西红花苷对3β,5α,6β-三羟胆甾烷致内皮细胞凋亡和相关基因表达的影响

目的:研究西红花苷(crocin)对3β,5α,6β-三羟胆甾烷(cholestane-3β,5α,6β-triol,Triol)致血管内皮细胞凋亡和相关基因表达的影响。方法:将内皮细胞分成正常对照组、模型组(25μmol/LTriol)、西红花苷(10-6mol/L,10-7mol/L,10-8mol/L)+25μmol/LTriol组。采用诱导内皮细胞凋亡的模型,用比色法测定丙二醛含量。光学显微镜、电子显微镜观察细胞形态和超微结构的变化,电泳法检测DNA梯形条带、流式细胞仪分析法检测细胞凋亡率,逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)法检测Bcl2和BaxmRNA表达,免疫细胞化学方法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达。结果:用Triol处理后,培养液中MDA含量增加(P<0.01vscontrol),细胞收缩,核浓缩,深染,线粒体肿胀空化,出现凋亡小体、DNA梯形条带和亚二倍体峰,细胞凋亡率为30.62%,BaxmRNA、Bax蛋白和Caspase3蛋白表达明显高于正常对照组(P<0.01);Bcl2mRNA和蛋白表达低于正常对照组(P<0.01);西红花苷(10-7mol/L、10-6mol/L)+Triol组,MDA含量减少,内皮细胞形态结构完整,细胞凋亡率分别为24.4%、6.3%,细胞Bax和Caspase3基因表达明显下调,Bcl2基因表达上调(P<0.05orP<0.01vsTriol)。结论:西红花苷可能是通过调节Bcl-2,Bax和Caspase-3基因表达抑制Triol诱导的内皮细胞凋亡。

氧化型胆甾醇对血管内皮细胞的损伤作用

目的 观察氧化型胆甾醇 3 β 5α 6β 三羟胆甾烷 ( 3 triol)对牛主动脉内皮细胞的损伤作用。 方法 用MTT法检测内皮细胞的增殖活性 ,以硫代巴比妥酸 (TBA)法测定内皮细胞丙二醛 (MDA)的生成 ,以流式细胞仪和 3′末端标记DNA降解片段原位检测 (TUNEL)观察内皮细胞的凋亡。结果 3 triol呈时间和剂量依赖性地降低内皮细胞的存活率 ,浓度依赖性增加内皮细胞丙二醛的生成和诱导内皮细胞的凋亡。在相同剂量及相同时间的情况下 ,胆甾醇对内皮细胞无明显的损伤作用。结论 氧化型胆甾醇 3 triol对血管内皮细胞具有明显的损伤作用 ,其作用与其抑制内皮细胞的增殖 ,增加内皮细胞的氧化和诱导内皮细胞的凋亡有关。