本,进行腺病毒六邻体基因(Hexon)片段测序和病毒分离,对分离毒株基因组进行测序,运用CLC Genomics Workbench和Mega7.0等生物学软件对测定序列进行处理分析。结果共采集3例不明原因发热患儿咽拭子标本3份,经TaqMan微流体芯片技术检出3份腺病毒阳性。获得3条长708bp的Hexon基因片段序列,序列之间同源性为100%,序列分析发现其与人腺病毒55型同源性最高;共分离到2株腺病毒命名为2020YQ523、2020YQ524;对病毒分离株2020YQ523进行了腺病毒基因组序列测定,获得长34443bp的基因序列,根据腺病毒全基因序列构建的系统进化树显示该病毒分布在腺病毒55分支。结论该起儿童发热暴发疫情由人腺病毒55型感染引起。

糖皮质激素对人腺病毒55型感染治疗转归的影响

目的探讨糖皮质激素对人腺病毒55型感染治疗转归的影响。方法收集解放军总医院第八医学中心2020年2月3—4日收治的32例人腺病毒55型感染住院患者的临床症状、体征、实验室检查、胸部CT表现等临床资料,根据患者肺部病变范围和日最高体温制定甲泼尼龙分类治疗方案。比较治疗前后患者的临床症状、实验室检查及胸部CT表现。结果32例患者均为青年男性,平均年龄(21.3±2.1)岁;甲泼尼龙使用时间3~10d,平均(6.7±2.3)d,最大使用剂量为80mg(2次/d);治疗6d,32例患者体温均恢复正常。治疗7d,血常规、红细胞沉降率、C反应蛋白和谷丙转氨酶较入院时明显好转(P<0.05)。出院时22例肺部CT病变范围缩小均≥1/2,显效率为100%,其中15例病变全部吸收,治愈率为68.2%。病毒清除时间约为2周。不良反应发生率为6.25%。结论在抗病毒、对症治疗的基础上,早期小剂量短疗程应用糖皮质激素治疗人腺病毒55型感染,疗效明显,不良反应少。

拉萨部队55型腺病毒呼吸道感染暴发疫情调查分析

目的调查和分析驻拉萨部队55型腺病毒感染暴发疫情,为部队卫生防病工作提供参考。方法 2016年1月底,对驻拉萨市8个部队发热病例采集咽拭子标本进行实验室核酸检测,并开展流行病学现场调查。结果共检出55型腺病毒阳性病例89例,1月19-26日为发病高峰,A部队发病人数最多（48例,53.93%）。按照人员类别统计,战士发病数84人,占总发病数的94.38%。病例临床症状主要为咳嗽、咽痛和咳痰。8个单位病例之间无直接联系,此次事件为驻地疫情传入军营引起多点暴发疫情。结论部队应不断提高呼吸道传染病防病能力,同时加强与驻地卫生部门沟通,随时掌握驻地疾病流行情况,制定针对性的防病措施。

腺病毒55型在A549细胞中的增殖动力学特征

目的：利用噬斑法研究人呼吸道腺病毒55型（HAd V-B55）在A549细胞中的增殖动力学特征。方法：以正交法得出HAd V-B55的最佳噬斑条件;HAd V-B55以感染复数（MOI）为10感染A549细胞,噬斑法测定接种后3、6、9、12、15、18、21、24、36、48、60和72 h培养液上清中的病毒滴度,绘制log2（病毒滴度）-时间图,分析HAd V-B55在A549细胞中的增殖动力学特征。结果：终浓度含0.5%琼脂糖、2%胎牛血清和1640（2×）细胞培养液为HAd V-B55噬斑形成的最佳条件;MOI=10时,HAd V-B55感染A549细胞后12～15 h培养液中开始出现病毒,接种后15～36 h培养液中病毒量呈指数大量增加,接种后48～60 h病毒量出现小幅上升,接种后60 h细胞完全病变,病毒量增加达到平台期,最终病毒量增加约225 000倍。结论：A549细胞能有效地扩增HAd V-B55,其增殖周期为12～15 h;为研究HAd V-B55的感染致病机制,以及指导后期抗HAd V-B55的药物研发奠定了基础。

1例常染色体隐性痉挛性截瘫55型的临床特点和C12orf65基因突变分析

该文报道1例常染色体隐性痉挛性截瘫55型患儿的临床特征及C12orf65基因突变特点.患儿女,8岁,5岁起病,以视神经萎缩为主要临床表现,伴有蹲起缓慢和轻度鸭形步态.提取患儿及其父母和哥哥外周血DNA标本,对患儿进行全外显子组和线粒体基因组测序,并进行Sanger测序验证.结果显示患儿C12orf65基因存在c.394C>T和c.447_449delGGAinsGT的复合杂合突变,前者来自父亲,为已知致病突变;后者来自母亲,是一个未见文献报道的新突变.该研究扩展了C12orf65基因突变谱,为患儿病因诊断及该家系的遗传咨询提供了分子依据.

WG—55型挖沟机的研制

介绍了WG - 5 5型挖沟机的研制目标、整机方案论证、主要技术参数、结构。

V55型立式加工中心换刀故障分析与排除

本文介绍了笔者在实践操作V55型立式加工中心过程中,就换刀出现的一些故障,提出了一些排除方法;通过排故,取得较好的加工性能和较高的加工效率。

铁牛—55型拖拉机使用和维护现状的调查和研究

为了了解拖拉机机群使用和修护的基本情况和问题,查明拖拉机零件损坏规律、修理分类、间隔时间、修理方式等。

一起55型腺病毒暴发疫情的流行病学调查

腺病毒在自然界中广泛存在，人体呼吸、消化、泌尿系统和眼部均可感染。呼吸道感染腺病毒可导致急性发热性咽喉炎和肺炎。人腺病毒55型是11型腺病毒和14型腺病毒的重组体．其感染特性和毒力与腺病毒14型比较接近。2012年初，河北某军营发生一起55型腺病毒感染暴发疫隋，现将调查结果报告如下。

腺病毒55型抗原表位分析及评价

目的：筛选腺病毒55型（Ad55）抗原表位，为研制腺病毒免疫诊断试剂提供基础。方法：采用生物信息学方法预测Ad55六邻体、纤突的B细胞抗原表位；利用大肠杆菌优势密码子获得相应基因，插入载体pBVIL-1克隆表达后获得重组Ad55表位抗原；用临床疑似腺病毒呼吸道感染患者血清对重组Ad55表位抗原活性进行检测，用ROC曲线分析重组Ad55抗原的诊断意义；采用ClustalX软件进行多序列比较。结果：Ad55六邻体含有6个主要抗原表位，纤突含有2个主要抗原表位；采用退火延伸法获得上述8种表位基因，片段长度为90～180bp；获得上述8种重组基因工程抗原，相对分子质量为18X10^3-21x10^3；血清学检测的ROC曲线分析显示，270-320、410-460和135-165氨基酸残基抗原表位的AUC面积超过0．75，具有一定的诊断意义（P〈0．05）；序列比较结果显示，上述3种抗原表位与腺病毒11型序列高度同源，与3型存在较大差异。结论：获得了3个Ad55主要抗原，对研制通用性呼吸道传播腺病毒免疫诊断试剂具有一定的意义。