荧光标记电泳对透明质酸寡糖片段鉴定的方法建立

近年来,透明质酸寡糖片段(hyaluronan oligosaccharides,o-HA)的生物学活性引起国外学者的重视,因为o-HA具有一定的生物学活性,如参与免疫调节、刺激新生血管形成等.本研究建立一种经济、简便的ANTS(8-氨基奈-1,3,6-三磺酸)荧光标记电泳对透明质酸寡糖片段大小鉴定的新实验方法.实验原理为,ANTS能与糖分子发生还原反应,在反应时提供3个电子和1个荧光基团,通过高浓度PAGE分离,在特定波长下呈现颜色反应.采用酶消化法得到不同分子量大小的o-HA片段,测得不同片段大小的o-HA聚合度,分别与高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)和静电喷雾电离质谱(electrospray ionization mass spectrometry,ESI-MS)进行比较,结果吻合.研究提示,用荧光标记电泳法分析寡糖分子量,操作简单、设备低廉、灵敏度较高且检测速度快,是一种检测鉴定寡糖分子的较好方法.

蛴螬多糖的荧光标记研究

用荧光物质8-氨基-1,3,6奈三磺酸二钠盐(ANTS)对蛴螬活性多糖进行荧光标记,对反应时间、温度、pH值、ANTS浓度进行了单因素考察,采用UV-Vis、Flu、HPGFC等方法对标记结果进行确证。结果表明,蛴螬多糖荧光标记的最佳条件是pH值为5.5,40℃条件下反应20h时反应率最高,其荧光取代度为1.56%。实现了荧光检测器检测或追踪多糖,为多糖的生物机制研究及药代动力学的研究提供一定思路。