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α-1,6岩藻糖基转移酶与甲胎蛋白异质体在原发性肝癌诊断中的应用 被引量:3
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作者 焦扬 吕晓娴 刘冰 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第8期1897-1898,共2页
目的:分析α-1,6岩藻糖基转移酶(FUT8)与甲胎蛋白异质体(AFP-L3)在原发性肝癌(PLC)诊断中的应用价值。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测我院92例PLC患者和42例非原发肝癌(NPLC)患者血清中FUT8和AFP-L3。结果:经统计学分析,... 目的:分析α-1,6岩藻糖基转移酶(FUT8)与甲胎蛋白异质体(AFP-L3)在原发性肝癌(PLC)诊断中的应用价值。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测我院92例PLC患者和42例非原发肝癌(NPLC)患者血清中FUT8和AFP-L3。结果:经统计学分析,PLC组与NPLC组血清FUT8和AFP-L3比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:α-1,6岩藻糖基转移酶(FUT8)与甲胎蛋白异质体(AFP-L3)在原发性肝癌(PLC)诊断中有一定的应用价值。 展开更多
关键词 原发性肝癌(PLC) α-1 6岩藻糖基转移酶(FUT8) 甲胎蛋白异质体(AFP-L3)
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α-1,6岩藻糖基转移酶与肿瘤 被引量:2
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作者 季君 高春芳 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期209-212,共4页
由α-1,6岩藻糖基转移酶(α1,6-fucosyltransferase,Fut8)催化的核心岩藻糖基化是糖蛋白重要的翻译后修饰和功能调控方式,直接影响细胞一系列生物学特性,而这种糖基化的异常改变往往是疾病状态的特点。本文就Fut8的表达调控特征、生物... 由α-1,6岩藻糖基转移酶(α1,6-fucosyltransferase,Fut8)催化的核心岩藻糖基化是糖蛋白重要的翻译后修饰和功能调控方式,直接影响细胞一系列生物学特性,而这种糖基化的异常改变往往是疾病状态的特点。本文就Fut8的表达调控特征、生物学功能及其与各种肿瘤的关系研究进展作一综述。 展开更多
关键词 α-1 6岩藻糖基转移酶 基因 肿瘤
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雌孕激素对SMMC-7721人肝癌细胞α-1,6岩藻糖基转移酶的调控 被引量:1
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作者 耿飞 石必枝 吴兴中 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期161-164,177,共5页
目的 探讨雌孕激素在肝癌细胞中对于α - 1 ,6岩藻糖基转移酶表达的调控。方法 通过对SMMC- 772 1细胞分别按不同时间点和不同浓度给予雌二醇和孕酮处理 ,观察细胞生长状态和形态学的改变 ,并进行半定量逆转录 -聚合酶链式反应和小扁... 目的 探讨雌孕激素在肝癌细胞中对于α - 1 ,6岩藻糖基转移酶表达的调控。方法 通过对SMMC- 772 1细胞分别按不同时间点和不同浓度给予雌二醇和孕酮处理 ,观察细胞生长状态和形态学的改变 ,并进行半定量逆转录 -聚合酶链式反应和小扁豆凝集素 (LCA)印迹分析以检测α - 1 ,6岩藻糖基转移酶基因 (FUT8)转录水平和底物蛋白核心岩藻糖基化水平的改变。结果 雌激素能明显上调FUT8基因的转录 ,并显著提高Mr 为1 35× 1 0 3 、1 0 0× 1 0 3 和 6 0× 1 0 3 LCA反应阳性的糖蛋白的表达水平 ,同时改善了细胞的生长状态 ;而孕激素则可以明显下调FUT8基因的转录 ,并显著降低Mr 为 1 35× 1 0 3 、1 1 5× 1 0 3 、1 0 0× 1 0 3 和 6 0× 1 0 3 的LCA反应阳性的糖蛋白的表达水平 ,同时改变了细胞的正常形态。结论 雌孕激素能通过调节α - 1 ,6岩藻糖基转移酶的表达 ,改变靶蛋白的核心岩藻糖基化修饰 ,从而参与肿瘤的发生发展过程。 展开更多
关键词 岩藻糖基转移酶 雌孕激素 人肝癌细胞 SMMC-7721细胞 调控 聚合酶链式反应 细胞生长状态 小扁豆凝集素 转移酶基因 不同浓度 不同时间 印迹分析 转录水平 发生发展 糖基化 蛋白 酶表达 雌二醇 形态学 逆转录 半定量 雌激素 LCA 蛋白 Mr 阳性
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蛋白-O-岩藻糖基转移酶1在结直肠癌中的表达及临床意义
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作者 张年凤 王若皎 +3 位作者 徐容 张金宁 郭琼 黄河 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2020年第5期441-445,440,共6页
目的观察蛋白-O-岩藻糖基转移酶1(protein O-fucosyltransferase 1,POFUT1)在结直肠癌中的表达情况,研究其在结直肠癌早期诊断中的意义。方法通过Oncomine与UALCAN数据库获取TCGA及非TCGA库中POFUT1的基因表达量数据,分析POFUT1在癌症... 目的观察蛋白-O-岩藻糖基转移酶1(protein O-fucosyltransferase 1,POFUT1)在结直肠癌中的表达情况,研究其在结直肠癌早期诊断中的意义。方法通过Oncomine与UALCAN数据库获取TCGA及非TCGA库中POFUT1的基因表达量数据,分析POFUT1在癌症中的表达情况;通过免疫组织化学技术(IHC)检测结直肠癌组织及其对应的癌旁组织与远癌组织中POFUT1的表达情况。结果数据库资料分析结果表明,POFUT1在多种癌症组织尤其是结直肠癌组织中高表达;IHC结果显示,结直肠癌组织中POFUT1的阳性表达率明显高于其对应的癌旁组织与远癌组织。结论POFUT1可能成为结直肠癌早期诊断的新型分子标志物之一。 展开更多
关键词 结直肠癌 蛋白-O-岩藻糖基转移酶1 诊断
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人α1,3-岩藻糖基转移酶IV荧光真核表达载体的构建及鉴定 被引量:4
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作者 杨雪松 贾爽 +1 位作者 张震波 燕秋 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第10期1064-1068,共5页
目的:构建并鉴定绿色荧光蛋白为报告基因的pEGFP-N1-FUT4真核表达载体.方法:采用RT-PCR方法获得α1,3-岩藻糖基转移酶IV(FUT4)全长基因,克隆至pEGFP-N1-FUT4表达载体并进行鉴定.通过脂质体转染到人表皮癌细胞系A431中,荧光显微镜下观察... 目的:构建并鉴定绿色荧光蛋白为报告基因的pEGFP-N1-FUT4真核表达载体.方法:采用RT-PCR方法获得α1,3-岩藻糖基转移酶IV(FUT4)全长基因,克隆至pEGFP-N1-FUT4表达载体并进行鉴定.通过脂质体转染到人表皮癌细胞系A431中,荧光显微镜下观察并经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测FUT4的表达.结果:测序及酶切鉴定证明获得人全长FUT4基因,FUT4基因正确插入pEGFP-N1中,在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白在A431细胞中的表达,RT-PCR和Western blot检测结果显示FUT4的表达明显增加.结论:成功构建绿色荧光蛋白为报告基因的FUT4真核表达载体,并检测到在A431细胞中的表达. 展开更多
关键词 α1 3-岩藻糖基转移酶 绿色荧光蛋白 基因克隆 基因表达 逆转录-聚合酶链反应
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人α1,3-岩藻糖基转移酶VII荧光真核表达载体的构建及鉴定 被引量:2
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作者 张媛媛 王忠山 +1 位作者 刘帅 燕秋 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期727-730,744,共5页
目的:构建并鉴定绿色荧光蛋白为报告基因的pIRES2-EGFP-FUT7真核表达载体。方法:采用RT-PCR方法获得α1,3-岩藻糖基转移酶VII(FUT7)全长基因,克隆至pMD18-TSimple载体后,将FUT7亚克隆至pIRES2-EGFP表达载体并进行鉴定。通过脂质体转染... 目的:构建并鉴定绿色荧光蛋白为报告基因的pIRES2-EGFP-FUT7真核表达载体。方法:采用RT-PCR方法获得α1,3-岩藻糖基转移酶VII(FUT7)全长基因,克隆至pMD18-TSimple载体后,将FUT7亚克隆至pIRES2-EGFP表达载体并进行鉴定。通过脂质体转染到子宫内膜RL95-2细胞中,荧光显微镜下观察并经RT-PCR检测FUT7的表达。结果:测序及酶切鉴定证明获得人全长FUT7基因,FUT7基因正确插入pIRES2-EGFP中,在荧光显微镜下观察到了绿色荧光蛋白在RL95-2细胞中的表达,半定量RT-PCR检测结果显示FUT7的表达明显增加。结论:成功构建了绿色荧光蛋白为报告基因的FUT7真核表达载体,并检测到在RL95-2细胞中的表达,为研究FUT7及其合成的糖抗原sLex在胚胎着床中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 α1 3-岩藻糖基转移酶Ⅶ(FUT7) 绿色荧光蛋白 基因克隆 基因表达
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基于FAK-F-actin通路探讨岩藻糖基转移酶8对泡沫细胞运动能力的影响 被引量:2
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作者 陈林木 黄云秀 +1 位作者 李运景 郭军 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2021年第4期301-306,共6页
目的探讨岩藻糖基转移酶8(Fut8)表达下调对泡沫细胞运动能力的影响及机制。方法建立泡沫细胞模型,检测Fut8表达的改变,并明确其与泡沫细胞运动能力之间的直接联系。检测Fut8过表达对细胞内纤维型肌动蛋白(F-actin)形成的影响及其上游分... 目的探讨岩藻糖基转移酶8(Fut8)表达下调对泡沫细胞运动能力的影响及机制。方法建立泡沫细胞模型,检测Fut8表达的改变,并明确其与泡沫细胞运动能力之间的直接联系。检测Fut8过表达对细胞内纤维型肌动蛋白(F-actin)形成的影响及其上游分子局部黏着斑激酶(FAK)的活化情况。结果泡沫细胞形成过程中,Fut8的表达明显下调,而过表达Fut8能修复泡沫细胞受损的运动能力。F-actin的表达随着泡沫细胞运动能力下降而明显下调,且受到Fut8的调节。FAK的磷酸化在Fut8表达下调时受到明显抑制,过表达Fut8能导致FAK的磷酸化明显增强。结论Fut8-FAK-F-actin通路受到抑制可能是泡沫细胞运动能力减弱的原因之一。 展开更多
关键词 泡沫细胞 岩藻糖基转移酶8 局部黏着斑激酶 纤维型肌动蛋白 细胞运动能力
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肝素修饰酶6-O-磺基转移酶的高产量表达
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作者 杨灵康 陈卓 郭盈希 《安徽农业科学》 CAS 2022年第5期81-84,共4页
在化学酶法合成肝素过程中,肝素修饰酶6-O-磺基转移酶(6-OST)在肝素分子中N-乙酰基葡糖胺的C6羟基上进行硫酸化,以达到与肝素相似的硫酸化水平。构建的重组蛋白MBP-6-OST-3的纯化结果表明有较多杂蛋白条带,且蛋白浓度较低。利用定点突... 在化学酶法合成肝素过程中,肝素修饰酶6-O-磺基转移酶(6-OST)在肝素分子中N-乙酰基葡糖胺的C6羟基上进行硫酸化,以达到与肝素相似的硫酸化水平。构建的重组蛋白MBP-6-OST-3的纯化结果表明有较多杂蛋白条带,且蛋白浓度较低。利用定点突变原理设计引物,通过PCR扩增得到突变质粒pMAL-c2X-6-OST-3-linker-His。将突变质粒转化至大肠杆菌Rosetta-gamiB(DE3),实现了MBP-6-OST-3-His蛋白的表达。利用镍柱亲和层析系统将MBP-6-OST-3-His蛋白纯化,并通过SDS-PAGE电泳分析蛋白表达情况。该研究获得了具有高表达、高纯度的MBP-6-OST-3-His蛋白,这为获得高纯度的6-OST-3提供了可靠的方法以及为其应用于化学酶法合成肝素的研究提供了理论基础。 展开更多
关键词 肝素 6-O-磺基转移酶 定点突变 大肠杆菌 蛋白表达
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PARP1通过调控N-糖基转移酶FUT8影响胃癌AGS细胞的增殖与5-FU耐药 被引量:3
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作者 王晶 王宏浩 +2 位作者 向田 任文镇 刘杲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期410-418,共9页
目的:探讨聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1(PARP1)对胃癌AGS细胞的增殖和5-FU耐药性的影响及其可能的机制。方法:收集2018年5月至2019年12月于恩施土家族苗族自治州中心医院就诊的72例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,采用qPCR和免疫组化法检测... 目的:探讨聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1(PARP1)对胃癌AGS细胞的增殖和5-FU耐药性的影响及其可能的机制。方法:收集2018年5月至2019年12月于恩施土家族苗族自治州中心医院就诊的72例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,采用qPCR和免疫组化法检测胃癌和癌旁组织中PARP1的表达状况。CCK-8法、流式细胞术和集落形成实验分别检测PARP1抑制剂AG14361对胃癌AGS细胞增殖、凋亡和集落形成的影响,MTT法检测AG14361对胃癌细胞5-FU敏感性的影响。mRNA测序分析AG14361处理AGS细胞后差异基因整体分布情况,KEGG富集分析相关信号通路。向AGS细胞转染siFUT8以敲减FUT8基因的表达,qPCR和WB法检测AGS细胞内α-1,6-岩藻糖基转移酶(FUT8)的表达状况和敲减FUT8效果,CCK-8法、流式细胞术和集落形成实验分别检测AG14361处理对敲减FUT8表达的AGS细胞增殖、凋亡和集落形成的影响。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中PARP1呈高表达(P<0.001)。AG14361处理可显著抑制AGS细胞的增殖和细胞集落形成,促进AGS细胞凋亡(均P<0.01)。AG14361处理可降低5-FU杀伤胃癌细胞的IC_(50),且在AGS细胞中尤为明显,IC50下降超过60%。m RNA测序结果显示,N-糖基化修饰中FUT8是AG14361抑制AGS细胞增殖的关键糖基转移酶(P<0.05)。与siNC组相比,IC_(50)浓度的AG14361可显著逆转干扰FUT8对AGS细胞增殖的增加,促进细胞凋亡和BAX蛋白表达、抑制Bcl2蛋白表达,抑制FUT8干扰所致AGS细胞集落的增加(均P<0.01)。结论:PARP1可通过调控N-糖基转移酶FUT8促进胃癌细胞恶性转化,其抑制剂AG14361可增强胃癌细胞对5-FU的敏感性,PARP1可能成为胃癌治疗的一个潜在靶标。 展开更多
关键词 胃癌 AGS细胞 多ADP核糖聚合酶1 α-1 6-岩藻糖基转移酶8 增殖 5-FU 耐药
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血浆HS6ST2蛋白表达水平在肝癌诊断中的价值
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作者 崔艳霞 张丽君 杨玉秀 《河南医学研究》 CAS 2017年第20期3652-3656,共5页
目的研究肝细胞肝癌患者血浆中硫酸乙酰肝素6-O位硫酸基转移酶2(Heparan sulfate O-glucosaminyl 6-O-sulfotransferase-2,HS6ST2)蛋白的表达水平,评估其对肝癌的诊断价值。方法收集62例肝细胞肝癌、28例肝硬化及49名健康对照者的血浆,... 目的研究肝细胞肝癌患者血浆中硫酸乙酰肝素6-O位硫酸基转移酶2(Heparan sulfate O-glucosaminyl 6-O-sulfotransferase-2,HS6ST2)蛋白的表达水平,评估其对肝癌的诊断价值。方法收集62例肝细胞肝癌、28例肝硬化及49名健康对照者的血浆,应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测HS6ST2及甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)的蛋白表达水平。结果 HS6ST2蛋白在肝细胞肝癌患者血浆中的蛋白浓度中位数为37.46 ng/ml(1.69~65.32 ng/ml),显著高于肝硬化组的4.35 ng/ml(0.38~26.58 ng/ml),健康对照组的3.52 ng/ml(1.16~5.61 ng/ml),差异有统计学意义(P<0.05)。HS6ST2蛋白表达与年龄、性别、肿瘤大小无关(P>0.05),与肝癌TNM分期及HBV病毒感染情况呈明显相关(P<0.01)。联合HS6ST2蛋白与AFP诊断的敏感度为87.4%,高于HS6ST2(74.2%)或AFP(69.4%)单独诊断时的敏感度。结论 HS6ST2蛋白很可能成为肝癌诊断的一个新的血清学生物指标,HS6ST2蛋白和AFP联合诊断可提高肝癌的诊断敏感度。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 硫酸乙酰肝素6-O位硫酸基转移酶2 甲胎蛋白 酶联免疫吸附检测
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免疫球蛋白A肾病患者血清FUT8水平与肾小管间质损伤相关性分析
11
作者 姜欣佐 宋国良 田雪山 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第7期809-812,817,共5页
目的探讨免疫球蛋白A肾病(IgAN)患者血清α1-6-岩藻糖基转移酶(FUT8)水平与肾小管间质损伤的关系。方法选取2020年3月至2022年12月佳木斯大学宏大医院收治的89例IgAN患者作为IgAN组和63例性别和年龄匹配的健康志愿者作为对照组。根据小... 目的探讨免疫球蛋白A肾病(IgAN)患者血清α1-6-岩藻糖基转移酶(FUT8)水平与肾小管间质损伤的关系。方法选取2020年3月至2022年12月佳木斯大学宏大医院收治的89例IgAN患者作为IgAN组和63例性别和年龄匹配的健康志愿者作为对照组。根据小管萎缩及间质纤维化(T)分级将IgAN组患者分为T0组(28例)、T1组(39例)、T2组(22例),根据间质性炎症指数(Inf I)将患者分为轻度组(0~1分,30例)、中度组(2~3分,42例)、重度组(4分,17例)。检测各组血清FUT8水平,并分析血清FUT8水平与IgAN临床参数、T分级、Inf I的相关性。结果IgAN组收缩压、血肌酐、尿素氮、FUT8水平高于对照组(P<0.05),血清白蛋白和估算肾小球滤过率(eGFR)低于对照组(P<0.05)。不同T分级、间质性炎症细胞浸润程度IgAN患者血清FUT8水平比较差异有统计学意义(P<0.05),T2组血清FUT8水平高于T1组和T0组(P<0.05),重度组血清FUT8水平高于中度组、轻度组(P<0.05)。IgAN患者血清FUT8水平与血肌酐、T分级、Inf I呈正相关(P<0.05),与eGFR呈负相关(P<0.05)。结论IgAN患者血清FUT8水平升高,且与肾小管间质损伤加重、肾功能下降有关。 展开更多
关键词 免疫球蛋白A肾病 肾小管间质损伤 α1-6-岩藻糖基转移酶 炎症 肾间质纤维化
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岩藻糖相关指标联合检测在原发性肝癌诊断中的应用价值 被引量:2
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作者 焦扬 吕晓娴 刘冰 《山东医药》 CAS 2013年第32期16-17,共2页
目的探讨联合检测α-1,6岩藻糖基转移酶(FUT8)、岩藻糖基化的甲胎蛋白(AFP-L3)和α-L-岩藻糖苷酶(AFU)在原发性肝癌(PLC)诊断中的应用价值。方法选择92例PLC患者(PLC组)和42例非原发性肝癌患者(NPLC组),采用ELISA法检测血清FUT8和AFP-L3... 目的探讨联合检测α-1,6岩藻糖基转移酶(FUT8)、岩藻糖基化的甲胎蛋白(AFP-L3)和α-L-岩藻糖苷酶(AFU)在原发性肝癌(PLC)诊断中的应用价值。方法选择92例PLC患者(PLC组)和42例非原发性肝癌患者(NPLC组),采用ELISA法检测血清FUT8和AFP-L3,采用电化学发光法检测血清AFU。结果 PLC组血清FUT8阳性62例(67%)、AFP-L3阳性69例(75%)、AFU阳性65例(71%),NPLC组分别为1例(2%)、3例(7%)、5例(12%);两组比较,P均<0.05。FUT8诊断PLC的敏感性为67.39%、特异性为76.87%、准确性为91.04%,AFP-L3分别为75.00%、92.86%、80.60%,AFU分别为70.65%、88.10%、76.12%,三者联合检测分别为91.30%、90.48%、97.61%,三者联合检测诊断PLC的敏感性、准确性与单项检测比较,P均<0.05。结论血清FUT8、AFP-L3和AFU联合检测有助于PLC的诊断。 展开更多
关键词 原发性肝癌 α-1 6岩藻糖基转移酶 甲胎蛋白异质体 Α-L-岩藻糖苷酶
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乳腺癌中α-1,6岩藻糖基转移酶表达的相关性研究及其临床意义
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作者 邓小元 吴良平 +1 位作者 闵闽 刘建军 《热带医学杂志》 CAS 2013年第8期964-966,共3页
目的探讨乳腺癌组织中α-1,6岩藻糖基转移酶mRNA和蛋白的表达水平及其临床意义。方法应用蛋白免疫印迹法、实时荧光定量PCR法检测40例乳腺癌患者术后的癌组织、癌旁组织以及40名健康者的正常乳腺组织中α-1,6岩藻糖基转移酶在的表达情况... 目的探讨乳腺癌组织中α-1,6岩藻糖基转移酶mRNA和蛋白的表达水平及其临床意义。方法应用蛋白免疫印迹法、实时荧光定量PCR法检测40例乳腺癌患者术后的癌组织、癌旁组织以及40名健康者的正常乳腺组织中α-1,6岩藻糖基转移酶在的表达情况,并分析其与乳腺癌之间的关系。结果 FUT8 mRNA和蛋白在乳腺癌组织中的表达水平高于癌旁组织和正常乳腺组织,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ期乳腺癌组织中FUT8蛋白表达水平明显高于Ⅰ-Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.001);有淋巴结转移的乳腺癌组织中FUT8蛋白表达水平明显高于无淋巴结转移组,差异有统计学意义(P<0.001)。结论高FUT8蛋白的表达与乳腺癌密切相关,其可能的调控机制及生物学效应有待进一步研究。 展开更多
关键词 α-1 6岩藻糖基转移酶蛋白 乳腺癌 信使核糖核酸
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人RS21-C6基因的克隆及其原核表达
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作者 张君 李燕 +1 位作者 田甜 陈慰峰 《自然科学进展(国家重点实验室通讯)》 北大核心 2001年第10期1110-1114,共5页
从小鼠胸腺细胞克隆的新基因RS21-C6的cDNA 648 bp与人表达序列标签(EST)数据库进行同源性比较,得到71个EST片段,通过EST拼接获得一致性序列,经设计引物,并采用RT-PCR方法,从人新生儿脐带血单个核细胞、肝脏、淋巴结及Jurkat细胞系 cDN... 从小鼠胸腺细胞克隆的新基因RS21-C6的cDNA 648 bp与人表达序列标签(EST)数据库进行同源性比较,得到71个EST片段,通过EST拼接获得一致性序列,经设计引物,并采用RT-PCR方法,从人新生儿脐带血单个核细胞、肝脏、淋巴结及Jurkat细胞系 cDNA中扩增出一700bp的片段,利用快速扩增cDNA末端(RACE)方法,扩增其5′和3′端序列,得到此基因的全长序列(1118 bp),其中包含一个513 bp的开放阅读框,编码170个氨基酸,该基因在核酸水平与小鼠基因的同源性为83%,其演绎蛋白水平的一致性为75%,相似性为83%。此基因的GenBank登录号为AF210430。此外,已成功表达此基因的谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-RS21-C6融合蛋白,其表达量占总菌体蛋白的32.5%。 展开更多
关键词 RS21-C6基因 基因克隆 原核表达 谷胱甘肽巯基转移酶 融合蛋白 编码蛋白
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拟南芥ABA受体与UGT71B6的相互作用研究 被引量:3
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作者 樊晶 马燕林 +2 位作者 曹婧 陈乔乔 杨毅 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期333-337,共5页
为进一步分析ABA尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶UGT71B6参与植物抗逆反应的具体机制,本研究通过体外酵母双杂交实验与GST-Pull down实验、体内双分子荧光互补实验(BIFC)分析了ABA受体RCARs与UGT71B6之间的相互作用关系.实验结果显示ABA受体RC... 为进一步分析ABA尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶UGT71B6参与植物抗逆反应的具体机制,本研究通过体外酵母双杂交实验与GST-Pull down实验、体内双分子荧光互补实验(BIFC)分析了ABA受体RCARs与UGT71B6之间的相互作用关系.实验结果显示ABA受体RCAR12、RCAR13与UGT71B6,在体内、体外均存在直接的相互作用.研究表明UGT71B6的生理功能与ABA受体之间存在重要联系, UGT71B6可能通过ABA受体的介导参与了植物逆境应答反应.实验结果也为初步探究ABA受体是否参与ABA稳态调节过程提供一定参考. 展开更多
关键词 脱落酸稳态调节 尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶71B6 脱落酸受体 蛋白质相互作用
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末端岩藻糖基化抑制剂对环孢素诱导的肾脏上皮-间充质转化的影响及其机制 被引量:1
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作者 毛凯锋 罗嘉亮 +2 位作者 林芬望 左大明 叶俊生 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期626-633,共8页
目的 探讨末端岩藻糖基化抑制剂2-脱氧-D-半乳糖(2-D-gal)对环孢素(CsA)诱导的肾脏上皮-间充质转化(EMT)的影响及其机制。方法 将15只8~10周的雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(Ctrl组)、CsA组和CsA+2-D-gal组,每组各5只。通过蛋白质印迹... 目的 探讨末端岩藻糖基化抑制剂2-脱氧-D-半乳糖(2-D-gal)对环孢素(CsA)诱导的肾脏上皮-间充质转化(EMT)的影响及其机制。方法 将15只8~10周的雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(Ctrl组)、CsA组和CsA+2-D-gal组,每组各5只。通过蛋白质印迹法检测Ctrl组和CsA组小鼠肾脏组织岩藻糖基转移酶1(FUT1)和EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,免疫荧光法检测Ctrl组和CsA组小鼠肾脏组织末端岩藻糖的表达,Masson染色检测各组小鼠肾脏组织纤维化情况,并检测各组小鼠血尿素氮和血清肌酐水平。体外建立CsA诱导肾小管上皮HK2细胞EMT模型,分别用0、2.5、5.0和10.0μmol/L的CsA刺激HK2细胞24 h,另将HK2细胞分为Ctrl组、2-D-gal组、CsA组和CsA+2-D-gal组,观察不同浓度CsA刺激后及各组HK2细胞形态,通过蛋白质印迹法检测不同浓度CsA刺激后及各组HK2细胞FUT1、E-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达,免疫荧光法检测Ctrl组和CsA组HK2细胞末端岩藻糖的表达。结果 与Ctrl组比较,CsA组小鼠肾脏组织E-cadherin的蛋白相对表达量下降,FUT1、Vimentin和α-SMA蛋白相对表达量均升高(均为P<0.05),小鼠肾脏组织末端岩藻糖表达增多。与Ctrl组比较,CsA组和CsA+2-Dgal组小鼠的血尿素氮和血清肌酐水平均升高,与CsA组比较,CsA+2-D-gal组小鼠的血尿素氮和血清肌酐水平均降低(均为P<0.05)。与Ctrl组比较,CsA组和CsA+2-D-gal组小鼠肾脏组织胶原纤维沉积均增多,α-SMA蛋白相对表达量均升高;与CsA组比较,CsA+2-D-gal组小鼠肾脏组织胶原纤维沉积减少,α-SMA蛋白相对表达量下降(均为P<0.05)。随着CsA的浓度增加,HK2细胞的形态由正常的鹅卵石样逐渐变长变细,HK2细胞FUT1、Vimentin和α-SMA蛋白相对表达量升高,E-cadherin蛋白相对表达量下降,呈浓度依赖性。与Ctrl组比较,CsA组HK2细胞末端岩藻糖表达增多。CsA处理的基础上联合2-D-gal干预后,CsA+2-D-gal组的HK2细胞形态恢复到与正常HK2细胞形态相似。与CsA组比较,CsA+2-D-gal组的HK2细胞E-cadherin蛋白相对表达量升高,Vimentin和α-SMA蛋白相对表达量均下降(均为P<0.05)。结论 CsA在体内和体外均可诱导EMT发生,并且伴有末端岩藻糖基化水平增加。2-D-gal可以通过抑制末端岩藻糖基化来抑制CsA诱导的EMT。 展开更多
关键词 2-脱氧-D-半乳糖 环孢素 肾毒性 上皮-间充质转化(EMT) 肾脏纤维化 岩藻糖基转移酶1(FUT1) 末端岩藻糖 α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)
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N-乙酰葡萄糖胺-6-转磺酶(CHST2)和岩藻糖基转移酶7(FucT-VII)在输卵管上皮的表达与输卵管妊娠的关系
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作者 苏敏君 席晓薇 +4 位作者 张佳荣 李双弟 孙云燕 严沁 平花 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期971-975,共5页
目的:探讨输卵管上皮内N-乙酰葡萄糖胺-6-转磺酶(CHST2)和岩藻糖基转移酶7(Fuc T-VII)表达与输卵管妊娠发生的关系。方法:采用免疫组织化学和实时荧光定量PCR(RTPCR)的方法,检测输卵管妊娠患者的输卵管胚囊着床部位组织(EP-2组,n=23),... 目的:探讨输卵管上皮内N-乙酰葡萄糖胺-6-转磺酶(CHST2)和岩藻糖基转移酶7(Fuc T-VII)表达与输卵管妊娠发生的关系。方法:采用免疫组织化学和实时荧光定量PCR(RTPCR)的方法,检测输卵管妊娠患者的输卵管胚囊着床部位组织(EP-2组,n=23),输卵管胚囊着床旁部位组织(EP-1组,n=23),正常输卵管组织(CT组,n=16)的CHST2和Fuc T-VII的表达情况。结果:免疫组织化学法检测到输卵管妊娠胚囊着床部位CHST2和Fuc T-VII表达明显上调,与正常组相比差异有显著统计学意义(P<0.05)。RT-PCR方法检测CHST2 m RNA和Fuc T-VII m RNA在输卵管妊娠胚囊着床部表达水平高于正常组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。结论:L-选择素与其配体相结合的机制可能参与了输卵管妊娠的发生。 展开更多
关键词 输卵管妊娠 N-乙酰葡萄糖胺-6 转磺酶(CHST2) 岩藻糖基转移酶7(FucT—VII) L-选择素配体
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蛋白-O-岩藻糖基转移酶1基因CfPOFUT1在果生炭疽菌中的功能分析
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作者 朱俊子 黎萍 +2 位作者 邱泽澜 李晓刚 钟杰 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3801-3812,共12页
【目的】蛋白-O-岩藻糖基转移酶1(protein O-fucosyltransferase 1,POFUT1)是催化蛋白质O-岩藻糖基化的关键酶,在动物和人体内被证明调控一系列的生理病理过程,然而POFUT1基因在果生炭疽菌乃至真菌中还未见报道。本研究旨在克隆果生炭... 【目的】蛋白-O-岩藻糖基转移酶1(protein O-fucosyltransferase 1,POFUT1)是催化蛋白质O-岩藻糖基化的关键酶,在动物和人体内被证明调控一系列的生理病理过程,然而POFUT1基因在果生炭疽菌乃至真菌中还未见报道。本研究旨在克隆果生炭疽菌中CfPOFUT1基因,并分析其生物学功能。【方法】利用RT-PCR技术扩增CfPOFUT1的基因并进行生物信息学分析,构建了CfPOFUT1基因的沉默和过表达载体,通过PEG介导法将载体导入原生质体中获得CfPOFUT1基因的沉默和过表达突变体。测定了野生型菌株、CfPOFUT1沉默菌株和过表达菌株在PDA上的菌丝生长、分生孢子产生、萌发与附着胞形成、胁迫应答和致病力、杀菌剂敏感性等生物学表型。【结果】与野生型菌株相比,基因过表达突变体产孢量显著增加,致病力增强,对嘧菌酯敏感性降低,但对多菌灵和咪鲜胺敏感性增强。基因沉默突变体产孢量减少,细胞壁完整性、内质网应激敏感性提高,致病力减弱,对嘧菌酯敏感性提高,但对多菌灵和咪鲜胺敏感性降低。【结论】CfPOFUT1基因参与调控果生炭疽菌分生孢子产量,细胞壁完整性、内质网对应激和药剂敏感性,并对其致病性也具有一定的影响。 展开更多
关键词 果生炭疽菌 蛋白-O-岩藻糖基转移酶1 CfPOFUT1 药剂敏感性 致病力
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核心岩藻糖基转移酶siRNA抑制肾小管上皮细胞转化生长因子β-Smad2/3通路活化
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作者 王大鹏 林洪丽 +6 位作者 董毳 沈楠 孙艳玲 谢华 于长青 王楠 单路娟 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期763-768,共6页
目的探讨α-1,6核心岩藻糖基转移酶(FUT8)小分子干扰RNA(siRNA)对肾小管上皮细胞转化生长因子(TGF)β.Smad2/3信号通路的影响。方法HK.2细胞共分为6组:正常组、阴性对照组、TGF-β1组、TGF-β1加FUT8干扰组、TGF-β1加阴性... 目的探讨α-1,6核心岩藻糖基转移酶(FUT8)小分子干扰RNA(siRNA)对肾小管上皮细胞转化生长因子(TGF)β.Smad2/3信号通路的影响。方法HK.2细胞共分为6组:正常组、阴性对照组、TGF-β1组、TGF-β1加FUT8干扰组、TGF-β1加阴性对照组、FUT8干扰组。利用外源性TGF-β1激活HK-2细胞TGF-β—Smad2/3信号通路。应用siRNA技术沉默FUT8。用免疫荧光方法测定细胞表面核心岩藻糖链表达;用免疫沉淀、凝集素免疫印迹以及免疫双染的方法测定FUT8基因沉默后TGF-αⅡ型受体(TGF-βRⅡ)、TGFα-Ⅰ型受体(ALK-5)的核心岩藻糖基化变化,并检测Smad2/3蛋白表达和磷酸化(P).Smad2/3蛋白表达及其核转位的变化。结果与正常组及阴性对照组相比,加入5p^g/L的TGF-β1孵育HK-2细胞48h,能显著上调TGF-βRⅡ和ALK-5蛋白表达水平(P〈0.05),导致p-Smad2/3表达水平明显升高(P〈0.05),并促使其发生核转位。HK-2细胞表面存在核心岩藻糖链表达。与正常组及阴性对照组相比,TGF-β1孵育后,TGF-βRⅡ与ALK-5两种受体的核心岩藻糖链均显著升高(P〈0.05),FUT8siRNA能显著抑制TGF-βRII与ALK-5核心岩藻糖链表达(P〈0.05),从而抑制P—Smad2/3表达升高(P〈0.05)及其核转位,但不影响TGF-βRⅡ和ALK-5的蛋白表达(P〉0.05)。结论在肾小管上皮细胞中,TGF-βRⅡ和ALK-5蛋白翻译后的核心岩藻糖基化修饰是它们发挥生物学功能所需要的,阻止TGF-βRⅡ和ALK-5的核心岩藻糖基化,能抑制TGF-β—Smad2/3信号转导通路的活化。 展开更多
关键词 岩藻糖基转移酶 受体 转化生长因子Β RNA 小分子干扰 SMAD蛋白质类 肾小管上皮细胞
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基于生物信息学分析POFUT1表达与肿瘤免疫浸润水平及患者预后的相关性研究
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作者 于帆 楼爽 +1 位作者 韦唯 周义文 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第2期81-85,174,共6页
目的分析蛋白-O-岩藻糖基转移酶1(protein O-fucosyltransferase 1,POFUT1)表达与肿瘤免疫浸润水平及患者预后的关系,探索POFUT1在肿瘤免疫治疗方面的价值。方法基于泛癌数据利用R软件分析各类肿瘤组织中POFUT1表达水平变化及其与各类... 目的分析蛋白-O-岩藻糖基转移酶1(protein O-fucosyltransferase 1,POFUT1)表达与肿瘤免疫浸润水平及患者预后的关系,探索POFUT1在肿瘤免疫治疗方面的价值。方法基于泛癌数据利用R软件分析各类肿瘤组织中POFUT1表达水平变化及其与各类肿瘤患者风险比的相关性,筛选患者预后与POFUT1表达相关的肿瘤类型;利用String数据库构建蛋白质互作网络,筛选以POFUT1关联基因并进行功能富集分析;利用estimate包分析所筛选肿瘤组织POFUT1表达与免疫浸润评分的相关性;利用TIMER数据库分析肿瘤组织POFUT1表达与各类免疫细胞浸润水平的相关性及免疫细胞浸润水平与患者预后的相关性。结果POFUT1在14类肿瘤中的高水平表达差异具有统计学意义(均P<0.05),与低级别胶质瘤、肺腺癌、甲状腺癌的不良预后相关(Hazard Ratio>1,P<0.05);POFUT1及其关联基因高度参与Notch信号通路、淋巴细胞激活及免疫过程调控进程;POFUT1表达水平与低级别胶质瘤中的B细胞、CD8^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞与树突状细胞、肺腺癌中的中性粒细胞、甲状腺癌中的B细胞、CD4^(+)T细胞及巨噬细胞的浸润程度均呈正相关(|r|>0.2,P<0.05);上述6类免疫细胞高浸润程度均与低级别胶质瘤患者较差的预后相关(Hazard Ratio>1,P<0.05)。结论POFUT1通过对免疫调控相关进程的高度参与,对部分肿瘤免疫浸润水平产生影响并影响患者预后,具有成为免疫治疗靶点的潜力。 展开更多
关键词 蛋白-O-岩藻糖基转移酶1 肿瘤免疫微环境 免疫浸润 泛癌分析
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